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- EMDB-60833: Paracandidimonas lactea CP group II intron 2S state -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-60833
タイトルParacandidimonas lactea CP group II intron 2S state
マップデータ
試料
  • 複合体: Paracandidimonas lactea CP group II intron 2S state
    • RNA: RNA (153-MER)
    • RNA: RNA (582-MER)
  • リガンド: MAGNESIUM ION
  • リガンド: POTASSIUM ION
キーワードCryoEM / Ribozyme / RNA
生物種Paracandidimonas lactea (バクテリア)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.87 Å
データ登録者Wang L / Xie JH / Zhang C / Zou J / Huang Z / Shang S / Chen X / Yang Y / Liu J / Dong H ...Wang L / Xie JH / Zhang C / Zou J / Huang Z / Shang S / Chen X / Yang Y / Liu J / Dong H / Huang D / Su Z
資金援助 中国, 4件
OrganizationGrant number
Ministry of Science and Technology (MoST, China)2022YFC2303700 中国
National Natural Science Foundation of China (NSFC)32222040 中国
National Natural Science Foundation of China (NSFC)32070049 中国
Ministry of Science and Technology (MoST, China)2021YFA1301900 中国
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / : 2025
タイトル: Structural basis of circularly permuted group II intron self-splicing.
著者: Liu Wang / Jiahao Xie / Chong Zhang / Jian Zou / Zirui Huang / Sitong Shang / Xingyu Chen / Yang Yang / Jianquan Liu / Haohao Dong / Dingming Huang / Zhaoming Su /
要旨: Circularly permuted group II introns (CP introns) consist of rearranged structural domains separated by two tethered exons, generating branched introns and circular exons via back-splicing. ...Circularly permuted group II introns (CP introns) consist of rearranged structural domains separated by two tethered exons, generating branched introns and circular exons via back-splicing. Structural and mechanistic understanding of circular RNA (circRNA) generation by CP introns remains elusive. We resolve cryo-electron microscopy structures of a natural CP intron in different states during back-splicing at a resolution of 2.5-2.9 Å. Domain 6 (D6) undergoes a conformational change of 65° after branching, to facilitate 3'-exon recognition and circularization. Previously unseen tertiary interactions compact the catalytic triad and D6 for splicing without protein, whereas a metal ion, M, is observed to stabilize the 5'-exon during splicing. While these unique features were not observed in canonical group II introns and spliceosomes, they are common in CP introns, as demonstrated by the cryo-EM structure of another CP intron discovered by comparative genomics analysis. Our results elucidate the mechanism of CP intron back-splicing dynamics, with potential applications in circRNA research and therapeutics.
履歴
登録2024年7月17日-
ヘッダ(付随情報) 公開2025年2月12日-
マップ公開2025年2月12日-
更新2025年2月12日-
現状2025年2月12日処理サイト: PDBc / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_60833.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.85 Å/pix.
x 320 pix.
= 272. Å
0.85 Å/pix.
x 320 pix.
= 272. Å
0.85 Å/pix.
x 320 pix.
= 272. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.85 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.025
最小 - 最大-0.49196747 - 0.87265164
平均 (標準偏差)0.00064562605 (±0.013795809)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ320320320
Spacing320320320
セルA=B=C: 272.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_60833_half_map_1.map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_60833_half_map_2.map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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試料の構成要素

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全体 : Paracandidimonas lactea CP group II intron 2S state

全体名称: Paracandidimonas lactea CP group II intron 2S state
要素
  • 複合体: Paracandidimonas lactea CP group II intron 2S state
    • RNA: RNA (153-MER)
    • RNA: RNA (582-MER)
  • リガンド: MAGNESIUM ION
  • リガンド: POTASSIUM ION

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超分子 #1: Paracandidimonas lactea CP group II intron 2S state

超分子名称: Paracandidimonas lactea CP group II intron 2S state / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2
由来(天然)生物種: Paracandidimonas lactea (バクテリア)
分子量理論値: 227 KDa

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分子 #1: RNA (153-MER)

分子名称: RNA (153-MER) / タイプ: rna / ID: 1 / 詳細: Residues 111-140 is missed in this model / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Paracandidimonas lactea (バクテリア)
分子量理論値: 49.428504 KDa
配列文字列:
AGCAGGCGCC ACCUGCUGCG GAACCGCUGA AGCCGCGUGC CUCUAACAGG GCUGGCGCGG CUACGAAGGG CGCUGGGGGU GGGAACCAC CUCCUUCGAC CCAAUCCAUG GCCUGCGCCG CAACGUGCAG GCCAGCAGUC UCCACGACAA GGAG

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分子 #2: RNA (582-MER)

分子名称: RNA (582-MER) / タイプ: rna / ID: 2 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Paracandidimonas lactea (バクテリア)
分子量理論値: 189.407531 KDa
配列文字列: GGGCGACUAC GAAACGGGCC UGGGUAGGAA AUGACCCAGU GACCCUGACA GUUUGGGAAA GUCGGUGAAA GCCCGACCCU CGGGGCCUA GCGAAAGUGG GCGACGAGUG CAACACCUGG AGGCUGAGGG CGUCAGUGAU GGCGUCAGGC AUGCGGGAGA A AUCUAGGC ...文字列:
GGGCGACUAC GAAACGGGCC UGGGUAGGAA AUGACCCAGU GACCCUGACA GUUUGGGAAA GUCGGUGAAA GCCCGACCCU CGGGGCCUA GCGAAAGUGG GCGACGAGUG CAACACCUGG AGGCUGAGGG CGUCAGUGAU GGCGUCAGGC AUGCGGGAGA A AUCUAGGC AUGCUGGCAC CUAUCGAAAG AUGGGGCCGC UGGAUAGCUC AAUCAGGUAA AGGCACCGUU CAGGUGCUGU GU UGAGGCA UAGGAAGGCA GGGCCGCAGU CGCGGUAAGC AAGCAGCGUU GAAGCGCAUC GGCAGUACCG CAUCCGUUAU GGA ACCUUG GGAGCGAGAA ACCCUGGAAA CGGGGGUAGG GUCAGAGACC UAGAUAAAUC CGAUGUGGCC GAGCUGGCUG UCGU UCGAU GCCGUAGUAC UGACUGUCUA AGUAGGGAAG GUCUCGGCAG AUCGUGGGGG UGGCACCCUG CGAAAUUAUC UGCCA AGAC UGGGAGAUGG CUUGAGUAGU GCCGCCGCGC GAGCGGUGGG CAGACCAUGG GGGCAGACUU GCUGGAUGUU CCUAUC GGC GAAAGAGCCA AGCGGUAAC

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分子 #3: MAGNESIUM ION

分子名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 29 / : MG
分子量理論値: 24.305 Da

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分子 #4: POTASSIUM ION

分子名称: POTASSIUM ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 4 / : K
分子量理論値: 39.098 Da

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡TFS KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k)
平均電子線量: 58.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: NONE
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.87 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 33739
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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