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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4bij | ||||||
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タイトル | Threading model of T7 large terminase | ||||||
要素 | DNA MATURASE B | ||||||
キーワード | HYDROLASE / ATPASE / DNA TRANSLOCATION / SINGLE-PARTICLE RECONSTRUCTION | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 viral terminase, large subunit / viral DNA genome packaging / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エンドデオキシリボヌクレアーゼ / chromosome organization / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / endonuclease activity / ATP hydrolysis activity / ATP binding / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ENTEROBACTERIA PHAGE T7 (ファージ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 16 Å | ||||||
データ登録者 | Dauden, M.I. / Martin-Benito, J. / Sanchez-Ferrero, J.C. / Pulido-Cid, M. / Valpuesta, J.M. / Carrascosa, J.L. | ||||||
引用 | ジャーナル: J Biol Chem / 年: 2013 タイトル: Large terminase conformational change induced by connector binding in bacteriophage T7. 著者: María I Daudén / Jaime Martín-Benito / Juan C Sánchez-Ferrero / Mar Pulido-Cid / José M Valpuesta / José L Carrascosa / 要旨: During bacteriophage morphogenesis DNA is translocated into a preformed prohead by the complex formed by the portal protein, or connector, plus the terminase, which are located at an especial prohead ...During bacteriophage morphogenesis DNA is translocated into a preformed prohead by the complex formed by the portal protein, or connector, plus the terminase, which are located at an especial prohead vertex. The terminase is a powerful motor that converts ATP hydrolysis into mechanical movement of the DNA. Here, we have determined the structure of the T7 large terminase by electron microscopy. The five terminase subunits assemble in a toroid that encloses a channel wide enough to accommodate dsDNA. The structure of the complete connector-terminase complex is also reported, revealing the coupling between the terminase and the connector forming a continuous channel. The structure of the terminase assembled into the complex showed a different conformation when compared with the isolated terminase pentamer. To understand in molecular terms the terminase morphological change, we generated the terminase atomic model based on the crystallographic structure of its phage T4 counterpart. The docking of the threaded model in both terminase conformations showed that the transition between the two states can be achieved by rigid body subunit rotation in the pentameric assembly. The existence of two terminase conformations and its possible relation to the sequential DNA translocation may shed light into the molecular bases of the packaging mechanism of bacteriophage T7. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 4bij.cif.gz | 405.6 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb4bij.ent.gz | 322.2 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 4bij.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 4bij_validation.pdf.gz | 808.7 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 4bij_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 4bij_validation.xml.gz | 112.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 4bij_validation.cif.gz | 152.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bi/4bij ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bi/4bij | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 53822.504 Da / 分子数: 5 断片: FRAGMENT WITH 110 AMINOACIDS DELETION, RESIDUES 1-476 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ENTEROBACTERIA PHAGE T7 (ファージ) 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21(DE3) / Variant (発現宿主): PLYS / 参照: UniProt: P03694 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: FULL-LENGTH LARGE TERMINASE OF BACTERIOPHAGE T7 / タイプ: VIRUS / 詳細: STAINED WITH 2% W/V URANYL ACETATE |
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緩衝液 | 名称: 50 MM SODIUM PHOSPHATE BUFFER PH 7, 300 MM NACL, 10 MM MGCL2 1 MM ADP, 5 MM DTT AND 20% (V/V) GLYCEROL. pH: 7.4 詳細: 50 MM SODIUM PHOSPHATE BUFFER PH 7, 300 MM NACL, 10 MM MGCL2 1 MM ADP, 5 MM DTT AND 20% (V/V) GLYCEROL. |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: YES / 凍結: NO |
染色 | タイプ: NEGATIVE / 染色剤: Uranyl Acetate |
試料支持 | 詳細: CARBON |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI F20 / 日付: 2009年10月23日 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 100 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 67000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3200 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm / Cs: 2.26 mm |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI EAGLE (4k x 4k) |
画像スキャン | デジタル画像の数: 1005 |
放射波長 | 相対比: 1 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: EACH PLATE | ||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C5 (5回回転対称) | ||||||||||||||||||
3次元再構成 | 手法: COMMON LINES / 解像度: 16 Å / 粒子像の数: 3650 / ピクセルサイズ(実測値): 4.4 Å 詳細: 3CPE PBD WAS USED AS A TEMPLATE FOR THE GENERATION OF THE GP19 ATOMIC MODEL THAT WAS SYMMETRIZED TO 5 AND FITTED IN THE LARGE TERMINASE EM VOLUME. SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA FROM ...詳細: 3CPE PBD WAS USED AS A TEMPLATE FOR THE GENERATION OF THE GP19 ATOMIC MODEL THAT WAS SYMMETRIZED TO 5 AND FITTED IN THE LARGE TERMINASE EM VOLUME. SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA FROM EMDB EMD-2355. (DEPOSITION ID: 11611). 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL / Target criteria: VOLUMETRIC CORRELATION 詳細: METHOD--RIGID BODY REFINEMENT PROTOCOL--HOMOLOGY MODEL BASED ON PDB 3CPE | ||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 3CPE Accession code: 3CPE / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 16 Å | ||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 16 Å
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