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- PDB-8ajl: Structure of the Ancestral Scaffold Antigen-6 of Coronavirus Spik... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8ajl
タイトルStructure of the Ancestral Scaffold Antigen-6 of Coronavirus Spike protein
要素Spike glycoprotein,Fibritin
キーワードBIOSYNTHETIC PROTEIN / Ancestor / Spike / Coronavirus / Scaffold / S-protein / Protein Engineering
機能・相同性
機能・相同性情報


virion component / Maturation of spike protein / viral translation / Translation of Structural Proteins / Virion Assembly and Release / host cell surface / host extracellular space / suppression by virus of host tetherin activity / Induction of Cell-Cell Fusion / structural constituent of virion ...virion component / Maturation of spike protein / viral translation / Translation of Structural Proteins / Virion Assembly and Release / host cell surface / host extracellular space / suppression by virus of host tetherin activity / Induction of Cell-Cell Fusion / structural constituent of virion / entry receptor-mediated virion attachment to host cell / host cell endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment membrane / receptor-mediated endocytosis of virus by host cell / membrane fusion / Attachment and Entry / positive regulation of viral entry into host cell / receptor-mediated virion attachment to host cell / receptor ligand activity / host cell surface receptor binding / fusion of virus membrane with host plasma membrane / fusion of virus membrane with host endosome membrane / viral envelope / virion attachment to host cell / SARS-CoV-2 activates/modulates innate and adaptive immune responses / host cell plasma membrane / virion membrane / identical protein binding / membrane / plasma membrane
類似検索 - 分子機能
Fibritin C-terminal / Fibritin C-terminal region / Spike (S) protein S1 subunit, receptor-binding domain, SARS-CoV-2 / Spike (S) protein S1 subunit, N-terminal domain, SARS-CoV-like / Betacoronavirus spike (S) glycoprotein S1 subunit N-terminal (NTD) domain profile. / Spike glycoprotein, N-terminal domain superfamily / Betacoronavirus spike (S) glycoprotein S1 subunit C-terminal (CTD) domain profile. / Spike glycoprotein, betacoronavirus / Spike (S) protein S1 subunit, receptor-binding domain, betacoronavirus / Spike S1 subunit, receptor binding domain superfamily, betacoronavirus ...Fibritin C-terminal / Fibritin C-terminal region / Spike (S) protein S1 subunit, receptor-binding domain, SARS-CoV-2 / Spike (S) protein S1 subunit, N-terminal domain, SARS-CoV-like / Betacoronavirus spike (S) glycoprotein S1 subunit N-terminal (NTD) domain profile. / Spike glycoprotein, N-terminal domain superfamily / Betacoronavirus spike (S) glycoprotein S1 subunit C-terminal (CTD) domain profile. / Spike glycoprotein, betacoronavirus / Spike (S) protein S1 subunit, receptor-binding domain, betacoronavirus / Spike S1 subunit, receptor binding domain superfamily, betacoronavirus / Betacoronavirus spike glycoprotein S1, receptor binding / Spike glycoprotein S1, N-terminal domain, betacoronavirus-like / Betacoronavirus-like spike glycoprotein S1, N-terminal / Spike glycoprotein S2, coronavirus, heptad repeat 1 / Spike glycoprotein S2, coronavirus, heptad repeat 2 / Coronavirus spike (S) glycoprotein S2 subunit heptad repeat 2 (HR2) region profile. / Coronavirus spike (S) glycoprotein S2 subunit heptad repeat 1 (HR1) region profile. / Spike glycoprotein S2 superfamily, coronavirus / Spike glycoprotein S2, coronavirus / Coronavirus spike glycoprotein S2 / Coronavirus spike glycoprotein S1, C-terminal / Coronavirus spike glycoprotein S1, C-terminal
