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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7s0s | ||||||
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タイトル | M. tuberculosis ribosomal RNA methyltransferase TlyA bound to M. smegmatis 50S ribosomal subunit | ||||||
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![]() | RIBOSOME / Methyltransferase / rRNA modification / 50S / TRANSFERASE | ||||||
機能・相同性 | ![]() 23S rRNA (cytidine1920-2'-O)-methyltransferase / 16S rRNA (cytidine1409-2'-O)-methyltransferase / methyltransferase activity / methylation / cytosolic large ribosomal subunit / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation ...23S rRNA (cytidine1920-2'-O)-methyltransferase / 16S rRNA (cytidine1409-2'-O)-methyltransferase / methyltransferase activity / methylation / cytosolic large ribosomal subunit / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / ribonucleoprotein complex / mRNA binding / RNA binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.05 Å | ||||||
![]() | Laughlin, Z.T. / Dunham, C.M. / Conn, G.L. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: 50S subunit recognition and modification by the ribosomal RNA methyltransferase TlyA. 著者: Zane T Laughlin / Suparno Nandi / Debayan Dey / Natalia Zelinskaya / Marta A Witek / Pooja Srinivas / Ha An Nguyen / Emily G Kuiper / Lindsay R Comstock / Christine M Dunham / Graeme L Conn / ![]() 要旨: Changes in bacterial ribosomal RNA (rRNA) methylation status can alter the activity of diverse groups of ribosome-targeting antibiotics. These modifications are typically incorporated by a single ...Changes in bacterial ribosomal RNA (rRNA) methylation status can alter the activity of diverse groups of ribosome-targeting antibiotics. These modifications are typically incorporated by a single methyltransferase that acts on one nucleotide target and rRNA methylation directly prevents drug binding, thereby conferring drug resistance. Loss of intrinsic methylation can also result in antibiotic resistance. For example, Mycobacterium tuberculosis becomes sensitized to tuberactinomycin antibiotics, such as capreomycin and viomycin, due to the action of the intrinsic methyltransferase TlyA. TlyA is unique among antibiotic resistance-associated methyltransferases as it has dual 16S and 23S rRNA substrate specificity and can incorporate cytidine-2′-O-methylations within two structurally distinct contexts. Here, we report the structure of a mycobacterial 50S subunit-TlyA complex trapped in a postcatalytic state with a S-adenosyl-L-methionine analog using single-particle cryogenic electron microscopy. Together with complementary functional analyses, this structure reveals critical roles in 23S rRNA substrate recognition for conserved residues across an interaction surface that spans both TlyA domains. These interactions position the TlyA active site over the target nucleotide C2144, which is flipped from 23S Helix 69 in a process stabilized by stacking of TlyA residue Phe157 on the adjacent A2143. Base flipping may thus be a common strategy among rRNA methyltransferase enzymes, even in cases where the target site is accessible without such structural reorganization. Finally, functional studies with 30S subunit suggest that the same TlyA interaction surface is employed to recognize this second substrate, but with distinct dependencies on essential conserved residues. #1: ![]() タイトル: 50S subunit recognition and modification by the Mycobacterium tuberculosis ribosomal RNA methyltransferase TlyA 著者: Laughlin, Z.T. / Nandi, S. / Dey, D. / Zelinskaya, N. / Witek, M.A. / Srinivas, P. / Nguyen, H.A. / Kuiper, E.G. / Comstock, L.R. / Dunham, C.M. / Conn, G.L. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 2.2 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 24792MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-RNA鎖 , 2種, 2分子 Ci
#3: RNA鎖 | 分子量: 1012532.438 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: GenBank: CP009494.1 |
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#35: RNA鎖 | 分子量: 38061.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 株: LR222 C101A / 参照: GenBank: 967054 |
+50S ribosomal protein ... , 31種, 31分子 DEFGHIJKLMNOPQRSTUVWXYZabcdefgh
-タンパク質・ペプチド / タンパク質 , 2種, 2分子 3B
#1: タンパク質・ペプチド | 分子量: 2710.179 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 株: LR222 C101A / 参照: UniProt: A0QTP4 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 29898.172 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: No density was seen for the His-tag and first three residues (MAR) of TlyA so they were not modeled. 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: tlyA, C0094_09260, DSI38_13410, E5M05_15210, E5M52_14020, E5M78_14045, ERS007663_03298, ERS007720_00106, ERS007741_00698, ERS013471_00042, ERS023446_01647, ERS024276_00313, ERS027646_ ...遺伝子: tlyA, C0094_09260, DSI38_13410, E5M05_15210, E5M52_14020, E5M78_14045, ERS007663_03298, ERS007720_00106, ERS007741_00698, ERS013471_00042, ERS023446_01647, ERS024276_00313, ERS027646_00010, ERS027659_02052, ERS027661_00747, ERS094182_03076, F6W99_00251, GCL30_17265, SAMEA2683035_01391 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: A0A045KH60, 23S rRNA (cytidine1920-2'-O)-methyltransferase |
-非ポリマー , 2種, 406分子 


#36: 化合物 | ChemComp-MG / #37: 化合物 | ChemComp-ZN / |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 |
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分子量 |
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由来(天然) |
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由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7 / 詳細: Both components dialyzed into this buffer | ||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: 0.5 micromolar 50S, 5 micromolar TlyA, 10 micromolar NM6 | ||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: GATAN CRYOPLUNGE 3 / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 90 % / 凍結前の試料温度: 298 K / 詳細: 3.0 or 3.3 second blot time allowed for sample |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 81000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2200 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 2.7 mm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN |
撮影 | 平均露光時間: 2 sec. / 電子線照射量: 50.79 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 3364 |
画像スキャン | 横: 5760 / 縦: 4092 |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1016454 | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.05 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 129011 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 3D fitting-ID: 1 / Source name: PDB / タイプ: experimental model
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