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万見
- EMDB-65715: Cryo-EM map of the nucleosome reconstituted in E. coli cells -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-65715
タイトルCryo-EM map of the nucleosome reconstituted in E. coli cells
マップデータMain map
試料
  • 複合体: Xenopus nucleosome in complex with the PL2-6 scFv
    • 複合体: Xenopus nucleosome
    • 複合体: PL2-6 scFv
キーワードChromatin / Nucleosome / Histone / DNA / GENE REGULATION
生物種Xenopus laevis (アフリカツメガエル) / Mus musculus (ハツカネズミ)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.56 Å
データ登録者Ho C-H / Takizawa Y / Kurumizaka H
資金援助 日本, 8件
OrganizationGrant number国
Japan Society for the Promotion of Science (JSPS)JP23H05475 日本
Japan Society for the Promotion of Science (JSPS)JP24H02319 日本
Japan Society for the Promotion of Science (JSPS)JP24H02328 日本
Japan Science and TechnologyJPMJER1901 日本
Japan Science and TechnologyJPMJCR24T3 日本
Japan Agency for Medical Research and Development (AMED)JP25ama121009 日本
Japan Agency for Medical Research and Development (AMED)JP25ama121002 日本
Japan Society for the Promotion of Science (JSPS)JP25K18403 日本
引用ジャーナル: iScience / 年: 2026
タイトル: A method for cryo-EM analysis of eukaryotic nucleosomes reconstituted in bacterial cells.
著者: Cheng-Han Ho / Yuki Kobayashi / Mitsuo Ogasawara / Yoshimasa Takizawa / Hitoshi Kurumizaka /
要旨: Conventional methods for preparing nucleosomes are time-consuming and technically demanding. In the present study, we extended the approach of generating nucleosomes in by the co-expression of all ...Conventional methods for preparing nucleosomes are time-consuming and technically demanding. In the present study, we extended the approach of generating nucleosomes in by the co-expression of all four histones, allowing nucleosomes to be assembled in cells. The bacterially reconstituted nucleosomes can be readily prepared from the cells and directly subjected to cryo-EM single particle analysis. Using this method, we obtained a 2.56 Å nucleosome structure that is highly similar to a previously reported nucleosome crystal structure, validating the use of nucleosomes formed in for cryo-EM analysis. Unexpectedly, we also discovered a non-canonical nucleosome structure, in which two hexasomes are closely packed. This system provides a robust and efficient platform for structural studies of nucleosomes and nucleosome variants, and may facilitate the discovery of chromatin architectures.
履歴
登録2025年8月5日-
ヘッダ(付随情報) 公開2025年12月10日-
マップ公開2025年12月10日-
更新2026年2月4日-
現状2026年2月4日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_65715.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_65715.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Main map
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.06 Å/pix.
x 200 pix.
= 212. Å		1.06 Å/pix.
x 200 pix.
= 212. Å		1.06 Å/pix.
x 200 pix.
= 212. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.06 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.068
最小 - 最大-0.12066996 - 0.27431613
平均 (標準偏差)0.0011272782 (±0.012231818)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ200200200
Spacing200200200
セルA=B=C: 211.99998 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: DeepEMhancer sharpened map

ファイルemd_65715_additional_1.map
注釈DeepEMhancer sharpened map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_65715_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_65715_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Xenopus nucleosome in complex with the PL2-6 scFv

全体名称: Xenopus nucleosome in complex with the PL2-6 scFv
要素
  • 複合体: Xenopus nucleosome in complex with the PL2-6 scFv
    • 複合体: Xenopus nucleosome
    • 複合体: PL2-6 scFv

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超分子 #1: Xenopus nucleosome in complex with the PL2-6 scFv

超分子名称: Xenopus nucleosome in complex with the PL2-6 scFv / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0
由来(天然)生物種: Xenopus laevis (アフリカツメガエル)

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超分子 #2: Xenopus nucleosome

超分子名称: Xenopus nucleosome / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1
由来(天然)生物種: Xenopus laevis (アフリカツメガエル)

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超分子 #3: PL2-6 scFv

超分子名称: PL2-6 scFv / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1
由来(天然)生物種: Mus musculus (ハツカネズミ)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 200
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡TFS KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
平均電子線量: 60.1 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.25 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.25 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.56 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.7.1) / ソフトウェア - 詳細: Non-uniform Refinement / 使用した粒子像数: 1450013
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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