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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6a5u | |||||||||||||||||||||
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タイトル | RNA polymerase II elongation complex stalled at SHL(-1) of the nucleosome, with foreign DNA, tilt conformation | |||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION/RNA/DNA / nucleosome / chromatin / RNA polymerase / TRANSCRIPTION / TRANSCRIPTION-RNA-DNA complex | |||||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 nuclear DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of septum digestion after cytokinesis / siRNA-mediated pericentric heterochromatin formation / negative regulation of chromosome condensation / Barr body / regulation of centromere complex assembly / muscle cell differentiation / pericentric heterochromatin formation / inner kinetochore / RPB4-RPB7 complex ...nuclear DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of septum digestion after cytokinesis / siRNA-mediated pericentric heterochromatin formation / negative regulation of chromosome condensation / Barr body / regulation of centromere complex assembly / muscle cell differentiation / pericentric heterochromatin formation / inner kinetochore / RPB4-RPB7 complex / oocyte maturation / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, deadenylation-dependent decay / termination of RNA polymerase II transcription / nucleus organization / termination of RNA polymerase III transcription / RNA polymerase III activity / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / termination of RNA polymerase I transcription / transcription initiation at RNA polymerase I promoter / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / RNA polymerase II activity / spermatid development / negative regulation of tumor necrosis factor-mediated signaling pathway / subtelomeric heterochromatin formation / single fertilization / transcription elongation by RNA polymerase I / tRNA transcription by RNA polymerase III / negative regulation of megakaryocyte differentiation / RNA polymerase II core promoter sequence-specific DNA binding / RNA polymerase I activity / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / positive regulation of translational initiation / protein localization to CENP-A containing chromatin / RNA polymerase II, core complex / pericentric heterochromatin / Replacement of protamines by nucleosomes in the male pronucleus / CENP-A containing nucleosome / Packaging Of Telomere Ends / Recognition and association of DNA glycosylase with site containing an affected purine / Cleavage of the damaged purine / Deposition of new CENPA-containing nucleosomes at the centromere / nucleosomal DNA binding / Recognition and association of DNA glycosylase with site containing an affected pyrimidine / Cleavage of the damaged pyrimidine / translation initiation factor binding / Inhibition of DNA recombination at telomere / telomere organization / embryo implantation / Meiotic synapsis / RNA Polymerase I Promoter Opening / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / SUMOylation of chromatin organization proteins / Regulation of endogenous retroelements by the Human Silencing Hub (HUSH) complex / DNA methylation / Condensation of Prophase Chromosomes / SIRT1 negatively regulates rRNA expression / Chromatin modifications during the maternal to zygotic transition (MZT) / ERCC6 (CSB) and EHMT2 (G9a) positively regulate rRNA expression / HCMV Late Events / innate immune response in mucosa / PRC2 methylates histones and DNA / Regulation of endogenous retroelements by KRAB-ZFP proteins / Defective pyroptosis / Regulation of endogenous retroelements by Piwi-interacting RNAs (piRNAs) / HDACs deacetylate histones / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / Nonhomologous End-Joining (NHEJ) / RNA Polymerase I Promoter Escape / lipopolysaccharide binding / Transcriptional regulation by small RNAs / transcription elongation by RNA polymerase II / Formation of the beta-catenin:TCF transactivating complex / P-body / RUNX1 regulates genes involved in megakaryocyte differentiation and platelet function / NoRC negatively regulates rRNA expression / Activated PKN1 stimulates transcription of AR (androgen receptor) regulated genes KLK2 and KLK3 / G2/M DNA damage checkpoint / HDMs demethylate histones / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / multicellular organism growth / DNA Damage/Telomere Stress Induced Senescence / heterochromatin formation / ribonucleoside binding / PKMTs methylate histone lysines / Metalloprotease DUBs / Meiotic recombination / Pre-NOTCH Transcription and Translation / RMTs methylate histone arginines / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / Activation of anterior HOX genes in hindbrain development during early embryogenesis / DNA-directed RNA polymerase / HCMV Early Events / Transcriptional regulation of granulopoiesis / osteoblast differentiation / male gonad development / structural constituent of chromatin / UCH proteinases / antimicrobial humoral immune response mediated by antimicrobial peptide / nucleosome 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) Komagataella phaffii (菌類) synthetic construct (人工物) | |||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.6 Å | |||||||||||||||||||||
データ登録者 | Kujirai, T. / Ehara, H. / Fujino, Y. / Shirouzu, M. / Sekine, S. / Kurumizaka, H. | |||||||||||||||||||||
資金援助 | 日本, 6件
