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- PDB-7qen: S.c. Condensin core in DNA- and ATP-bound state -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7qen
タイトルS.c. Condensin core in DNA- and ATP-bound state
要素
  • (Condensin complex subunit ...) x 2
  • (DNA (35-MER)) x 2
  • (Structural maintenance of chromosomes protein ...) x 2
キーワードDNA BINDING PROTEIN / SMC-motor protein
機能・相同性
機能・相同性情報


negative regulation of meiotic DNA double-strand break formation / Condensation of Prometaphase Chromosomes / meiotic chromosome condensation / tRNA gene clustering / meiotic chromosome separation / condensin complex / DNA secondary structure binding / maintenance of rDNA / rDNA chromatin condensation / synaptonemal complex assembly ...negative regulation of meiotic DNA double-strand break formation / Condensation of Prometaphase Chromosomes / meiotic chromosome condensation / tRNA gene clustering / meiotic chromosome separation / condensin complex / DNA secondary structure binding / maintenance of rDNA / rDNA chromatin condensation / synaptonemal complex assembly / nucleophagy / condensed chromosome, centromeric region / mitotic chromosome condensation / chromosome condensation / silent mating-type cassette heterochromatin formation / minor groove of adenine-thymine-rich DNA binding / mitotic sister chromatid segregation / condensed chromosome / histone binding / double-stranded DNA binding / cell division / chromatin binding / chromatin / nucleolus / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / ATP binding / nucleus / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Condensin subunit 1 / Condensin complex subunit 1, N-terminal / Condensin subunit 1/Condensin-2 complex subunit D3 / Condensin complex subunit 1, C-terminal / non-SMC mitotic condensation complex subunit 1, N-term / non-SMC mitotic condensation complex subunit 1 / Smc2, ATP-binding cassette domain / Condensin complex subunit 2/barren / Condensin complex subunit 2 / Structural maintenance of chromosomes protein ...Condensin subunit 1 / Condensin complex subunit 1, N-terminal / Condensin subunit 1/Condensin-2 complex subunit D3 / Condensin complex subunit 1, C-terminal / non-SMC mitotic condensation complex subunit 1, N-term / non-SMC mitotic condensation complex subunit 1 / Smc2, ATP-binding cassette domain / Condensin complex subunit 2/barren / Condensin complex subunit 2 / Structural maintenance of chromosomes protein / SMCs flexible hinge / SMCs flexible hinge superfamily / SMC proteins Flexible Hinge Domain / SMC proteins Flexible Hinge Domain / RecF/RecN/SMC, N-terminal / RecF/RecN/SMC N terminal domain / Armadillo-like helical / Armadillo-type fold / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / DNA / DNA (> 10) / Condensin complex subunit 2 / Structural maintenance of chromosomes protein 2 / Condensin complex subunit 1 / Structural maintenance of chromosomes protein 4
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae CEN.PK113-7D (パン酵母)
Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
synthetic construct (人工物)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.46 Å
データ登録者Lecomte, L. / Hassler, M. / Haering, C. / Eustermann, S.
資金援助European Union, 1件
組織認可番号国
European Research Council (ERC)681365European Union
引用ジャーナル: Science / 年: 2022
タイトル: A hold-and-feed mechanism drives directional DNA loop extrusion by condensin.
著者: Indra A Shaltiel / Sumanjit Datta / Léa Lecomte / Markus Hassler / Marc Kschonsak / Sol Bravo / Catherine Stober / Jenny Ormanns / Sebastian Eustermann / Christian H Haering /
要旨: Structural maintenance of chromosomes (SMC) protein complexes structure genomes by extruding DNA loops, but the molecular mechanism that underlies their activity has remained unknown. We show that ...Structural maintenance of chromosomes (SMC) protein complexes structure genomes by extruding DNA loops, but the molecular mechanism that underlies their activity has remained unknown. We show that the active condensin complex entraps the bases of a DNA loop transiently in two separate chambers. Single-molecule imaging and cryo-electron microscopy suggest a putative power-stroke movement at the first chamber that feeds DNA into the SMC-kleisin ring upon adenosine triphosphate binding, whereas the second chamber holds on upstream of the same DNA double helix. Unlocking the strict separation of "motor" and "anchor" chambers turns condensin from a one-sided into a bidirectional DNA loop extruder. We conclude that the orientation of two topologically bound DNA segments during the SMC reaction cycle determines the directionality of DNA loop extrusion.
履歴
登録2021年12月3日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02022年6月15日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年7月17日Group: Data collection / Refinement description
カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond ...chem_comp_atom / chem_comp_bond / em_3d_fitting_list / em_admin / pdbx_initial_refinement_model
Item: _em_3d_fitting_list.accession_code / _em_3d_fitting_list.initial_refinement_model_id ..._em_3d_fitting_list.accession_code / _em_3d_fitting_list.initial_refinement_model_id / _em_3d_fitting_list.source_name / _em_3d_fitting_list.type / _em_admin.last_update

