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- EMDB-70974: CRYO-EM STRUCTURE OF the human mPSF IN COMPLEX WITH THE AGUAAA po... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-70974
タイトルCRYO-EM STRUCTURE OF the human mPSF IN COMPLEX WITH THE AGUAAA poly(A) signal
マップデータprimary map
試料
  • 複合体: human mPSF in complex with the AGUAAA poly(A) signal
    • タンパク質・ペプチド: Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 1
    • タンパク質・ペプチド: pre-mRNA 3' end processing protein WDR33
    • タンパク質・ペプチド: Isoform 2 of Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 4
    • RNA: RNA (5'-R(P*AP*GP*UP*AP*AP*AP*C)-3')
  • リガンド: ZINC ION
キーワードpolyadenylation signal / RNA BINDING PROTEIN / RNA BINDING PROTEIN-RNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


co-transcriptional RNA 3'-end processing, cleavage and polyadenylation pathway / Inhibition of Host mRNA Processing and RNA Silencing / Processing of Intronless Pre-mRNAs / mRNA cleavage and polyadenylation specificity factor complex / collagen trimer / mRNA 3'-UTR AU-rich region binding / mRNA 3'-end processing / Transport of Mature mRNA Derived from an Intronless Transcript / mRNA 3'-end processing / DNA damage tolerance ...co-transcriptional RNA 3'-end processing, cleavage and polyadenylation pathway / Inhibition of Host mRNA Processing and RNA Silencing / Processing of Intronless Pre-mRNAs / mRNA cleavage and polyadenylation specificity factor complex / collagen trimer / mRNA 3'-UTR AU-rich region binding / mRNA 3'-end processing / Transport of Mature mRNA Derived from an Intronless Transcript / mRNA 3'-end processing / DNA damage tolerance / tRNA processing in the nucleus / RNA Polymerase II Transcription Termination / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / fibrillar center / mRNA processing / sequence-specific double-stranded DNA binding / spermatogenesis / enzyme binding / RNA binding / zinc ion binding / nucleoplasm / nucleus
類似検索 - 分子機能
Zinc-finger CCCH domain / Zinc-finger containing family / CPSF complex subunit CPSF4-like / Pre-mRNA 3' end processing protein Pfs2-like / Zinc finger C-x8-C-x5-C-x3-H type (and similar) / Zinc finger, CCCH-type superfamily / zinc finger / Zinc finger, CCCH-type / Collagen triple helix repeat / Collagen triple helix repeat (20 copies) ...Zinc-finger CCCH domain / Zinc-finger containing family / CPSF complex subunit CPSF4-like / Pre-mRNA 3' end processing protein Pfs2-like / Zinc finger C-x8-C-x5-C-x3-H type (and similar) / Zinc finger, CCCH-type superfamily / zinc finger / Zinc finger, CCCH-type / Collagen triple helix repeat / Collagen triple helix repeat (20 copies) / Zinc finger C3H1-type profile. / : / RSE1/DDB1/CPSF1 second beta-propeller / Cleavage/polyadenylation specificity factor, A subunit, C-terminal / Cleavage/polyadenylation specificity factor, A subunit, N-terminal / : / CPSF A subunit region / RSE1/DDB1/CPSF1 first beta-propeller / zinc finger / Zinc knuckle / Zinc finger, CCHC-type superfamily / Zinc finger, CCHC-type / Zinc finger CCHC-type profile. / WD domain, G-beta repeat / Trp-Asp (WD) repeats profile. / Trp-Asp (WD) repeats circular profile. / WD40 repeats / WD40 repeat / WD40-repeat-containing domain superfamily / WD40/YVTN repeat-like-containing domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 4 / Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 1 / pre-mRNA 3' end processing protein WDR33
