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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6080 | |||||||||
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タイトル | Cryo electron tomography of infective bacteriophage T4 | |||||||||
マップデータ | Sub-tomogram averaging of T4 phage infecting host cell | |||||||||
試料 |
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キーワード | Bacteriophage T4 / viral infection / phage-host interaction / infection initiation | |||||||||
生物種 | Enterobacteria phage T4 (ファージ) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 40.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Hu B / Margolin W / Molineux IJ / Liu J | |||||||||
引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2015 タイトル: Structural remodeling of bacteriophage T4 and host membranes during infection initiation. 著者: Bo Hu / William Margolin / Ian J Molineux / Jun Liu / 要旨: The first stages of productive bacteriophage infections of bacterial host cells require efficient adsorption to the cell surface followed by ejection of phage DNA into the host cytoplasm. To achieve ...The first stages of productive bacteriophage infections of bacterial host cells require efficient adsorption to the cell surface followed by ejection of phage DNA into the host cytoplasm. To achieve this goal, a phage virion must undergo significant structural remodeling. For phage T4, the most obvious change is the contraction of its tail. Here, we use skinny E. coli minicells as a host, along with cryo-electron tomography and mutant phage virions, to visualize key structural intermediates during initiation of T4 infection. We show for the first time that most long tail fibers are folded back against the tail sheath until irreversible adsorption, a feature compatible with the virion randomly walking across the cell surface to find an optimal site for infection. Our data confirm that tail contraction is triggered by structural changes in the baseplate, as intermediates were found with remodeled baseplates and extended tails. After contraction, the tail tube penetrates the host cell periplasm, pausing while it degrades the peptidoglycan layer. Penetration into the host cytoplasm is accompanied by a dramatic local outward curvature of the cytoplasmic membrane as it fuses with the phage tail tip. The baseplate hub protein gp27 and/or the ejected tape measure protein gp29 likely form the transmembrane channel for viral DNA passage into the cell cytoplasm. Building on the wealth of prior biochemical and structural information, this work provides new molecular insights into the mechanistic pathway of T4 phage infection. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_6080.map.gz | 21.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-6080-v30.xml emd-6080.xml | 8.3 KB 8.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 400_6080.gif 80_6080.gif | 29 KB 3.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6080 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6080 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_6080_validation.pdf.gz | 77.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_6080_full_validation.pdf.gz | 76.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_6080_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6080 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6080 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6080.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 22.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Sub-tomogram averaging of T4 phage infecting host cell | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 7.8 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Wild type T4 phage
全体 | 名称: Wild type T4 phage |
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要素 |
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-超分子 #1000: Wild type T4 phage
超分子 | 名称: Wild type T4 phage / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1 |
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-超分子 #1: Enterobacteria phage T4
超分子 | 名称: Enterobacteria phage T4 / タイプ: virus / ID: 1 / NCBI-ID: 10665 / 生物種: Enterobacteria phage T4 / データベース: NCBI / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: SPECIES / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No |
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宿主 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 別称: BACTERIA(EUBACTERIA) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.6 / 詳細: 10 mM Tris, 10 mM MgCl2, 0.1 M NaCl |
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グリッド | 詳細: 200 mesh grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 80 % / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 手法: Blot for 3 seconds before plunging. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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詳細 | Weak beam illumination |
日付 | 2013年3月1日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F415 (4k x 4k) 平均電子線量: 100 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 6.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 倍率(公称値): 23000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN / Tilt series - Axis1 - Min angle: -64 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 64 ° |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | The particles were manually selected from cryo-tomograms. |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 40.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: IMOD, Protomo, i3, EMAN / 使用したサブトモグラム数: 1985 |