類似検索 - ドメイン・相同性
Spike glycoprotein / Fibritin
類似検索 - 構成要素
生物種Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS コロナウイルス)
Enterobacteria phage T4 (ファージ)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.77 Å
データ登録者Hueting, D. / Schriever, K. / Wallden, K. / Andrell, J. / Syren, P.O.
資金援助 スウェーデン, European Union, 5件
組織認可番号国
Other government2019-700
Other governmentSNIC 2021/5-70
The Swedish Foundation for Strategic ResearchFFF20-0027 スウェーデン
European Union (EU)ATAC, 101003650European Union
Knut and Alice Wallenberg FoundationSciLifeLab/KAW national COVID-19 research program project grant 2020 (KAW 2020.0182) スウェーデン
引用
ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023
タイトル: Design, structure and plasma binding of ancestral β-CoV scaffold antigens.
著者: David Hueting / Karen Schriever / Rui Sun / Stelios Vlachiotis / Fanglei Zuo / Likun Du / Helena Persson / Camilla Hofström / Mats Ohlin / Karin Walldén / Marcus Buggert / Lennart ...著者: David Hueting / Karen Schriever / Rui Sun / Stelios Vlachiotis / Fanglei Zuo / Likun Du / Helena Persson / Camilla Hofström / Mats Ohlin / Karin Walldén / Marcus Buggert / Lennart Hammarström / Harold Marcotte / Qiang Pan-Hammarström / Juni Andréll / Per-Olof Syrén /
要旨: We report the application of ancestral sequence reconstruction on coronavirus spike protein, resulting in stable and highly soluble ancestral scaffold antigens (AnSAs). The AnSAs interact with plasma ...We report the application of ancestral sequence reconstruction on coronavirus spike protein, resulting in stable and highly soluble ancestral scaffold antigens (AnSAs). The AnSAs interact with plasma of patients recovered from COVID-19 but do not bind to the human angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) receptor. Cryo-EM analysis of the AnSAs yield high resolution structures (2.6-2.8 Å) indicating a closed pre-fusion conformation in which all three receptor-binding domains (RBDs) are facing downwards. The structures reveal an intricate hydrogen-bonding network mediated by well-resolved loops, both within and across monomers, tethering the N-terminal domain and RBD together. We show that AnSA-5 can induce and boost a broad-spectrum immune response against the wild-type RBD as well as circulating variants of concern in an immune organoid model derived from tonsils. Finally, we highlight how AnSAs are potent scaffolds by replacing the ancestral RBD with the wild-type sequence, which restores ACE2 binding and increases the interaction with convalescent plasma.
#1: ジャーナル: Res Sq / 年: 2023
タイトル: Design, structure and plasma binding of ancestral beta-CoV scaffold antigens
著者: Hueting, D. / Schriever, K. / Zuo, F. / Du, L. / Persson, H. / Hofstrom, C. / Ohlin, M. / Wallden, K. / Hammarstrom, L. / Marcotte, H. / Pan-Hammarstrom, Q. / Andrell, J. / Syren, P.O.
履歴
登録2022年7月28日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02023年8月16日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12023年8月30日Group: Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.year
改定 1.22023年11月1日Group: Database references / Refinement description
カテゴリ: citation / citation_author / em_3d_fitting_list
Item: _em_3d_fitting_list.accession_code / _em_3d_fitting_list.initial_refinement_model_id ..._em_3d_fitting_list.accession_code / _em_3d_fitting_list.initial_refinement_model_id / _em_3d_fitting_list.source_name / _em_3d_fitting_list.type