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.53 Å
データ登録者Huang L / Tong L / Chu H-F
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R35GM118093 米国
引用ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2025
タイトル: Molecular basis for the recognition of low-frequency polyadenylation signals by mPSF.
著者: Lin Huang / Hsu-Feng Chu / Liang Tong /
要旨: The 3'-end cleavage and polyadenylation of pre-mRNAs is dependent on a key hexanucleotide motif known as the polyadenylation signal (PAS). The PAS hexamer is recognized by the mammalian ...The 3'-end cleavage and polyadenylation of pre-mRNAs is dependent on a key hexanucleotide motif known as the polyadenylation signal (PAS). The PAS hexamer is recognized by the mammalian polyadenylation specificity factor (mPSF). AAUAAA is the most frequent PAS hexamer and together with AUUAAA, the second most frequent hexamer, account for ∼75% of the poly(A) signals. The remaining hexamers are at low frequency (<3%), and the molecular basis for their recognition is still not known. Here, we have determined the binding affinities for most of the PAS hexamers, showing that the Kd values are generally inversely correlated with their frequency. We also observed good cleavage activity for two low-frequency hexamers, AAGAAA and AACAAA. We have determined the cryo-electron microscopy structures of human mPSF in complex with AAUAAU and AGUAAA, at 3.1 and 2.5 Å resolution, respectively. The overall binding modes of the two low-frequency hexamers are similar to that of AAUAAA, although the U3-A6 Hoogsteen base pair is disrupted in the AAUAAU hexamer. For AGUAAA, the G2 base undergoes a large conformational change, which allows it to maintain the hydrogen-bonding interaction with CPSF30 as observed with A2 and establish a new hydrogen bond to CPSF30.
履歴
登録2025年6月3日-
ヘッダ(付随情報) 公開2025年11月26日-
マップ公開2025年11月26日-
更新2025年12月17日-
現状2025年12月17日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_70974.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_70974.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 91.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈primary map
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.83 Å/pix.
x 288 pix.
= 237.773 Å		0.83 Å/pix.
x 288 pix.
= 237.773 Å		0.83 Å/pix.
x 288 pix.
= 237.773 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.8256 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.153
最小 - 最大-1.0593967 - 1.4183136
平均 (標準偏差)-0.0000843964 (±0.04297682)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ288288288
Spacing288288288
セルA=B=C: 237.77281 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: half map A

