+
データを開く
-
基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7w37 | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Structure of USP14-bound human 26S proteasome in state EA1_UBL | ||||||
![]() |
| ||||||
![]() | HYDROLASE / Proteasome / AAA-ATPase / Deubiquitinase / USP14 | ||||||
機能・相同性 | ![]() negative regulation of ERAD pathway / Impaired BRCA2 translocation to the nucleus / Impaired BRCA2 binding to SEM1 (DSS1) / thyrotropin-releasing hormone receptor binding / modulation by host of viral transcription / regulation of chemotaxis / deubiquitinase activity / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; オメガペプチターゼ / protein K48-linked deubiquitination / integrator complex ...negative regulation of ERAD pathway / Impaired BRCA2 translocation to the nucleus / Impaired BRCA2 binding to SEM1 (DSS1) / thyrotropin-releasing hormone receptor binding / modulation by host of viral transcription / regulation of chemotaxis / deubiquitinase activity / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; オメガペプチターゼ / protein K48-linked deubiquitination / integrator complex / proteasome accessory complex / purine ribonucleoside triphosphate binding / meiosis I / cytosolic proteasome complex / proteasome regulatory particle / positive regulation of proteasomal protein catabolic process / proteasome regulatory particle, lid subcomplex / proteasome-activating activity / proteasome regulatory particle, base subcomplex / metal-dependent deubiquitinase activity / negative regulation of programmed cell death / protein K63-linked deubiquitination / Regulation of ornithine decarboxylase (ODC) / Proteasome assembly / Homologous DNA Pairing and Strand Exchange / Defective homologous recombination repair (HRR) due to BRCA1 loss of function / Defective HDR through Homologous Recombination Repair (HRR) due to PALB2 loss of BRCA1 binding function / Defective HDR through Homologous Recombination Repair (HRR) due to PALB2 loss of BRCA2/RAD51/RAD51C binding function / Resolution of D-loop Structures through Synthesis-Dependent Strand Annealing (SDSA) / Cross-presentation of soluble exogenous antigens (endosomes) / Resolution of D-loop Structures through Holliday Junction Intermediates / proteasome core complex / Somitogenesis / endopeptidase inhibitor activity / K63-linked deubiquitinase activity / Impaired BRCA2 binding to RAD51 / proteasome binding / myofibril / transcription factor binding / regulation of protein catabolic process / immune system process / proteasome storage granule / Presynaptic phase of homologous DNA pairing and strand exchange / general transcription initiation factor binding / blastocyst development / polyubiquitin modification-dependent protein binding / protein deubiquitination / negative regulation of ubiquitin-dependent protein catabolic process / endopeptidase activator activity / NF-kappaB binding / proteasome endopeptidase complex / proteasome assembly / proteasome core complex, beta-subunit complex / threonine-type endopeptidase activity / proteasome core complex, alpha-subunit complex / presynaptic cytosol / mRNA export from nucleus / enzyme regulator activity / regulation of proteasomal protein catabolic process / proteasome complex / proteolysis involved in protein catabolic process / sarcomere / Regulation of activated PAK-2p34 by proteasome mediated degradation / Autodegradation of Cdh1 by Cdh1:APC/C / APC/C:Cdc20 mediated degradation of Securin / N-glycan trimming in the ER and Calnexin/Calreticulin cycle / Asymmetric localization of PCP proteins / Ubiquitin-dependent degradation of Cyclin D / Regulation of NF-kappa B signaling / SCF-beta-TrCP mediated degradation of Emi1 / NIK-->noncanonical NF-kB signaling / TNFR2 non-canonical NF-kB pathway / stem cell differentiation / AUF1 (hnRNP D0) binds and destabilizes mRNA / Vpu mediated degradation of CD4 / Assembly of the pre-replicative complex / Ubiquitin Mediated Degradation of Phosphorylated Cdc25A / Degradation of DVL / Cdc20:Phospho-APC/C mediated degradation of Cyclin A / Dectin-1 mediated noncanonical NF-kB signaling / lipopolysaccharide binding / Degradation of AXIN / Hh mutants are degraded by ERAD / negative regulation of inflammatory response to antigenic stimulus / Activation of NF-kappaB in B cells / P-body / Degradation of GLI1 by the proteasome / G2/M Checkpoints / Hedgehog ligand biogenesis / Defective CFTR causes cystic fibrosis / Autodegradation of the E3 ubiquitin ligase COP1 / Negative regulation of NOTCH4 signaling / GSK3B and BTRC:CUL1-mediated-degradation of NFE2L2 / Vif-mediated degradation of APOBEC3G / Regulation of RUNX3 expression and activity / double-strand break repair via homologous recombination / Hedgehog 'on' state / Degradation of GLI2 by the proteasome / GLI3 is processed to GLI3R by the proteasome / FBXL7 down-regulates AURKA during mitotic entry and in early mitosis 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3 Å | ||||||
![]() | Zhang, S. / Zou, S. / Yin, D. / Wu, Z. / Mao, Y. | ||||||
資金援助 | ![]()
| ||||||
![]() | ![]() タイトル: USP14-regulated allostery of the human proteasome by time-resolved cryo-EM. 