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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7tdd | ||||||
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タイトル | AtTPC1 D454N-EDTA state II | ||||||
要素 | Two pore calcium channel protein 1 | ||||||
キーワード | TRANSPORT PROTEIN / ion channel / voltage activation / VGIC | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 regulation of jasmonic acid biosynthetic process / seed germination / regulation of stomatal movement / plant-type vacuole / vacuole / vacuolar membrane / monoatomic ion channel complex / voltage-gated calcium channel activity / calcium-mediated signaling / calcium ion transport ...regulation of jasmonic acid biosynthetic process / seed germination / regulation of stomatal movement / plant-type vacuole / vacuole / vacuolar membrane / monoatomic ion channel complex / voltage-gated calcium channel activity / calcium-mediated signaling / calcium ion transport / calcium ion binding / Golgi apparatus / identical protein binding / plasma membrane / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | ||||||
データ登録者 | Dickinson, M.S. / Stroud, R.M. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2022 タイトル: Molecular basis of multistep voltage activation in plant two-pore channel 1. 著者: Miles Sasha Dickinson / Jinping Lu / Meghna Gupta / Irene Marten / Rainer Hedrich / Robert M Stroud / 要旨: Voltage-gated ion channels confer excitability to biological membranes, initiating and propagating electrical signals across large distances on short timescales. Membrane excitation requires channels ...Voltage-gated ion channels confer excitability to biological membranes, initiating and propagating electrical signals across large distances on short timescales. Membrane excitation requires channels that respond to changes in electric field and couple the transmembrane voltage to gating of a central pore. To address the mechanism of this process in a voltage-gated ion channel, we determined structures of the plant two-pore channel 1 at different stages along its activation coordinate. These high-resolution structures of activation intermediates, when compared with the resting-state structure, portray a mechanism in which the voltage-sensing domain undergoes dilation and in-membrane plane rotation about the gating charge-bearing helix, followed by charge translocation across the charge transfer seal. These structures, in concert with patch-clamp electrophysiology, show that residues in the pore mouth sense inhibitory Ca and are allosterically coupled to the voltage sensor. These conformational changes provide insight into the mechanism of voltage-sensor domain activation in which activation occurs vectorially over a series of elementary steps. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7tdd.cif.gz | 416.1 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7tdd.ent.gz | 343.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7tdd.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7tdd_validation.pdf.gz | 991.5 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7tdd_full_validation.pdf.gz | 1014.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | 7tdd_validation.xml.gz | 47.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7tdd_validation.cif.gz | 68.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/td/7tdd ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/td/7tdd | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 78589.844 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ) 遺伝子: TPC1, CCH1, FOU2, At4g03560, F9H3.19, T5L23.5 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q94KI8 Has protein modification | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: AtTPC1 D454N-EDTA state II / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 0.168 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ) |
由来(組換発現) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 50 mM Tris, 200 mM NaCl and 0.06% glycodiosgenin, 1 mM EDTA |
試料 | 濃度: 5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 105000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 1500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 66 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.19.2_4158: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア | 名称: SerialEM / バージョン: 3.8 / カテゴリ: 画像取得 / 詳細: stable | ||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 68456 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 57.28 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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