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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Escherichia coli polynucleotide phosphorylase in complex with recognition site of RNase E | |||||||||
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![]() | polynucleotide phosphorylase / ribonuclease E / RNA degradosome / RNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() regulation of RNA helicase activity / rRNA 5'-end processing / ribonuclease E / ribonuclease E activity / bacterial degradosome / polyribonucleotide nucleotidyltransferase / polyribonucleotide nucleotidyltransferase activity / endoribonuclease complex / DEAD/H-box RNA helicase binding / 7S RNA binding ...regulation of RNA helicase activity / rRNA 5'-end processing / ribonuclease E / ribonuclease E activity / bacterial degradosome / polyribonucleotide nucleotidyltransferase / polyribonucleotide nucleotidyltransferase activity / endoribonuclease complex / DEAD/H-box RNA helicase binding / 7S RNA binding / cyclic-di-GMP binding / RNA catabolic process / tRNA processing / mRNA catabolic process / protein complex oligomerization / RNA nuclease activity / RNA processing / RNA endonuclease activity / cytoplasmic side of plasma membrane / rRNA processing / response to heat / 3'-5'-RNA exonuclease activity / molecular adaptor activity / protein homotetramerization / tRNA binding / rRNA binding / magnesium ion binding / RNA binding / zinc ion binding / identical protein binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.52 Å | |||||||||
![]() | Paris G / Luisi BF | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Escherichia coli polynucleotide phosphorylase in complex with recognition site of RNase E 著者: Paris G / Luisi BF | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 89.3 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 18.8 KB 18.8 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 11.9 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 66.2 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 6.6 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 165.3 MB 165.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 9qh0MC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.73 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: One of the two half-maps
ファイル | emd_53151_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | One of the two half-maps | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Second of the two half-maps
ファイル | emd_53151_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Second of the two half-maps | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Polynucleotide phosphorylase in complex with recognition site fro...
全体 | 名称: Polynucleotide phosphorylase in complex with recognition site from ribonuclease E |
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要素 |
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-超分子 #1: Polynucleotide phosphorylase in complex with recognition site fro...
超分子 | 名称: Polynucleotide phosphorylase in complex with recognition site from ribonuclease E タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2 詳細: Complex prepared by co-expression and chromatographic purification |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
-分子 #1: Polyribonucleotide nucleotidyltransferase
分子 | 名称: Polyribonucleotide nucleotidyltransferase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 詳細: catalytic core without S1 and KH RNA binding domains コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO / EC番号: polyribonucleotide nucleotidyltransferase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 59.656828 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MLNPIVRKFQ YGQHTVTLET GMMARQATAA VMVSMDDTAV FVTVVGQKKA KPGQDFFPLT VNYQERTYAA GRIPGSFFRR EGRPSEGET LIARLIDRPI RPLFPEGFVN EVQVIATVVS VNPQVNPDIV AMIGASAALS LSGIPFNGPI GAARVGYIND Q YVLNPTQD ...文字列: MLNPIVRKFQ YGQHTVTLET GMMARQATAA VMVSMDDTAV FVTVVGQKKA KPGQDFFPLT VNYQERTYAA GRIPGSFFRR EGRPSEGET LIARLIDRPI RPLFPEGFVN EVQVIATVVS VNPQVNPDIV AMIGASAALS LSGIPFNGPI GAARVGYIND Q YVLNPTQD ELKESKLDLV VAGTEAAVLM VESEAQLLSE DQMLGAVVFG HEQQQVVIQN INELVKEAGK PRWDWQPEPV NE ALNARVA ALAEARLSDA YRITDKQERY AQVDVIKSET IATLLAEDET LDENELGEIL HAIEKNVVRS RVLAGEPRID GRE KDMIRG LDVRTGVLPR THGSALFTRG ETQALVTATL GTARDAQVLD ELMGERTDTF LFHYNFPPYS VGETGMVGSP KRRE IGHGR LAKRGVLAVM PDMDKFPYTV RVVSEITESN GSSSMASVCG ASLALMDAGV PIKAAVAGIA MGLVKEGDNY VVLSD ILGD EDHLGDMDFK VAGSRDGISA LQMDIKIEGI TKEIMQVALN QAKGARLHIL GVMEQAINAP RGDIS UniProtKB: Polyribonucleotide nucleotidyltransferase |
-分子 #2: Ribonuclease E
分子 | 名称: Ribonuclease E / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 詳細: segment of ribonuclease E that interacts with polynucleotide phosphorylase コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ribonuclease E |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 6.14772 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: NHATAPMTRA PAPEYVPEAP RHSDWQRPTF AFEGKGAAGG HTATHHASAA PARPQPVE UniProtKB: Ribonuclease E |
-分子 #3: water
分子 | 名称: water / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 7 / 式: HOH |
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分子量 | 理論値: 18.015 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-HOH: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 3.6 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 詳細: 20 mM Tris-HCl pH 8.0, 25 mM MgCl2, 150 mM KCl, 1 mM TCEP |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277.2 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blotting force -4, 3 sec blot time. |
詳細 | Purified PNPase core and RNE-muGFP-CHis proteins were mixed in 1:2 ratio and their complex were separated on the Superdex 200 Increase 10/300 GL column (Cytiva) equilibrated with Cryo-EM buffer (20 mM Tris-HCl pH 8.0, 25 mM MgCl2, 150 mM KCl, 1 mM TCEP). Peak fractions were combined, the protein was concentrated to 15 microM using Amicon Ultra concentrator with 10 kDa cut-off (Millipore) and used to prepare Cryo-EM grids. The samples were mixed with CHAPSO (3-([3-cholamidopropyl]dimethylammonio)-2-hydroxy-1-propanesulfonate) at a final concentration of 8 mM |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: TFS Selectris |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 6112 / 平均露光時間: 4.39 sec. / 平均電子線量: 51.05 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | Chain - Source name: AlphaFold / Chain - Initial model type: in silico model |
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詳細 | phenix refine and manual rebuilding using COOT |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL |
得られたモデル | ![]() PDB-9qh0: |