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Spike glycoprotein,Fibritin
C: Spike glycoprotein,Fibritin
B: Spike glycoprotein,Fibritin
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)430,75457
ポリマ－416,9803
非ポリマー13,77454
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551
Buried area52830 Å2
ΔGint63 kcal/mol
Surface area134930 Å2
手法PISA

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要素

#1: タンパク質 Spike glycoprotein,Fibritin / S glycoprotein / E2 / Peplomer protein / Collar protein / Whisker antigen control protein


分子量: 138993.469 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現
詳細: AnSA-6 full sequence 1-19 WT SARS-CoV-2 S protein signaling peptide 672-679 No density. 1139 onwards, No density. Expression tags.,AnSA-6 full sequence 1-19 WT SARS-CoV-2 S protein signaling ...詳細: AnSA-6 full sequence 1-19 WT SARS-CoV-2 S protein signaling peptide 672-679 No density. 1139 onwards, No density. Expression tags.,AnSA-6 full sequence 1-19 WT SARS-CoV-2 S protein signaling peptide 672-679 No density. 1139 onwards, No density. Expression tags.
由来: (組換発現) Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS コロナウイルス), (組換発現) Enterobacteria phage T4 (Bacteriophage T4) (ウイルス)
遺伝子: S, 2, wac / プラスミド: pMx series / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 株 (発現宿主): Expi293F / 参照: UniProt: P0DTC2, UniProt: P10104
#2: 多糖
2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose


タイプ: oligosaccharide / 分子量: 424.401 Da / 分子数: 9 / 由来タイプ: 組換発現
記述子タイププログラム
DGlcpNAcb1-4DGlcpNAcb1-Glycam Condensed SequenceGMML 1.0
WURCS=2.0/1,2,1/[a2122h-1b_1-5_2*NCC/3=O]/1-1/a4-b1WURCSPDB2Glycan 1.1.0
[]{[(4+1)][b-D-GlcpNAc]{[(4+1)][b-D-GlcpNAc]{}}}LINUCSPDB-CARE
#3: 糖...
ChemComp-NAG / 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / N-acetyl-beta-D-glucosamine / 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucose / 2-acetamido-2-deoxy-D-glucose / 2-acetamido-2-deoxy-glucose / N-ACETYL-D-GLUCOSAMINE / N-アセチル-β-D-グルコサミン


タイプ: D-saccharide, beta linking / 分子量: 221.208 Da / 分子数: 45 / 由来タイプ: 合成 / 式: C8H15NO6 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
識別子タイププログラム
DGlcpNAcbCONDENSED IUPAC CARBOHYDRATE SYMBOLGMML 1.0
N-acetyl-b-D-glucopyranosamineCOMMON NAMEGMML 1.0
b-D-GlcpNAcIUPAC CARBOHYDRATE SYMBOLPDB-CARE 1.0
GlcNAcSNFG CARBOHYDRATE SYMBOLGMML 1.0
研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Ancestral S-protein of coronaviruses related to SARS-CoV-2
タイプ: COMPLEX
詳細: Ancestral coronavirus generated by Ancestral sequence reconstruction expressed in human cells.
Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT
分子量実験値: NO
由来(天然)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID
21Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS コロナウイルス)2901879
31Enterobacteria phage T4 (Bacteriophage T4) (ウイルス)10665
由来(組換発現)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID株
21Homo sapiens (ヒト)9606Expi293F
31Homo sapiens (ヒト)9606Expi293F
緩衝液pH: 7.5
緩衝液成分
ID濃度名称式Buffer-ID
120 mMHEPESHEPES1
2100 mMsodium chlorideNaCl1
試料濃度: 1.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: TFS KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 倍率（公称値）: 105000 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 2000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 600 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影電子線照射量: 1.11 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
電子光学装置エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.19.2_4158: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
1cryoSPARC3.3.1粒子像選択
2EPUv2.11.1画像取得
4cryoSPARC3.3.1CTF補正
7ISOLDE1.1モデルフィッティング
9PHENIX1.3モデル精密化
13ISOLDE1.1３次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 2035826
3次元再構成解像度: 2.77 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 253429 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築
IDPDB-ID 3D fitting-IDAccession codeInitial refinement model-IDSource nameタイプ
16ZOZ

6zoz

16ZOZ1PDBexperimental model
27BNN

7bnn

17BNN2PDBexperimental model
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00627354
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.68537248
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d12.6449861
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0494401
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0094755

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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