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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-7611 | |||||||||
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タイトル | Intact Type IV Secretion Machine | |||||||||
マップデータ | Intact machine structure | |||||||||
試料 |
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生物種 | Legionella pneumophila (バクテリア) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 33.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Liu J / Hu B | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Microbiol / 年: 2018 タイトル: A unique cytoplasmic ATPase complex defines the Legionella pneumophila type IV secretion channel. 著者: David Chetrit / Bo Hu / Peter J Christie / Craig R Roy / Jun Liu / 要旨: Type IV secretion systems (T4SSs) are complex machines used by bacteria to deliver protein and DNA complexes into target host cells. Conserved ATPases are essential for T4SS function, but how they ...Type IV secretion systems (T4SSs) are complex machines used by bacteria to deliver protein and DNA complexes into target host cells. Conserved ATPases are essential for T4SS function, but how they coordinate their activities to promote substrate transfer remains poorly understood. Here, we show that the DotB ATPase associates with the Dot-Icm T4SS at the Legionella cell pole through interactions with the DotO ATPase. The structure of the Dot-Icm apparatus was solved in situ by cryo-electron tomography at 3.5 nm resolution and the cytoplasmic complex was solved at 3.0 nm resolution. These structures revealed a cell envelope-spanning channel that connects to the cytoplasmic complex. Further analysis revealed a hexameric assembly of DotO dimers associated with the inner membrane complex, and a DotB hexamer associated with the base of this cytoplasmic complex. The assembly of a DotB-DotO energy complex creates a cytoplasmic channel that directs the translocation of substrates through the T4SS. These data define distinct stages in Dot-Icm machine biogenesis, advance our understanding of channel activation, and identify an envelope-spanning T4SS channel. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_7611.map.gz | 10.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-7611-v30.xml emd-7611.xml | 8.3 KB 8.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_7611.png | 155.3 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7611 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7611 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_7611_validation.pdf.gz | 78.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_7611_full_validation.pdf.gz | 77.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_7611_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7611 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7611 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_7611.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 11.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Intact machine structure | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 5 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Type IV secretion machine
全体 | 名称: Type IV secretion machine |
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要素 |
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-超分子 #1: Type IV secretion machine
超分子 | 名称: Type IV secretion machine / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Legionella pneumophila (バクテリア) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均露光時間: 1.0 sec. / 平均電子線量: 1.5 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C13 (13回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 33.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / 使用したサブトモグラム数: 5000 |
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抽出 | トモグラム数: 1000 / 使用した粒子像数: 5000 / 手法: manually / ソフトウェア - 名称: IMOD (ver. 4.9.6) |
CTF補正 | ソフトウェア - 名称: IMOD (ver. 4.9.6) |
最終 角度割当 | タイプ: OTHER |