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- 基本情報
基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 6r7f | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | Structural basis of Cullin-2 RING E3 ligase regulation by the COP9 signalosome | ||||||
|  要素 | 
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|  キーワード | LIGASE / Cullin-Ring E3 Ligase COP9 signalosome neddylation | ||||||
| 機能・相同性 |  機能・相同性情報 COP9 signalosome assembly / trophectodermal cell proliferation / macrophage migration inhibitory factor binding / regulation of IRE1-mediated unfolded protein response / exosomal secretion / GTPase inhibitor activity / deNEDDylase activity / protein deneddylation / eukaryotic translation initiation factor 3 complex / regulation of protein neddylation ...COP9 signalosome assembly / trophectodermal cell proliferation / macrophage migration inhibitory factor binding / regulation of IRE1-mediated unfolded protein response / exosomal secretion / GTPase inhibitor activity / deNEDDylase activity / protein deneddylation / eukaryotic translation initiation factor 3 complex / regulation of protein neddylation / activation of NF-kappaB-inducing kinase activity / regulation of cellular response to hypoxia / cullin-RING-type E3 NEDD8 transferase / NEDD8 transferase activity / COP9 signalosome / cullin-RING ubiquitin ligase complex / RHOBTB3 ATPase cycle / negative regulation of receptor signaling pathway via JAK-STAT / cellular response to chemical stress / Cul7-RING ubiquitin ligase complex / ubiquitin-dependent protein catabolic process via the C-end degron rule pathway / Loss of Function of FBXW7 in Cancer and NOTCH1 Signaling / transcription elongation factor activity / target-directed miRNA degradation / elongin complex / positive regulation of protein autoubiquitination / RNA polymerase II transcription initiation surveillance / protein neddylation / Replication of the SARS-CoV-1 genome / metal-dependent deubiquitinase activity / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素 / regulation of JNK cascade / NEDD8 ligase activity / VCB complex / RHOBTB1 GTPase cycle / negative regulation of response to oxidative stress / Cul5-RING ubiquitin ligase complex / regulation of DNA damage response, signal transduction by p53 class mediator / inner cell mass cell proliferation / SCF ubiquitin ligase complex / Cul2-RING ubiquitin ligase complex / negative regulation of type I interferon production / ubiquitin-ubiquitin ligase activity / intracellular membraneless organelle / SCF-dependent proteasomal ubiquitin-dependent protein catabolic process / Cul4A-RING E3 ubiquitin ligase complex / Cul4-RING E3 ubiquitin ligase complex / Cul3-RING ubiquitin ligase complex / Cul4B-RING E3 ubiquitin ligase complex / ubiquitin ligase complex scaffold activity / SUMOylation of ubiquitinylation proteins / negative regulation of mitophagy / Prolactin receptor signaling / TGF-beta receptor signaling activates SMADs / response to light stimulus / cullin family protein binding / regulation of proteolysis / skeletal muscle cell differentiation / Pausing and recovery of Tat-mediated HIV elongation / Tat-mediated HIV elongation arrest and recovery / negative regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / regulation of postsynapse assembly / HIV elongation arrest and recovery / Pausing and recovery of HIV elongation / anatomical structure morphogenesis / protein monoubiquitination / negative regulation of signal transduction / Tat-mediated elongation of the HIV-1 transcript / Formation of HIV-1 elongation complex containing HIV-1 Tat / positive regulation of DNA-binding transcription factor activity / ubiquitin-like ligase-substrate adaptor activity / protein K48-linked ubiquitination / Formation of HIV elongation complex in the absence of HIV Tat / Nuclear events stimulated by ALK signaling in cancer / RNA Polymerase II Transcription Elongation / Formation of RNA Pol II elongation complex  / JNK cascade / negative regulation of TORC1 signaling / transcription-coupled nucleotide-excision repair / translation initiation factor activity / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / positive regulation of TORC1 signaling / regulation of cellular response to insulin stimulus / intrinsic apoptotic signaling pathway / negative regulation of insulin receptor signaling pathway / post-translational protein modification / negative regulation of autophagy / protein serine/threonine kinase binding / Regulation of BACH1 activity / T cell activation / transcription corepressor binding / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / positive regulation of cell differentiation / cellular response to amino acid stimulus / Degradation of DVL / transcription elongation by RNA polymerase II / Degradation of GLI1 by the proteasome / Iron uptake and transport / GSK3B and BTRC:CUL1-mediated-degradation of NFE2L2 類似検索 - 分子機能 | ||||||
| 生物種 |  Homo sapiens (ヒト) | ||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.2 Å | ||||||
|  データ登録者 | Faull, S.V. / Lau, A.M.C. / Martens, C. / Ahdash, Z. / Yebenes, H. / Schmidt, C. / Beuron, F. / Cronin, N.B. / Morris, E.P. / Politis, A. | ||||||
| 資金援助 |  英国, 1件 
