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- EMDB-72607: Leishmania 96 nm half 2 protofilament refinement position 5_3 -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-72607
タイトルLeishmania 96 nm half 2 protofilament refinement position 5_3
マップデータDeepEMhancer sharpened map
試料
  • 複合体: Leishmania 96 nm half 2 protofilament refinement position 5_3
キーワードflagella / parasite / axoneme / doublet microtubule / STRUCTURAL PROTEIN
生物種Leishmania tarentolae (真核生物)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å
データ登録者Doran MH / Brown A
資金援助 米国, 3件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01GM141109 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01GM143183 米国
National Science Foundation (NSF, United States)MCB-2434879 米国
引用ジャーナル: bioRxiv / 年: 2025
タイトル: Axonemal dynein contributions to flagellar beat types and waveforms.
著者: Sophia Fochler / Matthew H Doran / Tom Beneke / James Smith / Cecile Fort / Benjamin J Walker / Alan Brown / Eva Gluenz / Richard J Wheeler /
要旨: Eukaryotic flagella, or motile cilia, are iconic molecular machines whose beating drives cell propulsion and fluid transport across diverse organisms. Beat type and waveform are tailored to function, ...Eukaryotic flagella, or motile cilia, are iconic molecular machines whose beating drives cell propulsion and fluid transport across diverse organisms. Beat type and waveform are tailored to function, differing between species and cell types, and individual flagella can switch between beat types. Aberrant beating causes ciliopathies and infertility in humans and prevents unicellular parasite transmission. Eight distinct dynein motor protein complexes bind to axonemal doublet microtubules (DMTs) within flagella and drive beating, yet despite extensive structural analysis, how this machinery achieves different beat types is unknown. Here, using the flagellate unicellular parasite , we show a division of labour where specific dyneins drive specific beat types. Using cryo-EM, we determined the structure of the 96-nm repeat unit of the DMT and identified its dynein composition. We used CRISPR-Cas9 to systematically delete all 96-nm repeat proteins, comprehensively mapping necessity for swimming, and determined the contribution of each dynein to incidence and waveform of the preferred beat types. Outer dynein arms (ODAs) were required for symmetric tip-to-base beats, specific single-headed inner dynein arms (IDAs) were important for asymmetric base-to-tip beats (IDA), and double-headed IDA important for both. This systematic analysis indicates that the prevailing dogma that ODAs drive and IDAs shape the beat is either incomplete or not universal, and establishes new hypotheses for how different species, cell types and individual flagella achieve their necessary beat types.
履歴
登録2025年9月8日-
ヘッダ(付随情報) 公開2025年12月17日-
マップ公開2025年12月17日-
更新2025年12月24日-
現状2025年12月24日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_72607.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_72607.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 512 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈DeepEMhancer sharpened map
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.33 Å/pix.
x 512 pix.
= 680.96 Å		1.33 Å/pix.
x 512 pix.
= 680.96 Å		1.33 Å/pix.
x 512 pix.
= 680.96 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.33 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.171
最小 - 最大-0.004300821 - 2.0486562
平均 (標準偏差)0.001464335 (±0.02888993)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ512512512
Spacing512512512
セルA=B=C: 680.96 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: Relion sharpened map

ファイルemd_72607_additional_1.map
注釈Relion sharpened map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Half map 1

ファイルemd_72607_half_map_1.map
注釈Half map 1
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Half map 2

ファイルemd_72607_half_map_2.map
注釈Half map 2
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Leishmania 96 nm half 2 protofilament refinement position 5_3

全体名称: Leishmania 96 nm half 2 protofilament refinement position 5_3
要素
  • 複合体: Leishmania 96 nm half 2 protofilament refinement position 5_3

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超分子 #1: Leishmania 96 nm half 2 protofilament refinement position 5_3

超分子名称: Leishmania 96 nm half 2 protofilament refinement position 5_3
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#313
由来(天然)生物種: Leishmania tarentolae (真核生物) / 株: P10 / Organelle: Flagella

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態filament

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試料調製

濃度6.5 mg/mL
緩衝液pH: 7.2
グリッドモデル: Quantifoil Active R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 278 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細This sample consisted of freshly splayed Leishmania tarentolae axonemes.

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電子顕微鏡法

顕微鏡TFS KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 4 / 実像数: 37665 / 平均電子線量: 62.6 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.5 µm
試料ステージホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正ソフトウェア - 名称: CTFFIND / タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
初期モデルモデルのタイプ: NONE
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION / 使用した粒子像数: 281984
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルChain - Source name: Other / Chain - Initial model type: integrative model
詳細: The initial model consisted of rigid body fit AlphaFold models and models build with ModelAngelo.

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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