ファイルemd_70974_half_map_1.map
注釈half map_A
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: half map B

ファイルemd_70974_half_map_2.map
注釈half map_B
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : human mPSF in complex with the AGUAAA poly(A) signal

全体名称: human mPSF in complex with the AGUAAA poly(A) signal
要素
  • 複合体: human mPSF in complex with the AGUAAA poly(A) signal
    • タンパク質・ペプチド: Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 1
    • タンパク質・ペプチド: pre-mRNA 3' end processing protein WDR33
    • タンパク質・ペプチド: Isoform 2 of Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 4
    • RNA: RNA (5'-R(P*AP*GP*UP*AP*AP*AP*C)-3')
  • リガンド: ZINC ION

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超分子 #1: human mPSF in complex with the AGUAAA poly(A) signal

超分子名称: human mPSF in complex with the AGUAAA poly(A) signal
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#4
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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分子 #1: Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 1

分子名称: Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 1
タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 161.074234 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MYAVYKQAHP PTGLEFSMYC NFFNNSERNL VVAGTSQLYV YRLNRDAEAL TKNDRSTEGK AHREKLELAA SFSFFGNVMS MASVQLAGA KRDALLLSFK DAKLSVVEYD PGTHDLKTLS LHYFEEPELR DGFVQNVHTP RVRVDPDGRC AAMLVYGTRL V VLPFRRES ...文字列:
MYAVYKQAHP PTGLEFSMYC NFFNNSERNL VVAGTSQLYV YRLNRDAEAL TKNDRSTEGK AHREKLELAA SFSFFGNVMS MASVQLAGA KRDALLLSFK DAKLSVVEYD PGTHDLKTLS LHYFEEPELR DGFVQNVHTP RVRVDPDGRC AAMLVYGTRL V VLPFRRES LAEEHEGLVG EGQRSSFLPS YIIDVRALDE KLLNIIDLQF LHGYYEPTLL ILFEPNQTWP GRVAVRQDTC SI VAISLNI TQKVHPVIWS LTSLPFDCTQ ALAVPKPIGG VVVFAVNSLL YLNQSVPPYG VALNSLTTGT TAFPLRTQEG VRI TLDCAQ ATFISYDKMV ISLKGGEIYV LTLITDGMRS VRAFHFDKAA ASVLTTSMVT MEPGYLFLGS RLGNSLLLKY TEKL QEPPA SAVREAADKE EPPSKKKRVD ATAGWSAAGK SVPQDEVDEI EVYGSEAQSG TQLATYSFEV CDSILNIGPC ANAAV GEPA FLSEEFQNSP EPDLEIVVCS GHGKNGALSV LQKSIRPQVV TTFELPGCYD MWTVIAPVRK EEEDNPKGEG TEQEPS TTP EADDDGRRHG FLILSREDST MILQTGQEIM ELDTSGFATQ GPTVFAGNIG DNRYIVQVSP LGIRLLEGVN QLHFIPV DL GAPIVQCAVA DPYVVIMSAE GHVTMFLLKS DSYGGRHHRL ALHKPPLHHQ SKVITLCLYR DLSGMFTTES RLGGARDE L GGRSGPEAEG LGSETSPTVD DEEEMLYGDS GSLFSPSKEE ARRSSQPPAD RDPAPFRAEP THWCLLVREN GTMEIYQLP DWRLVFLVKN FPVGQRVLVD SSFGQPTTQG EARREEATRQ GELPLVKEVL LVALGSRQSR PYLLVHVDQE LLIYEAFPHD SQLGQGNLK VRFKKVPHNI NFREKKPKPS KKKAEGGGAE EGAGARGRVA RFRYFEDIYG YSGVFICGPS PHWLLVTGRG A LRLHPMAI DGPVDSFAPF HNVNCPRGFL YFNRQGELRI SVLPAYLSYD APWPVRKIPL RCTAHYVAYH VESKVYAVAT ST NTPCARI PRMTGEEKEF ETIERDERYI HPQQEAFSIQ LISPVSWEAI PNARIELQEW EHVTCMKTVS LRSEETVSGL KGY VAAGTC LMQGEEVTCR GRILIMDVIE VVPEPGQPLT KNKFKVLYEK EQKGPVTALC HCNGHLVSAI GQKIFLWSLR ASEL TGMAF IDTQLYIHQM ISVKNFILAA DVMKSISLLR YQEESKTLSL VSRDAKPLEV YSVDFMVDNA QLGFLVSDRD RNLMV YMYL PEAKESFGGM RLLRRADFHV GAHVNTFWRT PCRGATEGLS KKSVVWENKH ITWFATLDGG IGLLLPMQEK TYRRLL MLQ NALTTMLPHH AGLNPRAFRM LHVDRRTLQN AVRNVLDGEL LNRYLYLSTM ERSELAKKIG TTPDIILDDL LETDRVT AH F

UniProtKB: Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 1

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分子 #2: pre-mRNA 3' end processing protein WDR33