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|  引用 |  ジャーナル: Nat Commun / 年: 2019 タイトル: Structural basis of Cullin 2 RING E3 ligase regulation by the COP9 signalosome. 著者: Sarah V Faull / Andy M C Lau / Chloe Martens / Zainab Ahdash / Kjetil Hansen / Hugo Yebenes / Carla Schmidt / Fabienne Beuron / Nora B Cronin / Edward P Morris / Argyris Politis /      要旨: Cullin-Ring E3 Ligases (CRLs) regulate a multitude of cellular pathways through specific substrate receptors. The COP9 signalosome (CSN) deactivates CRLs by removing NEDD8 from activated Cullins. ...Cullin-Ring E3 Ligases (CRLs) regulate a multitude of cellular pathways through specific substrate receptors. The COP9 signalosome (CSN) deactivates CRLs by removing NEDD8 from activated Cullins. Here we present structures of the neddylated and deneddylated CSN-CRL2 complexes by combining single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM) with chemical cross-linking mass spectrometry (XL-MS). These structures suggest a conserved mechanism of CSN activation, consisting of conformational clamping of the CRL2 substrate by CSN2/CSN4, release of the catalytic CSN5/CSN6 heterodimer and finally activation of the CSN5 deneddylation machinery. Using hydrogen-deuterium exchange (HDX)-MS we show that CRL2 activates CSN5/CSN6 in a neddylation-independent manner. The presence of NEDD8 is required to activate the CSN5 active site. Overall, by synergising cryo-EM with MS, we identify sensory regions of the CSN that mediate its stepwise activation and provide a framework for understanding the regulatory mechanism of other Cullin family members. | ||||||
| 履歴 | 
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| 構造ビューア | 分子:  Molmil  Jmol/JSmol | 
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| PDBx/mmCIF形式 |  6r7f.cif.gz | 720.3 KB | 表示 |  PDBx/mmCIF形式 | 
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 |  pdb6r7f.ent.gz | 558.5 KB | 表示 |  PDB形式 | 
| PDBx/mmJSON形式 |  6r7f.json.gz | ツリー表示 |  PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 |  その他のダウンロード | 
-検証レポート
| 文書・要旨 |  6r7f_validation.pdf.gz | 878.5 KB | 表示 |  wwPDB検証レポート | 
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 |  6r7f_full_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | |
| XML形式データ |  6r7f_validation.xml.gz | 105.1 KB | 表示 | |
| CIF形式データ |  6r7f_validation.cif.gz | 167.9 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ |  https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/r7/6r7f  ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/r7/6r7f | HTTPS FTP | 
-関連構造データ
| 関連構造データ |  4739MC  4736C  4741C  4742C  4744C  6r6hC  6r7hC  6r7iC  6r7nC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( | 
|---|---|
| 類似構造データ | 
- リンク
リンク
- 集合体
集合体
| 登録構造単位 |  
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|---|---|
| 1 | 
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- 要素
要素
-COP9 signalosome complex subunit  ... , 8種, 8分子 ABCDEFHG       
| #1: タンパク質 | 分子量: 49253.535 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GPS1, COPS1, CSN1 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q13098 | 
|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 51664.570 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: COPS2, CSN2, TRIP15 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: P61201 | 
| #3: タンパク質 | 分子量: 45808.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: COPS3, CSN3 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q9UNS2 | 
| #4: タンパク質 | 分子量: 46322.688 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: COPS4, CSN4 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q9BT78 | 
| #5: タンパク質 | 分子量: 35184.059 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: COPS5, CSN5, JAB1 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q92905, 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素 | 
| #6: タンパク質 | 分子量: 32507.193 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: COPS6, CSN6, HVIP 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q7L5N1 | 
| #7: タンパク質 | 分子量: 23245.543 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: COPS8, CSN8 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q99627 | 
| #8: タンパク質 | 分子量: 23429.709 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: COPS7B, CSN7B 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q9H9Q2 | 
-タンパク質 , 6種, 6分子 VPQORN     
| #9: タンパク質 | 分子量: 18558.162 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: VHL 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: P40337 | 
|---|---|
| #10: タンパク質 | 分子量: 13147.781 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ELOB, TCEB2 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q15370 | 
| #11: タンパク質 | 分子量: 12485.135 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ELOC, TCEB1 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q15369 | 
| #12: タンパク質 | 分子量: 87098.930 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: CUL2 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q13617 | 
| #13: タンパク質 | 分子量: 10655.229 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: P62877*PLUS | 
| #14: タンパク質 | 分子量: 8573.978 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)   Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: NEDD8 発現宿主:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q15843 | 
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 | 
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 | 
- 試料調製
試料調製
| 構成要素 | 名称: Ternary complex of COP9 signalosome (CSN) and neddylated Cullin-Ring E3 ligase CRL (cullin-2 with Rbx1, Elongin-B, Elongin-C and VHL) タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT | 
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種:  Homo sapiens (ヒト) | 
| 由来(組換発現) | 生物種:   Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) | 
| 緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 15 mM HEPES pH 7.5 100 mM NaCL 0.5 mM DTT 1% Glycerol | 
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | 
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE | 
- 電子顕微鏡撮影
電子顕微鏡撮影
| 実験機器 |  モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company | 
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS | 
| 電子銃 | 電子線源:  FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM | 
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1800 nm / C2レンズ絞り径: 100 µm | 
| 試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER | 
| 撮影 | 電子線照射量: 45 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) | 
- 解析
解析
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | 
|---|---|
| 3次元再構成 | 解像度: 8.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 20055 / 対称性のタイプ: POINT | 
 ムービー
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 PDBj
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