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基本情報
登録情報
データベース: PDB / ID: 8acz
タイトル
Solid-State NMR Atomic-Resolution Structure of the Protein Encoded by Gene V of fd Bacteriophage in Complex with Viral ssDNA
要素
DNA-Binding protein G5P
キーワード
DNA BINDING PROTEIN / nucleoprotein complex / ssDNA binding
機能・相同性
Bacteriophage M13, G5P, DNA-binding / Helix-destabilising protein / rolling circle single-stranded viral DNA replication / single-stranded DNA binding / DNA replication / Nucleic acid-binding, OB-fold / DNA-Binding protein G5P
ジャーナル: J.Am.Chem.Soc. / 年: 2023 タイトル: Atomic-Resolution Structure of the Protein Encoded by Gene V of fd Bacteriophage in Complex with Viral ssDNA Determined by Magic-Angle Spinning Solid-State NMR. 著者: Shamir, Y. / Goldbourt, A.
根拠: native gel electrophoresis, The binding ratio of 4 nucleotides per monomer used for sample preparation of the nucleoprotein complex was verified via gel electrophoresis.
タイプ
名称
対称操作
数
identity operation
1_555
1
NMR アンサンブル
データ
基準
コンフォーマー数 (登録 / 計算)
11 / 100
structures with the lowest energy
代表モデル
モデル #1
minimized average structure
-
要素
#1: タンパク質
DNA-BindingproteinG5P / G5P / Single-stranded DNA-binding protein
分子量: 11096.758 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: isotopically labeled gVp in complex with natural abundance viral ssDNA of fd bacteriophage 由来: (組換発現) Inoviridae (ウイルス) / 発現宿主: Escherichia coli BL21 (大腸菌) / 参照: UniProt: P69544
-
実験情報
-
実験
実験
手法: 個体NMR
NMR実験
Conditions-ID
Experiment-ID
Solution-ID
Sample state
Spectrometer-ID
タイプ
1
1
1
isotropic
1
2DDARR15ms
1
2
1
isotropic
1
2DDARR100ms
1
3
2
isotropic
1
2DDARR50ms
1
4
2
isotropic
1
2DDARR100ms
1
5
2
isotropic
1
2DDARR150ms
1
8
2
isotropic
1
2DCORD150ms
1
7
2
isotropic
1
2DDARR300ms
1
6
2
isotropic
1
2DCORD300ms
1
9
2
isotropic
1
2DDARR300ms #2
1
10
2
isotropic
1
2DCHHC150u
1
11
2
isotropic
1
2DCHHC300u
1
12
1
isotropic
1
2DDARR5ms
1
13
1
isotropic
1
2DDARR250ms
1
14
1
isotropic
1
2DRFDR6
1
15
1
isotropic
1
2D INADEQUATE
1
16
1
isotropic
1
3DNCOCX25
1
17
1
isotropic
1
3DNCACX25
1
18
2
isotropic
1
2DDARR5ms
1
19
2
isotropic
1
2DDARR15ms
1
20
2
isotropic
1
2DNCA
1
21
2
isotropic
1
2DNCO
1
22
2
isotropic
1
3DNCOCX100
1
23
2
isotropic
1
3DNCACX100
-
試料調製
詳細
タイプ
Solution-ID
内容
Label
溶媒系
solid
1
200 g/L [U-100% 13C; U-100% 15N] gVp of fd bacteriophage in complex with the viral ssDNA, 22 g/L ssDNA of fd phage, 200mM NaCl, 1mM EDTA and 10mM Tris-HCl
U-13C/15N gVp in complex with fd ssDNA
200mM NaCl, 1mM EDTA and 10mM Tris-HCl
solid
2
200 g/L [1,3-13C]-glycerol gVp of fd bacteriophage in complex with the viral ssDNA, 22 g/L ssDNA of fd phage, 200mM NaCl, 1mM EDTA and 10mM Tris-HCl
[1,3-13C]-glycerol-labeled gVp in complex with fd ssDNA
200mM NaCl, 1mM EDTA and 10mM Tris-HCl
試料
濃度 (mg/ml)
構成要素
Isotopic labeling
Solution-ID
200g/L
gVpoffdbacteriophageincomplexwiththeviralssDNA
[U-100% 13C; U-100% 15N]
1
22g/L
ssDNAoffdphage
naturalabundance
1
200g/L
gVpoffdbacteriophageincomplexwiththeviralssDNA
[1,3-13C]-glycerol
2
22g/L
ssDNAoffdphage
naturalabundance
2
試料状態
イオン強度: 200mM NaCl mM / Label: gvp_sample_conditions / pH: 7.4 / 圧: 1 atm / 温度: 263 K
-
NMR測定
NMRスペクトロメーター
タイプ: Bruker AVANCE III / 製造業者: Bruker / モデル: AVANCE III / 磁場強度: 600 MHz
-
解析
NMR software
名称
バージョン
開発者
分類
X-PLOR NIH
Schwieters, Kuszewski, TjandraandClore
精密化
X-PLOR NIH
Schwieters, Kuszewski, TjandraandClore
structurecalculation
NMRFAM-SPARKY
1.47
LeeW, TonelliM, MarkleyJL.
chemicalshiftassignment
NMRFAM-SPARKY
1.47
LeeW, TonelliM, MarkleyJL.
peakpicking
NMRPipe
Delaglio, Grzesiek, Vuister, Zhu, PfeiferandBax
解析
TopSpin
BrukerBiospin
collection
精密化
手法: simulated annealing / ソフトェア番号: 1
代表構造
選択基準: minimized average structure
NMRアンサンブル
コンフォーマー選択の基準: structures with the lowest energy 計算したコンフォーマーの数: 100 / 登録したコンフォーマーの数: 11