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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6593 | |||||||||
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タイトル | CSF_trimer in a post-fusion or intermediate conformation bound to the bnAb PGV04 | |||||||||
マップデータ | CSF_trimer_post_fusion bound to bnAb PGV04 | |||||||||
試料 |
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キーワード | HIV / envelope / glycoprotein / trimer | |||||||||
生物種 | Human immunodeficiency virus (ヒト免疫不全ウイルス) / Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 20.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Kong L / He L / de Val N / Morris CD / Vora N / Azadnia P / Sok D / Zhou B / Burton DR / Ward AB ...Kong L / He L / de Val N / Morris CD / Vora N / Azadnia P / Sok D / Zhou B / Burton DR / Ward AB / Wilson IA / Zhu J | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2016 タイトル: Uncleaved prefusion-optimized gp140 trimers derived from analysis of HIV-1 envelope metastability. 著者: Leopold Kong / Linling He / Natalia de Val / Nemil Vora / Charles D Morris / Parisa Azadnia / Devin Sok / Bin Zhou / Dennis R Burton / Andrew B Ward / Ian A Wilson / Jiang Zhu / 要旨: The trimeric HIV-1 envelope glycoprotein (Env) is critical for host immune recognition and neutralization. Despite advances in trimer design, the roots of Env trimer metastability remain elusive. ...The trimeric HIV-1 envelope glycoprotein (Env) is critical for host immune recognition and neutralization. Despite advances in trimer design, the roots of Env trimer metastability remain elusive. Here we investigate the contribution of two Env regions to metastability. First, we computationally redesign a largely disordered bend in heptad region 1 (HR1) of SOSIP trimers that connects the long, central HR1 helix to the fusion peptide, substantially improving the yield of soluble, well-folded trimers. Structural and antigenic analyses of two distinct HR1 redesigns confirm that redesigned Env closely mimics the native, prefusion trimer with a more stable gp41. Next, we replace the cleavage site between gp120 and gp41 with various linkers in the context of an HR1 redesign. Electron microscopy reveals a potential fusion intermediate state for uncleaved trimers containing short but not long linkers. Together, these results outline a general approach for stabilization of Env trimers from diverse HIV-1 strains. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_6593.map.gz | 1.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-6593-v30.xml emd-6593.xml | 10.5 KB 10.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 400_6593.gif 80_6593.gif | 10.9 KB 1.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6593 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6593 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_6593_validation.pdf.gz | 78.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_6593_full_validation.pdf.gz | 78 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_6593_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6593 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6593 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6593.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | CSF_trimer_post_fusion bound to bnAb PGV04 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : CSF trimer post-fusion state or intermediate state bound to PGV04
全体 | 名称: CSF trimer post-fusion state or intermediate state bound to PGV04 |
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要素 |
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-超分子 #1000: CSF trimer post-fusion state or intermediate state bound to PGV04
超分子 | 名称: CSF trimer post-fusion state or intermediate state bound to PGV04 タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Trimer bound to three Fabs / Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 570 KDa |
-分子 #1: CSF
分子 | 名称: CSF / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 詳細: Heterodimer of gp120 and gp41 assembles into a trimer. コピー数: 2 / 集合状態: trimer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Human immunodeficiency virus (ヒト免疫不全ウイルス) |
分子量 | 実験値: 570 KDa / 理論値: 570 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換株: HEK 293F / 組換細胞: 293F |
-分子 #2: PGV04
分子 | 名称: PGV04 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: Fab / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: HEK 293F |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.02 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl |
染色 | タイプ: NEGATIVE 詳細: Grids were glow-discharged at 20 mA for 30 seconds and stained with 2% uranyl formate for 40 seconds. |
グリッド | 詳細: 400 Cu mesh grids |
凍結 | 凍結剤: NONE / 装置: OTHER |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI SPIRIT |
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日付 | 2015年8月15日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F416 (4k x 4k) 実像数: 119 / 平均電子線量: 30.15 e/Å2 |
Tilt angle min | 0 |
電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: LAB6 |
電子光学系 | 倍率(補正後): 52000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 46000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC / Tilt angle max: 50 |
実験機器 | モデル: Tecnai Spirit / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 20.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: EMAN2, sparx / 使用した粒子像数: 10706 |
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最終 2次元分類 | クラス数: 104 |