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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8778 | |||||||||
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タイトル | Type II secretin from Enteropathogenic Escherichia coli - GspD | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Type 2 secretin / outer membrane complex / homo oligomer / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein secretion by the type II secretion system / type II protein secretion system complex / cell outer membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) / Escherichia coli O127:H6 (strain E2348/69 / EPEC) (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Hay ID / Belousoff MJ | |||||||||
資金援助 | オーストラリア, 2件
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引用 | ジャーナル: J Bacteriol / 年: 2018 タイトル: Structure and Membrane Topography of the Vibrio-Type Secretin Complex from the Type 2 Secretion System of Enteropathogenic Escherichia coli. 著者: Iain D Hay / Matthew J Belousoff / Rhys A Dunstan / Rebecca S Bamert / Trevor Lithgow / 要旨: The β-barrel assembly machinery (BAM) complex is the core machinery for the assembly of β-barrel membrane proteins, and inhibition of BAM complex activity is lethal to bacteria. Discovery of ...The β-barrel assembly machinery (BAM) complex is the core machinery for the assembly of β-barrel membrane proteins, and inhibition of BAM complex activity is lethal to bacteria. Discovery of integral membrane proteins that are key to pathogenesis and yet do not require assistance from the BAM complex raises the question of how these proteins assemble into bacterial outer membranes. Here, we address this question through a structural analysis of the type 2 secretion system (T2SS) secretin from enteropathogenic O127:H6 strain E2348/69. Long β-strands assemble into a barrel extending 17 Å through and beyond the outer membrane, adding insight to how these extensive β-strands are assembled into the outer membrane. The substrate docking chamber of this secretin is shown to be sufficient to accommodate the substrate mucinase SteC. In order to cause disease, bacterial pathogens inhibit immune responses and induce pathology that will favor their replication and dissemination. In Gram-negative bacteria, these key attributes of pathogenesis depend on structures assembled into or onto the outer membrane. One of these is the T2SS. The -type T2SS mediates cholera toxin secretion in , and in O127:H6 strain E2348/69, the same machinery mediates secretion of the mucinases that enable the pathogen to penetrate intestinal mucus and thereby establish deadly infections. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_8778.map.gz | 85.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-8778-v30.xml emd-8778.xml | 12.9 KB 12.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_8778.png | 54.9 KB | ||
Filedesc metadata | emd-8778.cif.gz | 5.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8778 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8778 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_8778_validation.pdf.gz | 530.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_8778_full_validation.pdf.gz | 530.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_8778_validation.xml.gz | 6.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_8778_validation.cif.gz | 7.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8778 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8778 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8778.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 91.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.06 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Type II sectretin outer membrane complex
全体 | 名称: Type II sectretin outer membrane complex |
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要素 |
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-超分子 #1: Type II sectretin outer membrane complex
超分子 | 名称: Type II sectretin outer membrane complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 株: O127:H6 strain E2348/69 |
-分子 #1: Putative type II secretion protein
分子 | 名称: Putative type II secretion protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 15 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli O127:H6 (strain E2348/69 / EPEC) (大腸菌) 株: E2348/69 / EPEC |
分子量 | 理論値: 41.192559 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: GNSQVFYLKY SKAEDLVDVL KQVSGTLTAA KEEAEGTVGS GREVVSIAAS KHSNALIVTA PQDIMQSLQS VIEQLDIRRA QVHVEALIV EVAEGSNINF GVQWGSKDAG LMQFANGTQI PIGTLGAAIS AAKPQKGSTV ISENGATTIN PDTNGDLSTL A QLLSGFSG ...文字列: GNSQVFYLKY SKAEDLVDVL KQVSGTLTAA KEEAEGTVGS GREVVSIAAS KHSNALIVTA PQDIMQSLQS VIEQLDIRRA QVHVEALIV EVAEGSNINF GVQWGSKDAG LMQFANGTQI PIGTLGAAIS AAKPQKGSTV ISENGATTIN PDTNGDLSTL A QLLSGFSG TAVGVVKGDW MALVQAVKND SSSNVLSTPS ITTLDNQEAF FMVGQDVPVL TGSTVGSNNS NPFNTVERKK VG IMLKVTP QINEGNAVQM VIEQEVSKVE GQTSLDVVFG ERKLKTTVLA NDGELIVLGG LMDDQAGESV AKVPLLGDIP LIG NLFKST ADKKEKRNLM VFIRPTILRD GMAADGVSQR KYNYMRAEQI YRDEQGLSLM PHTAQPILPA Q UniProtKB: Putative type II secretion protein |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.5 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-18 / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 130000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm 最大 デフォーカス(公称値): 2.8000000000000003 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT |
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得られたモデル | PDB-5w68: |