+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8ap4 | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Structure of Escherischia coli heat shock protein Hsp15 in complex with ribosomal 50S subunits bearing peptidyl-tRNA | ||||||
要素 |
| ||||||
キーワード | TRANSLATION / S4 domain / heat shock / stress response / ribosome quality control | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of cytoplasmic translational initiation / ribosomal large subunit binding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation ...negative regulation of cytoplasmic translational initiation / ribosomal large subunit binding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / cytosolic ribosome assembly / response to reactive oxygen species / regulation of cell growth / translational initiation / DNA-templated transcription termination / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / large ribosomal subunit / ribosome binding / cellular response to heat / large ribosomal subunit rRNA binding / 5S rRNA binding / transferase activity / response to heat / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / negative regulation of translation / single-stranded RNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3 Å | ||||||
データ登録者 | Safdari, H.A. / Wilson, D.N. | ||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
| ||||||
引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2022 タイトル: Structure of Escherichia coli heat shock protein Hsp15 in complex with the ribosomal 50S subunit bearing peptidyl-tRNA. 著者: Haaris A Safdari / Sergo Kasvandik / Christine Polte / Zoya Ignatova / Tanel Tenson / Daniel N Wilson / 要旨: In Escherichia coli, the heat shock protein 15 (Hsp15) is part of the cellular response to elevated temperature. Hsp15 interacts with peptidyl-tRNA-50S complexes that arise upon dissociation of ...In Escherichia coli, the heat shock protein 15 (Hsp15) is part of the cellular response to elevated temperature. Hsp15 interacts with peptidyl-tRNA-50S complexes that arise upon dissociation of translating 70S ribosomes, and is proposed to facilitate their rescue and recycling. A previous structure of E. coli Hsp15 in complex with peptidyl-tRNA-50S complex reported a binding site located at the central protuberance of the 50S subunit. By contrast, recent structures of RqcP, the Hsp15 homolog in Bacillus subtilis, in complex with peptidyl-tRNA-50S complexes have revealed a distinct site positioned between the anticodon-stem-loop (ASL) of the P-site tRNA and H69 of the 23S rRNA. Here we demonstrate that exposure of E. coli cells to heat shock leads to a decrease in 70S ribosomes and accumulation of 50S subunits, thus identifying a natural substrate for Hsp15 binding. Additionally, we have determined a cryo-EM reconstruction of the Hsp15-50S-peptidyl-tRNA complex isolated from heat shocked E. coli cells, revealing that Hsp15 binds to the 50S-peptidyl-tRNA complex analogously to its B. subtilis homolog RqcP. Collectively, our findings support a model where Hsp15 stabilizes the peptidyl-tRNA in the P-site and thereby promotes access to the A-site for putative rescue factors to release the aberrant nascent polypeptide chain. | ||||||
履歴 |
|
-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
---|
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8ap4.cif.gz | 2.2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | pdb8ap4.ent.gz | 1.7 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8ap4.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8ap4_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | 8ap4_full_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8ap4_validation.xml.gz | 132.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8ap4_validation.cif.gz | 234.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ap/8ap4 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ap/8ap4 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 15558MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
---|---|
類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
|
---|---|
1 |
|
-要素
+50S ribosomal protein ... , 29種, 29分子 01234cdefghijklmnopqrstuvwxyz
-タンパク質 , 1種, 1分子 A
#6: タンパク質 | 分子量: 15528.927 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0ACG8 |
---|
-RNA鎖 , 3種, 3分子 Zab
#7: RNA鎖 | 分子量: 24497.602 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: GenBank: 2072462595 |
---|---|
#8: RNA鎖 | 分子量: 941685.500 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: GenBank: 939732440 |
#9: RNA鎖 | 分子量: 38790.090 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: GenBank: 1845258627 |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
---|---|
Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Structure of Escherischia coli heat shock protein Hsp15 in complex with ribosomal 50S subunits bearing peptidyl-tRNA タイプ: RIBOSOME / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: BW25113 |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: BW25113 |
緩衝液 | pH: 7.46 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm |
撮影 | 電子線照射量: 1 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: UCSF ChimeraX / バージョン: 1.4/v9 / 分類: モデル構築 / URL: https://www.rbvi.ucsf.edu/chimerax/ / Os: macOS / タイプ: package |
---|---|
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
3次元再構成 | 解像度: 3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 247060 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 対称性のタイプ: POINT |
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL |
精密化 | 最高解像度: 3 Å |