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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Mouse QTRT1/2 in complex with mouse tRNA-Tyr | |||||||||
![]() | Map combined from 2 independent halves. Not post-processed. | |||||||||
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![]() | queuosine / tRNA / QTRT1/2 / tRNA modification / RNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() tRNA-guanosine34 queuine transglycosylase / tRNA-guanine transglycosylase complex / cytoplasmic side of mitochondrial outer membrane / tRNA-guanosine(34) queuine transglycosylase activity / : / tRNA binding / protein heterodimerization activity / protein homodimerization activity / protein-containing complex / mitochondrion ...tRNA-guanosine34 queuine transglycosylase / tRNA-guanine transglycosylase complex / cytoplasmic side of mitochondrial outer membrane / tRNA-guanosine(34) queuine transglycosylase activity / : / tRNA binding / protein heterodimerization activity / protein homodimerization activity / protein-containing complex / mitochondrion / zinc ion binding / metal ion binding / nucleus / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | |||||||||
![]() | Kaczmarczyk I / Koziej L / Glatt S | |||||||||
資金援助 | European Union, 1件
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![]() | ![]() タイトル: Queuosine is incorporated into precursor tRNA before splicing. 著者: Wei Guo / Igor Kaczmarczyk / Kevin Kopietz / Florian Flegler / Stefano Russo / Ege Cigirgan / Andrzej Chramiec-Głąbik / Łukasz Koziej / Cansu Cirzi / Jirka Peschek / Klaus Reuter / Mark ...著者: Wei Guo / Igor Kaczmarczyk / Kevin Kopietz / Florian Flegler / Stefano Russo / Ege Cigirgan / Andrzej Chramiec-Głąbik / Łukasz Koziej / Cansu Cirzi / Jirka Peschek / Klaus Reuter / Mark Helm / Sebastian Glatt / Francesca Tuorto / ![]() ![]() ![]() 要旨: Each newly transcribed tRNA molecule must undergo processing and receive modifications to become functional. Queuosine (Q) is a tRNA modification present at position 34 of four tRNAs with "GUN" ...Each newly transcribed tRNA molecule must undergo processing and receive modifications to become functional. Queuosine (Q) is a tRNA modification present at position 34 of four tRNAs with "GUN" anticodons. Among these, the precursor of tRNA carries an intronic sequence within the anticodon loop that is removed by an essential non-canonical splicing event. The functional and temporal coupling between tRNA-splicing and Q-incorporation remains elusive. Here, we demonstrate in vitro and in vivo that intron-containing precursors of tRNA are modified with Q or with the Q-derivative galactosyl-queuosine (galQ) before being spliced. We show that this order of events is conserved in mouse, human, flies and worms. Using single particle cryo-EM, we confirm that pre-tRNA is a bona fide substrate of the QTRT1/2 complex, which catalyzes the incorporation of Q into the tRNA. Our results elucidate the hierarchical interplay that coordinates Q-incorporation and splicing in eukaryotic tRNAs, providing a relevant but unappreciated aspect of the cellular tRNA maturation process. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 95.7 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 27.4 KB 27.4 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 11.2 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 59.5 KB | ||
マスクデータ | ![]() | 103 MB | ![]() | |
Filedesc metadata | ![]() | 7.7 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() | 52.3 MB 80.7 MB 80.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 807.3 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 806.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 17.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 22.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 9hn7MC ![]() 9hn9C C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Map combined from 2 independent halves. Not post-processed. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.84 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | ![]() | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Combined half maps post-processed using sharpening B factor 104.
