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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8as8 | ||||||
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タイトル | E. coli Wadjet JetABC monomer | ||||||
要素 |
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キーワード | DNA BINDING PROTEIN / SMC complexes / bacterial immunity / defense system / DNA loop extrusion / Wadjet / JetABCD / DNA cleavage / plasmid restriction / mksBEFG / mobile genetic elements / horizontal gene transfer / eptABCD / mukBEF | ||||||
機能・相同性 | Wadjet protein JetB / Domain of unknown function (DUF4194) / Protein of unknown function DUF3375 / Protein of unknown function (DUF3375) / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase / ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / DUF4194 domain-containing protein / ATP synthase / DUF3375 family protein 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3 Å | ||||||
データ登録者 | Roisne-Hamelin, F. / Beckert, B. / Li, Y. / Myasnikov, A. / Gruber, S. | ||||||
資金援助 | European Union, 1件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2022 タイトル: DNA-measuring Wadjet SMC ATPases restrict smaller circular plasmids by DNA cleavage. 著者: Hon Wing Liu / Florian Roisné-Hamelin / Bertrand Beckert / Yan Li / Alexander Myasnikov / Stephan Gruber / 要旨: Structural maintenance of chromosome (SMC) complexes fold DNA by loop extrusion to support chromosome segregation and genome maintenance. Wadjet systems (JetABCD/MksBEFG/EptABCD) are derivative SMC ...Structural maintenance of chromosome (SMC) complexes fold DNA by loop extrusion to support chromosome segregation and genome maintenance. Wadjet systems (JetABCD/MksBEFG/EptABCD) are derivative SMC complexes with roles in bacterial immunity against selfish DNA. Here, we show that JetABCD restricts circular plasmids with an upper size limit of about 100 kb, whereas a linear plasmid evades restriction. Purified JetABCD complexes cleave circular DNA molecules, regardless of the DNA helical topology; cleavage is DNA sequence nonspecific and depends on the SMC ATPase. A cryo-EM structure reveals a distinct JetABC dimer-of-dimers geometry, with the two SMC dimers facing in opposite direction-rather than the same as observed with MukBEF. We hypothesize that JetABCD is a DNA-shape-specific endonuclease and propose the "total extrusion model" for DNA cleavage exclusively when extrusion of an entire plasmid has been completed by a JetABCD complex. Total extrusion cannot be achieved on the larger chromosome, explaining how self-DNA may evade processing. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8as8.cif.gz | 445.2 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8as8.ent.gz | 344.6 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8as8.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8as8_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8as8_full_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8as8_validation.xml.gz | 83 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8as8_validation.cif.gz | 120.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/as/8as8 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/as/8as8 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 15609MC 8bfnC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 124562.938 Da / 分子数: 2 / 変異: G added to C-terminus / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: C9160_20650 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A4T5T6V2 #2: タンパク質 | 分子量: 28020.416 Da / 分子数: 2 / 変異: G added to C-terminus / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: BvCmsKKP036_00455 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A4C9B499 #3: タンパク質 | | 分子量: 63350.883 Da / 分子数: 1 変異: MAHHHHHHHHHHGGSSAWSHPQFEKGGGSGGGSGGGSWSHPQFEKLEVLFQGPAA tag added at N-terminus; G added to C-terminus 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 株: GF4-3 / 遺伝子: WP_171460373 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A4V3QHV5 #4: 化合物 | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: JetABC(D) / タイプ: COMPLEX 詳細: E. coli JetABCD was purified by gel filtration. Note that JetD is not visible in the map. Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 株: GF4-3 |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 株: BL21(DE3) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 283 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 600 nm / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 電子線照射量: 40 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア | 名称: RELION / バージョン: 4 / カテゴリ: 分類 |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
3次元再構成 | 解像度: 3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 124689 / 対称性のタイプ: POINT |