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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8965 | |||||||||
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タイトル | Influenza hemagglutinin (HA) trimer reconstruction at 4.1 Angstrom resolution using particles from micrographs tilted at 40 degrees | |||||||||
マップデータ | Influenza hemagglutinin (HA) trimer reconstruction at 4.1 Angstrom resolution using particles from micrographs tilted at 40 degrees, primary map | |||||||||
試料 |
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生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Su M | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Struct Biol / 年: 2019 タイトル: goCTF: Geometrically optimized CTF determination for single-particle cryo-EM. 著者: Min Su / 要旨: Preferred particle orientation represents a recurring problem in single-particle cryogenic electron microcopy (cryo-EM). A specimen-independent approach through tilting has been attempted to increase ...Preferred particle orientation represents a recurring problem in single-particle cryogenic electron microcopy (cryo-EM). A specimen-independent approach through tilting has been attempted to increase particle orientation coverage, thus minimizing anisotropic three-dimensional (3D) reconstruction. However, focus gradient is a critical issue hindering tilt applications from being a general practice in single-particle cryo-EM. The present study describes a newly developed geometrically optimized approach, goCTF, to reliably determine the global focus gradient. A novel strategy of determining contrast transfer function (CTF) parameters from a sector of the signal preserved power spectrum is applied to increase reliability. Subsequently, per-particle based local focus refinement is conducted in an iterative manner to further improve the defocus accuracy. Novel diagnosis methods using a standard deviation defocus plot and goodness of fit heatmap have also been proposed to evaluate CTF fitting quality prior to 3D refinement. In a benchmark study, goCTF processed a published single-particle cryo-EM dataset for influenza hemagglutinin trimer collected at a 40-degree specimen tilt. The resulting 3D reconstruction map was improved from 4.1 Å to 3.7 Å resolution. The goCTF program is built on the open-source code of CTFFIND4, which adopts a consistent user interface for ease of use. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_8965.map.gz | 59.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-8965-v30.xml emd-8965.xml | 7.7 KB 7.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_8965.png | 48.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8965 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8965 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_8965_validation.pdf.gz | 78.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_8965_full_validation.pdf.gz | 77.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_8965_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8965 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8965 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8965.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Influenza hemagglutinin (HA) trimer reconstruction at 4.1 Angstrom resolution using particles from micrographs tilted at 40 degrees, primary map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.31 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Influenza hemagglutinin (HA) trimer
全体 | 名称: Influenza hemagglutinin (HA) trimer |
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要素 |
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-超分子 #1: Influenza hemagglutinin (HA) trimer
超分子 | 名称: Influenza hemagglutinin (HA) trimer / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 150 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 82.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: EMDB MAP EMDB ID: |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 130000 |
初期 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |
最終 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |