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万見
- PDB-7uui: Nucleoplasmic pre-60S intermediate of the Nog2 containing post-ro... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7uui
タイトルNucleoplasmic pre-60S intermediate of the Nog2 containing post-rotation state from a SPB1 D52A strain
要素Nucleolar GTP-binding protein 2
キーワードRIBOSOME / ribosome biogenesis / K-loop GTPase / GTPase / 5S rRNP
機能・相同性
機能・相同性情報


regulation of ribosomal subunit export from nucleus / preribosome, large subunit precursor / ribosomal large subunit export from nucleus / large ribosomal subunit rRNA binding / GTPase activity / nucleolus / GTP binding / nucleoplasm / nucleus
類似検索 - 分子機能
Nucleolar GTP-binding protein 2, N-terminal domain / Nucleolar GTP-binding protein 2 / NGP1NT (NUC091) domain / GTP-binding protein, orthogonal bundle domain superfamily / Circularly permuted (CP)-type guanine nucleotide-binding (G) domain / Circularly permuted (CP)-type guanine nucleotide-binding (G) domain profile. / 50S ribosome-binding GTPase / GTP binding domain / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE / : / Nucleolar GTP-binding protein 2
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å
データ登録者Sekulski, K. / Cruz, V.E. / Weirich, C.S. / Erzberger, J.P.
資金援助 米国, 3件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM135617-01 米国
Cancer Prevention and Research Institute of Texas (CPRIT)RR150074 米国
Robert A. Welch FoundationI-1897 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023
タイトル: rRNA methylation by Spb1 regulates the GTPase activity of Nog2 during 60S ribosomal subunit assembly.
著者: Kamil Sekulski / Victor Emmanuel Cruz / Christine S Weirich / Jan P Erzberger /
要旨: Biogenesis of the large ribosomal (60S) subunit involves the assembly of three rRNAs and 46 proteins, a process requiring approximately 70 ribosome biogenesis factors (RBFs) that bind and release the ...Biogenesis of the large ribosomal (60S) subunit involves the assembly of three rRNAs and 46 proteins, a process requiring approximately 70 ribosome biogenesis factors (RBFs) that bind and release the pre-60S at specific steps along the assembly pathway. The methyltransferase Spb1 and the K-loop GTPase Nog2 are essential RBFs that engage the rRNA A-loop during sequential steps in 60S maturation. Spb1 methylates the A-loop nucleotide G2922 and a catalytically deficient mutant strain (spb1) has a severe 60S biogenesis defect. However, the assembly function of this modification is currently unknown. Here, we present cryo-EM reconstructions that reveal that unmethylated G2922 leads to the premature activation of Nog2 GTPase activity and capture a Nog2-GDP-AlF transition state structure that implicates the direct involvement of unmodified G2922 in Nog2 GTPase activation. Genetic suppressors and in vivo imaging indicate that premature GTP hydrolysis prevents the efficient binding of Nog2 to early nucleoplasmic 60S intermediates. We propose that G2922 methylation levels regulate Nog2 recruitment to the pre-60S near the nucleolar/nucleoplasmic phase boundary, forming a kinetic checkpoint to regulate 60S production. Our approach and findings provide a template to study the GTPase cycles and regulatory factor interactions of the other K-loop GTPases involved in ribosome assembly.
履歴
登録2022年4月28日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02023年3月15日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年6月12日Group: Data collection / Refinement description
カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond / em_3d_fitting_list
Item: _em_3d_fitting_list.accession_code / _em_3d_fitting_list.initial_refinement_model_id ..._em_3d_fitting_list.accession_code / _em_3d_fitting_list.initial_refinement_model_id / _em_3d_fitting_list.source_name / _em_3d_fitting_list.type

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
m: Nucleolar GTP-binding protein 2
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)56,0924
ポリマ－55,5861
非ポリマー5073
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質 Nucleolar GTP-binding protein 2


分子量: 55585.590 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
参照: UniProt: P53742
#2: 化合物 ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg
#3: 化合物 ChemComp-K / POTASSIUM ION / カリウムカチオン


分子量: 39.098 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 式: K / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#4: 化合物 ChemComp-GDP / GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE / GDP


タイプ: RNA linking / 分子量: 443.201 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 式: C10H15N5O11P2 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION / コメント: GDP, エネルギー貯蔵分子*YM
研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Map of the nucleolar post-rotation pre-60S intermediate purified with tags on Tif6 and Nog2 from a SPB1 D52A strain.
タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1 / 由来: NATURAL
分子量値: 3.1 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母)
緩衝液pH: 8
緩衝液成分
ID濃度名称式Buffer-ID
150 mMBis-Tris-PropaneCH2[CH2NHC(CH2OH)3]21
2125 mMSodium ChlorideNaCl1
325 mMPotassium ChlorideKCl1
410 mMMagnesium ChlorideMgCl21
51 mMTCEPC9H15O6PHCl1
60.01 % (w/v)NP-401
試料濃度: 0.8 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 倍率（公称値）: 81000 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 2200 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 900 nm / Calibrated defocus min: 900 nm / 最大 デフォーカス（補正後）: 2200 nm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影平均露光時間: 0.05 sec. / 電子線照射量: 1.4 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 5434

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解析

ソフトウェア
名称バージョン分類NB
phenix.real_space_refine1.19.2_4158精密化
PHENIX1.19.2_4158精密化
EMソフトウェア
ID名称カテゴリ
4GctfCTF補正
9RELION初期オイラー角割当
CTF補正タイプ: NONE
粒子像の選択選択した粒子像数: 925065
3次元再構成解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 50091 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: RIGID BODY FIT
原子モデル構築PDB-ID: 6YLH

6ylh


PDB chain-ID: m / Accession code: 6YLH / Pdb chain residue range: 3-469 / Source name: PDB / タイプ: experimental model
精密化交差検証法: NONE
立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2
原子変位パラメータBiso mean: 21.66 Å2
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00253745
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.50385049
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0404550
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0036641
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d14.42141448

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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