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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-9541 | |||||||||||||||
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タイトル | Structure of TRiC-AMP-PNP | |||||||||||||||
マップデータ | Yeast TRiC-AMP-PNP at 4.6 angstroms resolution | |||||||||||||||
試料 |
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キーワード | Chaperonin / Yeast / CHAPERONE | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 Association of TriC/CCT with target proteins during biosynthesis / Cooperation of PDCL (PhLP1) and TRiC/CCT in G-protein beta folding / chaperone mediated protein folding independent of cofactor / chaperonin-containing T-complex / Neutrophil degranulation / ATP-dependent protein folding chaperone / unfolded protein binding / protein folding / ATP hydrolysis activity / ATP binding ...Association of TriC/CCT with target proteins during biosynthesis / Cooperation of PDCL (PhLP1) and TRiC/CCT in G-protein beta folding / chaperone mediated protein folding independent of cofactor / chaperonin-containing T-complex / Neutrophil degranulation / ATP-dependent protein folding chaperone / unfolded protein binding / protein folding / ATP hydrolysis activity / ATP binding / plasma membrane / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) | |||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.6 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Zang Y / Jin M | |||||||||||||||
資金援助 | 中国, 4件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2016 タイトル: Staggered ATP binding mechanism of eukaryotic chaperonin TRiC (CCT) revealed through high-resolution cryo-EM. 著者: Yunxiang Zang / Mingliang Jin / Huping Wang / Zhicheng Cui / Liangliang Kong / Caixuan Liu / Yao Cong / 要旨: The eukaryotic chaperonin TRiC (or CCT) assists in the folding of 10% of cytosolic proteins. Here we present two cryo-EM structures of Saccharomyces cerevisiae TRiC in a newly identified nucleotide ...The eukaryotic chaperonin TRiC (or CCT) assists in the folding of 10% of cytosolic proteins. Here we present two cryo-EM structures of Saccharomyces cerevisiae TRiC in a newly identified nucleotide partially preloaded (NPP) state and in the ATP-bound state, at 4.7-Å and 4.6-Å resolution, respectively. Through inner-subunit eGFP tagging, we identified the subunit locations in open-state TRiC and found that the CCT2 subunit pair forms an unexpected Z shape. ATP binding induces a dramatic conformational change on the CCT2 side, thereby suggesting that CCT2 plays an essential role in TRiC allosteric cooperativity. Our structural and biochemical data reveal a staggered ATP binding mechanism of TRiC with preloaded nucleotide on the CCT6 side of NPP-TRiC and demonstrate that TRiC has evolved into a complex that is structurally divided into two sides. This work offers insight into how the TRiC nucleotide cycle coordinates with its mechanical cycle in preparing folding intermediates for further productive folding. | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_9541.map.gz | 7.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-9541-v30.xml emd-9541.xml | 24.1 KB 24.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_9541.png | 184 KB | ||
Filedesc metadata | emd-9541.cif.gz | 8.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-9541 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-9541 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_9541_validation.pdf.gz | 450.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_9541_full_validation.pdf.gz | 450.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_9541_validation.xml.gz | 6.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_9541_validation.cif.gz | 7.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-9541 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-9541 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_9541.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Yeast TRiC-AMP-PNP at 4.6 angstroms resolution | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.318 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : Yeast TRiC-AMP-PNP
+超分子 #1: Yeast TRiC-AMP-PNP
+超分子 #2: T-complex protein 1 subunit alpha
+超分子 #3: T-complex protein 1 subunit beta
+超分子 #4: T-complex protein 1 subunit delta
+超分子 #5: T-complex protein 1 subunit epsilon
+超分子 #6: T-complex protein 1 subunit gamma
+超分子 #7: T-complex protein 1 subunit eta
+超分子 #8: T-complex protein 1 subunit theta
+超分子 #9: T-complex protein 1 subunit zeta
+分子 #1: T-complex protein 1 subunit alpha
+分子 #2: T-complex protein 1 subunit beta
+分子 #3: T-complex protein 1 subunit delta
+分子 #4: T-complex protein 1 subunit epsilon
+分子 #5: T-complex protein 1 subunit gamma
+分子 #6: T-complex protein 1 subunit eta
+分子 #7: T-complex protein 1 subunit theta
+分子 #8: T-complex protein 1 subunit zeta
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.7 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 10 sec. |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 281 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blot for 3 seconds before plunging. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均露光時間: 7.6 sec. / 平均電子線量: 38.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 最大 デフォーカス(補正後): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 1.5 µm / 倍率(補正後): 18000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.005 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 18000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: FLEXIBLE FIT |
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得られたモデル | PDB-5gw5: |