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引用 | ジャーナル: Science / 年: 2018 タイトル: Structural basis of the nucleosome transition during RNA polymerase II passage. 著者: Tomoya Kujirai / Haruhiko Ehara / Yuka Fujino / Mikako Shirouzu / Shun-Ichi Sekine / Hitoshi Kurumizaka / 要旨: Genomic DNA forms chromatin, in which the nucleosome is the repeating unit. The mechanism by which RNA polymerase II (RNAPII) transcribes the nucleosomal DNA remains unclear. Here we report the cryo- ...Genomic DNA forms chromatin, in which the nucleosome is the repeating unit. The mechanism by which RNA polymerase II (RNAPII) transcribes the nucleosomal DNA remains unclear. Here we report the cryo-electron microscopy structures of RNAPII-nucleosome complexes in which RNAPII pauses at the superhelical locations SHL(-6), SHL(-5), SHL(-2), and SHL(-1) of the nucleosome. RNAPII pauses at the major histone-DNA contact sites, and the nucleosome interactions with the RNAPII subunits stabilize the pause. These structures reveal snapshots of nucleosomal transcription, in which RNAPII gradually tears DNA from the histone surface while preserving the histone octamer. The nucleosomes in the SHL(-1) complexes are bound to a "foreign" DNA segment, which might explain the histone transfer mechanism. These results provide the foundations for understanding chromatin transcription and epigenetic regulation. | |||||||||||||||||||||
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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PDB形式 | pdb6a5u.ent.gz | 801.9 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6a5u.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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文書・要旨 | 6a5u_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6a5u_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6a5u_validation.xml.gz | 119.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6a5u_validation.cif.gz | 192.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/a5/6a5u ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/a5/6a5u | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 6985MC 6980C 6981C 6982C 6983C 6984C 6986C 6a5lC 6a5oC 6a5pC 6a5rC 6a5tC 6inqC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA-directed RNA polymerase ... , 3種, 3分子 ABI
#1: タンパク質 | 分子量: 194107.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: C4R4Y0, DNA-directed RNA polymerase |
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#2: タンパク質 | 分子量: 139746.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: C4QZQ7, DNA-directed RNA polymerase |
#9: タンパク質 | 分子量: 13612.320 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: F2QPE6 |
-RNA polymerase II ... , 4種, 4分子 CDGK
#3: タンパク質 | 分子量: 34216.293 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: C4R7L2 |
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#4: タンパク質 | 分子量: 20622.980 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: C4R2U9 |
#7: タンパク質 | 分子量: 18802.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: C4R9A1 |
#11: タンパク質 | 分子量: 13832.896 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: C4R3Z5 |
-RNA polymerase subunit ... , 4種, 4分子 EFJL
#5: タンパク質 | 分子量: 24962.680 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: C4R3P8 |
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#6: タンパク質 | 分子量: 17803.588 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: C4R1V1 |
#10: タンパク質 | 分子量: 8554.064 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: C4R009 |
#12: タンパク質 | 分子量: 7862.048 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: F2QMI1 |
-タンパク質 , 5種, 9分子 Haebfcgdh
#8: タンパク質 | 分子量: 16249.220 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Komagataella phaffii (strain GS115 / ATCC 20864) (菌類) 株: GS115 / ATCC 20864 / 参照: UniProt: C4R273 | ||||||
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#16: タンパク質 | 分子量: 15643.262 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: H3F3A, H3.3A, H3F3, PP781, H3F3B, H3.3B / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P84243 #17: タンパク質 | 分子量: 11676.703 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) 遺伝子: HIST1H4A, H4/A, H4FA, HIST1H4B, H4/I, H4FI, HIST1H4C, H4/G, H4FG, HIST1H4D, H4/B, H4FB, HIST1H4E, H4/J, H4FJ, HIST1H4F, H4/C, H4FC, HIST1H4H, H4/H, H4FH, HIST1H4I, H4/M, H4FM, HIST1H4J, ...遺伝子: HIST1H4A, H4/A, H4FA, HIST1H4B, H4/I, H4FI, HIST1H4C, H4/G, H4FG, HIST1H4D, H4/B, H4FB, HIST1H4E, H4/J, H4FJ, HIST1H4F, H4/C, H4FC, HIST1H4H, H4/H, H4FH, HIST1H4I, H4/M, H4FM, HIST1H4J, H4/E, H4FE, HIST1H4K, H4/D, H4FD, HIST1H4L, H4/K, H4FK, HIST2H4A, H4/N, H4F2, H4FN, HIST2H4, HIST2H4B, H4/O, H4FO, HIST4H4 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P62805 #18: タンパク質 | 分子量: 14447.825 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: HIST1H2AB, H2AFM, HIST1H2AE, H2AFA / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P04908 #19: タンパク質 | 分子量: 14217.516 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: HIST1H2BJ, H2BFR / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P06899 |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 P
#13: RNA鎖 | 分子量: 3556.122 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 詳細: produced by in vitro transcription / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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-DNA鎖 , 4種, 4分子 TN01
#14: DNA鎖 | 分子量: 60869.977 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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#15: DNA鎖 | 分子量: 61381.906 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
#20: DNA鎖 | 分子量: 12329.000 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
#21: DNA鎖 | 分子量: 12295.837 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
-非ポリマー , 2種, 9分子
#22: 化合物 | ChemComp-ZN / #23: 化合物 | ChemComp-MG / | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: RNA polymerase II elongation complex stalled at SHL(-1) of the nucleosome, with foreign DNA, tilt conformation タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#21 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Komagataella phaffii (菌類) / 株: GS115 / ATCC 20864 |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 298 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI ARCTICA |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 7.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 19638 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL |