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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6519 | |||||||||
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タイトル | Structure and function of outer dynein intermediate and light chain complex | |||||||||
マップデータ | Streptavidin-labeled IC2M482BCCP axoneme | |||||||||
試料 |
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キーワード | cilia and flagella / axoneme / outer dynein arm / intermediate chain / light chain | |||||||||
生物種 | Chlamydomonas reinhardtii (クラミドモナス) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 47.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Oda T / Abe T / Yanagisawa H / Kikkawa M | |||||||||
引用 | ジャーナル: Mol Biol Cell / 年: 2016 タイトル: Structure and function of outer dynein arm intermediate and light chain complex. 著者: Toshiyuki Oda / Tatsuki Abe / Haruaki Yanagisawa / Masahide Kikkawa / 要旨: The outer dynein arm (ODA) is a molecular complex that drives the beating motion of cilia/flagella. Chlamydomonas ODA is composed of three heavy chains (HCs), two ICs, and 11 light chains (LCs). ...The outer dynein arm (ODA) is a molecular complex that drives the beating motion of cilia/flagella. Chlamydomonas ODA is composed of three heavy chains (HCs), two ICs, and 11 light chains (LCs). Although the three-dimensional (3D) structure of the whole ODA complex has been investigated, the 3D configurations of the ICs and LCs are largely unknown. Here we identified the 3D positions of the two ICs and three LCs using cryo-electron tomography and structural labeling. We found that these ICs and LCs were all localized at the root of the outer-inner dynein (OID) linker, designated the ODA-Beak complex. Of interest, the coiled-coil domain of IC2 extended from the ODA-Beak to the outer surface of ODA. Furthermore, we investigated the molecular mechanisms of how the OID linker transmits signals to the ODA-Beak, by manipulating the interaction within the OID linker using a chemically induced dimerization system. We showed that the cross-linking of the OID linker strongly suppresses flagellar motility in vivo. These results suggest that the ICs and LCs of the ODA form the ODA-Beak, which may be involved in mechanosignaling from the OID linker to the HCs. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_6519.map.gz | 16.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-6519-v30.xml emd-6519.xml | 8.5 KB 8.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 400_6519.gif 80_6519.gif | 52.6 KB 3.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6519 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6519 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_6519_validation.pdf.gz | 77.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_6519_full_validation.pdf.gz | 77 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_6519_validation.xml.gz | 495 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6519 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6519 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6519.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 19 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Streptavidin-labeled IC2M482BCCP axoneme | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 6.07 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Streptavidin-labeled IC2M482BCCP axoneme
全体 | 名称: Streptavidin-labeled IC2M482BCCP axoneme |
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要素 |
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-超分子 #1000: Streptavidin-labeled IC2M482BCCP axoneme
超分子 | 名称: Streptavidin-labeled IC2M482BCCP axoneme / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1 |
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-超分子 #1: axoneme
超分子 | 名称: axoneme / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Chlamydomonas reinhardtii (クラミドモナス) Organelle: flagella |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
濃度 | 0.01 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.2 詳細: 30 mM Hepes-NaOH pH 7.2, 5 mM MgCl2, 1 mM dithiothreitol, 1 mM EGTA, 50 mM K-acetate |
グリッド | 詳細: 300 mesh copper grid, holey carbon |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: LEICA EM GP / 手法: Blot for 5 seconds before plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | OTHER |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: Omega エネルギーフィルター - エネルギー下限: 0.0 eV エネルギーフィルター - エネルギー上限: 20.0 eV |
日付 | 2015年5月7日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F416 (4k x 4k) 平均電子線量: 100 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 9.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 6.0 µm / 倍率(公称値): 25700 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN / Tilt series - Axis1 - Min angle: -60 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 60 ° |
-画像解析
詳細 | Number of tilts (projections) used in 3D reconstruction: 60 Tomographic tilt angle increment: 2 |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 47.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: IMOD, PEET / 使用したサブトモグラム数: 940 |