Text: Ubiquitin present in the samples was unlabeled
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試料調製
詳細
Solution-ID
内容
溶媒系
1
0.8 mM [U-80% 13C; U-90% 15N] Dcn1-UBA, 15 mM sodium chloride, 110 mM potassium phosphate, 2 mM DTT, 2 mM CHAPS, 0.02 % sodium azide, 25 mM sodium chloride, 3.2 mM ubiquitin, 95% H2O/5% D2O
95% H2O/5% D2O
2
0.5 mM [U-90% 15N] Dcn1-UBA, 15 mM sodium phosphate, 110 mM potassium phosphate, 2 mM DTT, 2 mM CHAPS, 0.02 % sodium azide, 25 mM sodium chloride, 2 mM ubiquitin, 95% H2O/5% D2O
95% H2O/5% D2O
試料
濃度 (mg/ml)
構成要素
Isotopic labeling
Solution-ID
0.8mM
Dcn1-UBA-1
[U-80% 13C; U-90% 15N]
1
15mM
sodium chloride-2
1
110mM
potassium phosphate-3
1
2mM
DTT-4
1
2mM
CHAPS-5
1
0.02 %
sodium azide-6
1
25mM
sodium chloride-7
1
3.2mM
ubiquitin-8
1
0.5mM
Dcn1-UBA-9
[U-90% 15N]
2
15mM
sodium phosphate-10
2
110mM
potassium phosphate-11
2
2mM
DTT-12
2
2mM
CHAPS-13
2
0.02 %
sodium azide-14
2
25mM
sodium chloride-15
2
2mM
ubiquitin-16
2
試料状態
イオン強度: 182 / pH: 6.15 / 圧: ambient / 温度: 288 K
-
NMR測定
NMRスペクトロメーター
タイプ
製造業者
モデル
磁場強度 (MHz)
Spectrometer-ID
Bruker Avance
Bruker
AVANCE
700
1
Bruker Avance
Bruker
AVANCE
750
2
Bruker Avance
Bruker
AVANCE
900
3
-
解析
NMR software
名称
バージョン
開発者
分類
Unio08
1.0.4
Herrmann
chemicalshiftassignment
Unio08
1.0.4
Herrmann
peakpicking
Amber
9
Case, Darden, Cheatham, III, Simmerling, Wang, Duke, Luo, ... andKollm
精密化
CYANA
2
Guntert, MumenthalerandWuthrich
構造決定
TopSpin
2
BrukerBiospin
解析
CARA
1.8.4
Keller
データ解析
精密化
手法: molecular dynamics / ソフトェア番号: 1
代表構造
選択基準: lowest energy
NMRアンサンブル
コンフォーマー選択の基準: structures with the lowest energy 計算したコンフォーマーの数: 40 / 登録したコンフォーマーの数: 20