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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7ttr | |||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Skd3_ATPyS_FITC-casein Hexamer, AAA+ only | |||||||||||||||||||||||||||
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![]() | CHAPERONE / cryoEM / AAA+ | |||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() granulocyte differentiation / RIG-I signaling pathway / ATP-dependent protein disaggregase activity / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; リン含有酸無水物に作用 / antiviral innate immune response / mitochondrial intermembrane space / cellular response to heat / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / extracellular region ...granulocyte differentiation / RIG-I signaling pathway / ATP-dependent protein disaggregase activity / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; リン含有酸無水物に作用 / antiviral innate immune response / mitochondrial intermembrane space / cellular response to heat / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / extracellular region / ATP binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | |||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.96 Å | |||||||||||||||||||||||||||
![]() | Rizo, A.N. | |||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Unique structural features govern the activity of a human mitochondrial AAA+ disaggregase, Skd3. 著者: Ryan R Cupo / Alexandrea N Rizo / Gabriel A Braun / Eric Tse / Edward Chuang / Kushol Gupta / Daniel R Southworth / James Shorter / ![]() 要旨: The AAA+ protein, Skd3 (human CLPB), solubilizes proteins in the mitochondrial intermembrane space, which is critical for human health. Skd3 variants with defective protein-disaggregase activity ...The AAA+ protein, Skd3 (human CLPB), solubilizes proteins in the mitochondrial intermembrane space, which is critical for human health. Skd3 variants with defective protein-disaggregase activity cause severe congenital neutropenia (SCN) and 3-methylglutaconic aciduria type 7 (MGCA7). How Skd3 disaggregates proteins remains poorly understood. Here, we report a high-resolution structure of a Skd3-substrate complex. Skd3 adopts a spiral hexameric arrangement that engages substrate via pore-loop interactions in the nucleotide-binding domain (NBD). Substrate-bound Skd3 hexamers stack head-to-head via unique, adaptable ankyrin-repeat domain (ANK)-mediated interactions to form dodecamers. Deleting the ANK linker region reduces dodecamerization and disaggregase activity. We elucidate apomorphic features of the Skd3 NBD and C-terminal domain that regulate disaggregase activity. We also define how Skd3 subunits collaborate to disaggregate proteins. Importantly, SCN-linked subunits sharply inhibit disaggregase activity, whereas MGCA7-linked subunits do not. These advances illuminate Skd3 structure and mechanism, explain SCN and MGCA7 inheritance patterns, and suggest therapeutic strategies. | |||||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 370.7 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 291.4 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 26121MC ![]() 7ttsC C: 同じ文献を引用 ( M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 66115.047 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() 参照: UniProt: Q9H078, 加水分解酵素; 酸無水物に作用; リン含有酸無水物に作用 #2: タンパク質 | | 分子量: 24759.648 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() ![]() #3: 化合物 | ChemComp-ADP / | #4: 化合物 | ChemComp-MG / #5: 化合物 | ChemComp-AGS / 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | Has protein modification | N | 配列の詳細 | The residues that were modeled in the casein were modeled as UNK due to the fact that they could ...The residues that were modeled in the casein were modeled as UNK due to the fact that they could not be identified. The actual sequence of the casein is MKVLILACLV | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Skd3 complex bound to FITC-casein / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: MULTIPLE SOURCES | ||||||||||||
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分子量 |
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緩衝液 | pH: 8 | ||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % |
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電子顕微鏡撮影
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN |
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電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm |
撮影 | 電子線照射量: 68 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
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解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.19.1_4122: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア | 名称: PHENIX / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.96 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 358000 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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