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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6663 | |||||||||
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| タイトル | Structure of RIP2 CARD domain | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
| 手法 | らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.85 Å | |||||||||
データ登録者 | Wu B / Gong Q | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2018タイトル: Structural basis of RIP2 activation and signaling. 著者: Qin Gong / Ziqi Long / Franklin L Zhong / Daniel Eng Thiam Teo / Yibo Jin / Zhan Yin / Zhao Zhi Boo / Yaming Zhang / Jiawen Zhang / Renliang Yang / Shashi Bhushan / Bruno Reversade / Zongli Li / Bin Wu / ![]() 要旨: Signals arising from bacterial infections are detected by pathogen recognition receptors (PRRs) and are transduced by specialized adapter proteins in mammalian cells. The Receptor-interacting- ...Signals arising from bacterial infections are detected by pathogen recognition receptors (PRRs) and are transduced by specialized adapter proteins in mammalian cells. The Receptor-interacting-serine/threonine-protein kinase 2 (RIPK2 or RIP2) is such an adapter protein that is critical for signal propagation of the Nucleotide-binding-oligomerization-domain-containing proteins 1/2 (NOD1 and NOD2). Dysregulation of this signaling pathway leads to defects in bacterial detection and in some cases autoimmune diseases. Here, we show that the Caspase-activation-and-recruitment-domain (CARD) of RIP2 (RIP2-CARD) forms oligomeric structures upon stimulation by either NOD1-CARD or NOD2-2CARD. We reconstitute this complex, termed the RIPosome in vitro and solve the cryo-EM filament structure of the active RIP2-CARD complex at 4.1 Å resolution. The structure suggests potential mechanisms by which CARD domains from NOD1 and NOD2 initiate the oligomerization process of RIP2-CARD. Together with structure guided mutagenesis experiments at the CARD-CARD interfaces, we demonstrate molecular mechanisms how RIP2 is activated and self-propagating such signal. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
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| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_6663.map.gz | 28 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-6663-v30.xml emd-6663.xml | 13.8 KB 13.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_6663.png | 98 KB | ||
| その他 | emd_6663_half_map_1.map.gz emd_6663_half_map_2.map.gz | 23.3 MB 23.3 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6663 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6663 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_6663_validation.pdf.gz | 638.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_6663_full_validation.pdf.gz | 637.9 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_6663_validation.xml.gz | 11.1 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_6663_validation.cif.gz | 12.5 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6663 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6663 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6663.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.31 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-ハーフマップ: #1
| ファイル | emd_6663_half_map_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
| ファイル | emd_6663_half_map_2.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Active RIP2 signaling complex
| 全体 | 名称: Active RIP2 signaling complex |
|---|---|
| 要素 |
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-超分子 #1: Active RIP2 signaling complex
| 超分子 | 名称: Active RIP2 signaling complex / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
| 組換発現 | 生物種: ![]() |
-分子 #1: Receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 2
| 分子 | 名称: Receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 2 タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 12 / 光学異性体: LEVO / EC番号: non-specific serine/threonine protein kinase |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
| 分子量 | 理論値: 10.751217 KDa |
| 組換発現 | 生物種: ![]() |
| 配列 | 文字列: TNSAGIAQQW IQSKREDIVN QMTEACLNQS LDALLSRDLI MKEDYELVST KPTRTSKVRQ LLDTTDIQGE EFAKVIVQKL KDNKQMGLQ PYPEI |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | らせん対称体再構成法 |
| 試料の集合状態 | filament |
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試料調製
| 濃度 | 0.2 mg/mL |
|---|---|
| 緩衝液 | pH: 7.4 |
| グリッド | 材質: COPPER / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY |
| 凍結 | 凍結剤: METHANE |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 平均電子線量: 12.6 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
| 最終 再構成 | 想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 4.9448 Å 想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: -101.188 ° 想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C1 (非対称) 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.85 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.0beta) 詳細: The model is only a partial model. Indefinite filament model could be produced by a helical rotation. 使用した粒子像数: 118954 |
|---|---|
| CTF補正 | ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.0beta) |
| 最終 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.0beta) |
-原子モデル構築 1
| 精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT |
|---|---|
| 得られたモデル | ![]()
PDB-5h4a: |
ムービー
コントローラー
万見について



Homo sapiens (ヒト)
データ登録者
引用

UCSF Chimera










Z (Sec.)
Y (Row.)
X (Col.)







