ファイル | emd_52308_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Combined half maps post-processed using sharpening B factor 104. | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_52308_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_52308_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Mouse QTRT1/2 in complex with mouse tRNA-Tyr
全体 | 名称: Mouse QTRT1/2 in complex with mouse tRNA-Tyr |
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要素 |
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-超分子 #1: Mouse QTRT1/2 in complex with mouse tRNA-Tyr
超分子 | 名称: Mouse QTRT1/2 in complex with mouse tRNA-Tyr / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#3 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 120 KDa |
-分子 #1: Queuine tRNA-ribosyltransferase catalytic subunit 1
分子 | 名称: Queuine tRNA-ribosyltransferase catalytic subunit 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: tRNA-guanosine34 preQ1 transglycosylase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 43.42898 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: GPESAPRIMR LVAECSRSGA RAGELRLPHG TVATPVFMPV GTQATMKGIT TEQLDSLGCR ICLGNTYHLG LRPGPELIRK AQGLHGFMN WPHNLLTDSG GFQMVSLFSL SEVTEEGVHF RSPYDGEETL LSPERSVEIQ NALGSDIIMQ LDHVVSSTVT G PLVEEAMH ...文字列: GPESAPRIMR LVAECSRSGA RAGELRLPHG TVATPVFMPV GTQATMKGIT TEQLDSLGCR ICLGNTYHLG LRPGPELIRK AQGLHGFMN WPHNLLTDSG GFQMVSLFSL SEVTEEGVHF RSPYDGEETL LSPERSVEIQ NALGSDIIMQ LDHVVSSTVT G PLVEEAMH RSVRWLDRCI AAHKHPDKQN LFAIIQGGLN ADLRTTCLKE MTKRDVPGFA IGGLSGGESK AQFWKMVALS TS MLPKDKP RYLMGVGYAT DLVVCVALGC DMFDCVYPTR TARFGSALVP TGNLQLKKKQ YAKDFSPINP ECPCPTCQTH SRA FLHALL HSDNTTALHH LTVHNIAYQL QLLSAVRSSI LEQRFPDFVR NFMRTMYGDH SLCPAWAVEA LASVGIMLT UniProtKB: Queuine tRNA-ribosyltransferase catalytic subunit 1 |
-分子 #2: Queuine tRNA-ribosyltransferase accessory subunit 2
分子 | 名称: Queuine tRNA-ribosyltransferase accessory subunit 2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 46.367172 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: GPKLSLIKVV NGCRLGKIQN LGKAGDCTVD IPGCLLYTRT GSAPHLTHQT LRNIHGVPGI AQLTLSSLAE HHEVLAEYKK GVGSFIGMP ESLFYCSLHD PVTPGPAGYV TSKSVSVWGF GGRVEMTVSK FMAIQEALQP DWFQCLSDGE ASCAETTSIK R ARKSVDRS ...文字列: GPKLSLIKVV NGCRLGKIQN LGKAGDCTVD IPGCLLYTRT GSAPHLTHQT LRNIHGVPGI AQLTLSSLAE HHEVLAEYKK GVGSFIGMP ESLFYCSLHD PVTPGPAGYV TSKSVSVWGF GGRVEMTVSK FMAIQEALQP DWFQCLSDGE ASCAETTSIK R ARKSVDRS LLFLDSCLRL QEESEVLQKS VIIGVIEGGD VMEERLRSAR ETAKRPVGGF LLDGFQGDPA VTETRLHLLS SV TAELPED KPRLICGVSR PDEVLECIER GVDLFESFFP YQVTERGCAL TFTFDCQLNP EETLLQQNGI QEKIKGLDQA KKI EATGCN QEMTSFEINL KEKKYQEDFD PLVRGCSCYC CKNHTRAYIH HLLMTNELLA GVLLMMHNFE HYFGFFCSIR EALK NDTLA QLKELICRQM F UniProtKB: Queuine tRNA-ribosyltransferase accessory subunit 2 |
-分子 #3: mouse tRNA-Tyr
分子 | 名称: mouse tRNA-Tyr / タイプ: rna / ID: 3 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 25.201941 KDa |
配列 | 文字列: GGCCUUCGAU AGCUCAGUUG GUAGAGCGGA GGACUGUAGA UCCUUAGGUC GCUGGUUCGA AUCCGGCUCG AAGGACCA |
-分子 #4: 9-DEAZAGUANINE
分子 | 名称: 9-DEAZAGUANINE / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 1 / 式: 9DG |
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分子量 | 理論値: 150.138 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-9DG: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.2 mg/mL | |||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 5760 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 7112 / 平均露光時間: 1.82 sec. / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 倍率(補正後): 105000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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詳細 | Isolde | ||||||||||||
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT | ||||||||||||
得られたモデル | ![]() PDB-9hn7: |