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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6109 | |||||||||
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| タイトル | A molecular ruler determines the repeat length in eukaryotic cilia and flagella | |||||||||
マップデータ | FAP59-N-BCCP axoneme | |||||||||
試料 |
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キーワード | cryo-electron tomography / cilia and flagella / molecular ruler / FAP59 / FAP172 / CCDC39 / CCDC40 | |||||||||
| 生物種 | ![]() | |||||||||
| 手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 49.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Oda T / Yanagisawa H / Kamiya R / Kikkawa M | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2014タイトル: A molecular ruler determines the repeat length in eukaryotic cilia and flagella. 著者: Toshiyuki Oda / Haruaki Yanagisawa / Ritsu Kamiya / Masahide Kikkawa / ![]() 要旨: Existence of cellular structures with specific size raises a fundamental question in biology: How do cells measure length? One conceptual answer to this question is by a molecular ruler, but examples ...Existence of cellular structures with specific size raises a fundamental question in biology: How do cells measure length? One conceptual answer to this question is by a molecular ruler, but examples of such rulers in eukaryotes are lacking. In this work, we identified a molecular ruler in eukaryotic cilia and flagella. Using cryo-electron tomography, we found that FAP59 and FAP172 form a 96-nanometer (nm)-long complex in Chlamydomonas flagella and that the absence of the complex disrupted 96-nm repeats of axonemes. Furthermore, lengthening of the FAP59/172 complex by domain duplication resulted in extension of the repeats up to 128 nm, as well as duplication of specific axonemal components. Thus, the FAP59/172 complex is the molecular ruler that determines the 96-nm repeat length and arrangements of components in cilia and flagella. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_6109.map.gz | 21.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-6109-v30.xml emd-6109.xml | 8.4 KB 8.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | 400_6109.gif 80_6109.gif | 33.3 KB 2.2 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6109 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6109 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_6109_validation.pdf.gz | 78.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_6109_full_validation.pdf.gz | 77.4 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_6109_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6109 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6109 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-
リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6109.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 24.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | FAP59-N-BCCP axoneme | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 6.07 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : FAP59-N-BCCP axoneme labeled with streptavidin
| 全体 | 名称: FAP59-N-BCCP axoneme labeled with streptavidin |
|---|---|
| 要素 |
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-超分子 #1000: FAP59-N-BCCP axoneme labeled with streptavidin
| 超分子 | 名称: FAP59-N-BCCP axoneme labeled with streptavidin / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1 |
|---|
-超分子 #1: axoneme
| 超分子 | 名称: axoneme / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() Organelle: Flagella |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | サブトモグラム平均法 |
| 試料の集合状態 | cell |
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試料調製
| 濃度 | 0.01 mg/mL |
|---|---|
| 緩衝液 | pH: 7.2 詳細: 30 mM Hepes-NaOH, 5 mM MgCl2, 1 mM DTT, 1 mM EGTA, 50 mM NaCl |
| グリッド | 詳細: 300 mesh copper grid with holey carbon support, glow discharged in the air |
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 98 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: LEICA EM GP / 手法: Blot for 5 seconds before plunging |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | JEOL 3100FFC |
|---|---|
| 特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: Omega エネルギーフィルター - エネルギー下限: 0.0 eV エネルギーフィルター - エネルギー上限: 20.0 eV |
| 日付 | 2014年3月29日 |
| 撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F416 (4k x 4k) 平均電子線量: 100 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 7.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 6.0 µm / 倍率(公称値): 25700 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN / Tilt series - Axis1 - Min angle: -65 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 65 ° |
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画像解析
| 詳細 | Number of tilts (projections) used in 3D reconstruction: 65 Tomographic tilt angle increment: 2 |
|---|---|
| 最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 49.0 Å / 解像度の算出法: OTHER |
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データ登録者
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UCSF Chimera













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