著者: Shuwen Zhang / Shitao Zou / Deyao Yin / Lihong Zhao / Daniel Finley / Zhaolong Wu / Youdong Mao / ![]() ![]() 要旨: Proteasomal degradation of ubiquitylated proteins is tightly regulated at multiple levels. A primary regulatory checkpoint is the removal of ubiquitin chains from substrates by the deubiquitylating ...Proteasomal degradation of ubiquitylated proteins is tightly regulated at multiple levels. A primary regulatory checkpoint is the removal of ubiquitin chains from substrates by the deubiquitylating enzyme ubiquitin-specific protease 14 (USP14), which reversibly binds the proteasome and confers the ability to edit and reject substrates. How USP14 is activated and regulates proteasome function remain unknown. Here we present high-resolution cryo-electron microscopy structures of human USP14 in complex with the 26S proteasome in 13 distinct conformational states captured during degradation of polyubiquitylated proteins. Time-resolved cryo-electron microscopy analysis of the conformational continuum revealed two parallel pathways of proteasome state transitions induced by USP14, and captured transient conversion of substrate-engaged intermediates into substrate-inhibited intermediates. On the substrate-engaged pathway, ubiquitin-dependent activation of USP14 allosterically reprograms the conformational landscape of the AAA-ATPase motor and stimulates opening of the core particle gate, enabling observation of a near-complete cycle of asymmetric ATP hydrolysis around the ATPase ring during processive substrate unfolding. Dynamic USP14-ATPase interactions decouple the ATPase activity from RPN11-catalysed deubiquitylation and kinetically introduce three regulatory checkpoints on the proteasome, at the steps of ubiquitin recognition, substrate translocation initiation and ubiquitin chain recycling. These findings provide insights into the complete functional cycle of the USP14-regulated proteasome and establish mechanistic foundations for the discovery of USP14-targeted therapies. | ||||||
履歴 |
|
-
構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
---|
-
ダウンロードとリンク
-
ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 2.3 MB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.5 MB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | ![]() | 1.5 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 277.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 462.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 32272MC ![]() 7w38C ![]() 7w39C ![]() 7w3aC ![]() 7w3bC ![]() 7w3cC ![]() 7w3fC ![]() 7w3gC ![]() 7w3hC ![]() 7w3iC ![]() 7w3jC ![]() 7w3kC ![]() 7w3mC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
---|---|
類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
-
リンク
-
集合体
登録構造単位 | ![]()
|
---|---|
1 |
|
-
要素
-26S protease regulatory subunit ... , 4種, 4分子 ABDF
#1: タンパク質 | 分子量: 48700.805 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
---|---|
#2: タンパク質 | 分子量: 49260.504 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#4: タンパク質 | 分子量: 47426.141 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#6: タンパク質 | 分子量: 49266.457 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
-タンパク質 , 3種, 4分子 CLlx
#3: タンパク質 | 分子量: 44852.121 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() | ||
---|---|---|---|
#12: タンパク質 | 分子量: 30281.473 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #32: タンパク質 | | 分子量: 56133.926 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() |
-26S proteasome ... , 13種, 13分子 EUVWXYZabcdfe
#5: タンパク質 | 分子量: 45867.027 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
---|---|
#21: タンパク質 | 分子量: 105958.234 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#22: タンパク質 | 分子量: 61066.500 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#23: タンパク質 | 分子量: 52979.359 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#24: タンパク質 | 分子量: 47526.688 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#25: タンパク質 | 分子量: 45592.285 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#26: タンパク質 | 分子量: 37086.441 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#27: タンパク質 | 分子量: 42995.359 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#28: タンパク質 | 分子量: 40781.590 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#29: タンパク質 | 分子量: 34620.023 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() 参照: UniProt: O00487, 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; オメガペプチターゼ |
#30: タンパク質 | 分子量: 39667.871 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#31: タンパク質 | 分子量: 100313.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#33: タンパク質 | 分子量: 8284.611 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
-Proteasome subunit alpha type- ... , 6種, 12分子 GgHhIiJjKkMm
#7: タンパク質 | 分子量: 27432.459 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #8: タンパク質 | 分子量: 25927.535 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #9: タンパク質 | 分子量: 29525.842 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #10: タンパク質 | 分子量: 27929.891 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #11: タンパク質 | 分子量: 26435.977 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #13: タンパク質 | 分子量: 28469.252 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
---|
-Proteasome subunit beta type- ... , 7種, 14分子 NnOoPpQqRrSsTt
#14: タンパク質 | 分子量: 25377.652 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #15: タンパク質 | 分子量: 30000.418 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #16: タンパク質 | 分子量: 22972.896 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #17: タンパク質 | 分子量: 22864.277 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #18: タンパク質 | 分子量: 28510.248 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #19: タンパク質 | 分子量: 26522.396 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #20: タンパク質 | 分子量: 29231.178 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
---|
-非ポリマー , 4種, 13分子 






#34: 化合物 | ChemComp-ATP / #35: 化合物 | ChemComp-MG / #36: 化合物 | #37: 化合物 | ChemComp-ZN / | |
---|
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
---|---|
Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-
試料調製
構成要素 | 名称: 26S proteasome / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#33 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
---|---|
分子量 | 値: 1.6 MDa / 実験値: YES |
由来(天然) | 生物種: ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() |
緩衝液 | pH: 7 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-
電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 5000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 400 nm |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-
解析
ソフトウェア |
| ||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 367235 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 131.99 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
|