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
F: DNA (35-MER)
G: DNA (35-MER)
B: Structural maintenance of chromosomes protein 4
A: Structural maintenance of chromosomes protein 2
C: Condensin complex subunit 2
D: Condensin complex subunit 1
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)559,52210
ポリマ－558,4596
非ポリマー1,0634
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: gel filtration
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

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DNA鎖 , 2種, 2分子 FG

#1: DNA鎖 DNA (35-MER)


分子量: 15615.376 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成
詳細: 50-mer DNA ligand (sequence below) was modelled as poly-dA due to missing sequence register 5'-GTTGACAGTG TCGCAACCTG CACAGGCAAG CTGCTGAGTC TGGTGTAGAC-3'
由来: (合成) synthetic construct (人工物)
#2: DNA鎖 DNA (35-MER)


分子量: 15164.683 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成
詳細: 50-mer DNA ligand (sequence below) was modelled as poly-dT due to missing sequence register. 5'-GTCTACACCAGACTCAGCAGCTTGCCTGTGCAGGTTGCGACACTGTCAAC-3'
由来: (合成) synthetic construct (人工物)

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Structural maintenance of chromosomes protein ... , 2種, 2分子 BA

#3: タンパク質 Structural maintenance of chromosomes protein 4


分子量: 167716.125 Da / 分子数: 1 / Mutation: E1352Q / 由来タイプ: 組換発現
詳細: ATPase deficient Walker B motif mutant central coiled-coil region results in faulty sequence alignment as it was not build in the structure To circumvent this technical problem, we had to ...詳細: ATPase deficient Walker B motif mutant central coiled-coil region results in faulty sequence alignment as it was not build in the structure To circumvent this technical problem, we had to delete the sequence corresponding to the coiled coil regions. This error needs to be corrected in communication with the pdb curator.,ATPase deficient Walker B motif mutant central coiled-coil region results in faulty sequence alignment as it was not build in the structure To circumvent this technical problem, we had to delete the sequence corresponding to the coiled coil regions. This error needs to be corrected in communication with the pdb curator.,ATPase deficient Walker B motif mutant central coiled-coil region results in faulty sequence alignment as it was not build in the structure To circumvent this technical problem, we had to delete the sequence corresponding to the coiled coil regions. This error needs to be corrected in communication with the pdb curator.
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae CEN.PK113-7D (パン酵母), (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: SMC4, YLR086W, L9449.5 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae W303 (パン酵母) / 参照: UniProt: Q12267
#4: タンパク質 Structural maintenance of chromosomes protein 2 / DA-box protein SMC2


分子量: 134124.891 Da / 分子数: 1 / Mutation: E1114Q / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: ATPase deficient Walker B motif mutant
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: SMC2, YFR031C / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P38989

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Condensin complex subunit ... , 2種, 2分子 CD

#5: タンパク質 Condensin complex subunit 2 / Barren homolog / CAPH homolog


分子量: 92721.219 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: BRN1, YBL097W, YBL0830 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P38170
#6: タンパク質 Condensin complex subunit 1 / XCAP-D2 homolog


分子量: 133116.766 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: YCS4, LOC7, YLR272C, L8479.14 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q06156

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非ポリマー , 2種, 4分子

#7: 化合物 ChemComp-ATP / ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / ATP


分子量: 507.181 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: C10H16N5O13P3 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION / コメント: ATP, エネルギー貯蔵分子*YM
#8: 化合物 ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: ATP- and DNA- bound Sc Condensin core complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#6 / 由来: RECOMBINANT
分子量値: 645 kDa/nm / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
由来(組換発現)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
緩衝液pH: 7.5
緩衝液成分
ID濃度名称式Buffer-ID
150 mMSodium ChlorideNaCl1
220 mMHepesHepes1
31 mMDithiothreitolDTT1
45 mMMagnesium ChlorideMgCl21
試料濃度: 0.645 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 2 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 281 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 倍率（公称値）: 130000 X / 倍率（補正後）: 130000 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 2000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1000 nm / Calibrated defocus min: 1000 nm / 最大 デフォーカス（補正後）: 2000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm / アライメント法: COMA FREE
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影平均露光時間: 8 sec. / 電子線照射量: 1 e/Å2 / 検出モード: COUNTING
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 6544
電子光学装置エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV
画像スキャンサンプリングサイズ: 5 µm / 横: 3838 / 縦: 3710 / 動画フレーム数/画像: 40 / 利用したフレーム数/画像: 1-40

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.14_3260: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
2SerialEM画像取得
4CTFFIND4.1CTF補正
7UCSF ChimeraXモデルフィッティング
8Cootモデルフィッティング
10PHENIXモデル精密化
11RELION3.1.3初期オイラー角割当
12RELION3.1.3最終オイラー角割当
13RELION3.1.3分類
14RELION3.1.3３次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 91522
3次元再構成解像度: 3.46 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 66205 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL
原子モデル構築PDB-ID: 6YVU

6yvu


Accession code: 6YVU / Source name: PDB / タイプ: experimental model

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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