分子名称: pre-mRNA 3' end processing protein WDR33 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 66.053102 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: SNAATEIGSP PRFFHMPRFQ HQAPRQLFYK RPDFAQQQAM QQLTFDGKRM RKAVNRKTID YNPSVIKYLE NRIWQRDQRD MRAIQPDAG YYNDLVPPIG MLNNPMNAVT TKFVRTSTNK VKCPVFVVRW TPEGRRLVTG ASSGEFTLWN GLTFNFETIL Q AHDSPVRA ...文字列:
SNAATEIGSP PRFFHMPRFQ HQAPRQLFYK RPDFAQQQAM QQLTFDGKRM RKAVNRKTID YNPSVIKYLE NRIWQRDQRD MRAIQPDAG YYNDLVPPIG MLNNPMNAVT TKFVRTSTNK VKCPVFVVRW TPEGRRLVTG ASSGEFTLWN GLTFNFETIL Q AHDSPVRA MTWSHNDMWM LTADHGGYVK YWQSNMNNVK MFQAHKEAIR EASFSPTDNK FATCSDDGTV RIWDFLRCHE ER ILRGHGA DVKCVDWHPT KGLVVSGSKD SQQPIKFWDP KTGQSLATLH AHKNTVMEVK LNLNGNWLLT ASRDHLCKLF DIR NLKEEL QVFRGHKKEA TAVAWHPVHE GLFASGGSDG SLLFWHVGVE KEVGGMEMAH EGMIWSLAWH PLGHILCSGS NDHT SKFWT RNRPGDKMRD RYNLNLLPGM SEDGVEYDDL EPNSLAVIPG MGIPEQLKLA MEQEQMGKDE SNEIEMTIPG LDWGM EEVM QKDQKKVPQK KVPYAKPIPA QFQQAWMQNK VPIPAPNEVL NDRKEDIKLE EKKKTQAEIE QEMATLQYTN PQLLEQ LKI ERLAQKQVEQ I

UniProtKB: pre-mRNA 3' end processing protein WDR33

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分子 #3: Isoform 2 of Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 4

分子名称: Isoform 2 of Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 4
タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 27.589004 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MQEIIASVDH IKFDLEIAVE QQLGAQPLPF PGMDKSGAAV CEFFLKAACG KGGMCPFRHI SGEKTVVCKH WLRGLCKKGD QCEFLHEYD MTKMPECYFY SKFGECSNKE CPFLHIDPES KIKDCPWYDR GFCKHGPLCR HRHTRRVICV NYLVGFCPEG P SCKFMHPR ...文字列:
MQEIIASVDH IKFDLEIAVE QQLGAQPLPF PGMDKSGAAV CEFFLKAACG KGGMCPFRHI SGEKTVVCKH WLRGLCKKGD QCEFLHEYD MTKMPECYFY SKFGECSNKE CPFLHIDPES KIKDCPWYDR GFCKHGPLCR HRHTRRVICV NYLVGFCPEG P SCKFMHPR FELPMGTTEQ PPLPQQTQPP AKQRTPQVIG VMQSQNSSAG NRGPRPLEQV TCYKCGEKGH YANRCTKGHL AF LSGQ

UniProtKB: Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 4

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分子 #4: RNA (5'-R(P*AP*GP*UP*AP*AP*AP*C)-3')

分子名称: RNA (5'-R(P*AP*GP*UP*AP*AP*AP*C)-3') / タイプ: rna / ID: 4 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 3.843384 KDa
配列文字列:
UGCAGUAAAC AA

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分子 #5: ZINC ION

分子名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 3 / 式: ZN
分子量理論値: 65.409 Da

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 8
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡TFS KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 52.85 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: OTHER / 撮影モード: OTHER / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.6 µm / 倍率（公称値）: 105000
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
初期モデルモデルのタイプ: OTHER
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.53 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 529257
初期 角度割当タイプ: OTHER
最終 角度割当タイプ: OTHER

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原子モデル構築 1

初期モデル
PDB IDChain

6dnh

chain_id: A, residue_range: 1-1443, source_name: PDB, initial_model_type: experimental model

6dnh

chain_id: B, residue_range: 1-572, source_name: PDB, initial_model_type: experimental model

6dnh

chain_id: C, residue_range: 1-244, source_name: PDB, initial_model_type: experimental model
精密化空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL
得られたモデル

PDB-9oxe:
CRYO-EM STRUCTURE OF the human mPSF IN COMPLEX WITH THE AGUAAA poly(A) signal

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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