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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7sn8 | ||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of Drosophila Integrator cleavage module (IntS4-IntS9-IntS11) in complex with IP6 | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | NUCLEASE / integrator / inositol hexakisphosphate | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA polymerase II transcribes snRNA genes / snRNA 3'-end processing / snRNA processing / integrator complex / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 3'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ / negative regulation of BMP signaling pathway / RNA endonuclease activity / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.74 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Lin, M. / Tong, L. | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Inositol hexakisphosphate is required for Integrator function. 著者: Min-Han Lin / Madeline K Jensen / Nathan D Elrod / Kai-Lieh Huang / Kevin A Welle / Eric J Wagner / Liang Tong / 要旨: Integrator is a multi-subunit protein complex associated with RNA polymerase II (Pol II), with critical roles in noncoding RNA 3'-end processing and transcription attenuation of a broad collection of ...Integrator is a multi-subunit protein complex associated with RNA polymerase II (Pol II), with critical roles in noncoding RNA 3'-end processing and transcription attenuation of a broad collection of mRNAs. IntS11 is the endonuclease for RNA cleavage, as a part of the IntS4-IntS9-IntS11 Integrator cleavage module (ICM). Here we report a cryo-EM structure of the Drosophila ICM, at 2.74 Å resolution, revealing stable association of an inositol hexakisphosphate (IP) molecule. The IP binding site is located in a highly electropositive pocket at an interface among all three subunits of ICM, 55 Å away from the IntS11 active site and generally conserved in other ICMs. We also confirmed IP association with the same site in human ICM. IP binding is not detected in ICM samples harboring mutations in this binding site. Such mutations or disruption of IP biosynthesis significantly reduced Integrator function in snRNA 3'-end processing and mRNA transcription attenuation. Our structural and functional studies reveal that IP is required for Integrator function in Drosophila, humans, and likely other organisms. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7sn8.cif.gz | 309.8 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7sn8.ent.gz | 236.5 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7sn8.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7sn8_validation.pdf.gz | 982.5 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7sn8_full_validation.pdf.gz | 994.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | 7sn8_validation.xml.gz | 45.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7sn8_validation.cif.gz | 69.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/sn/7sn8 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/sn/7sn8 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 25214MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 114728.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) 遺伝子: IntS4, l(1)G0095, CG12113 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9W3E1 | ||||
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#2: タンパク質 | 分子量: 67683.922 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) 遺伝子: IntS11, CG1972 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) 参照: UniProt: Q9VAH9, 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 3'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ | ||||
#3: タンパク質 | 分子量: 73351.531 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) 遺伝子: IntS9, CG5222 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q95TS5 | ||||
#4: 化合物 | #5: 化合物 | ChemComp-IHP / | 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Integrator cleavage module with inositol hexakisphosphate タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) |
由来(組換発現) | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 51.35 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 実像数: 4395 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.18.2_3874: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.74 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 620438 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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