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基本情報
| 登録情報 | ![]() | |||||||||
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| タイトル | Small circular RNA dimer - Class 4 | |||||||||
マップデータ | Unsharpened map | |||||||||
試料 |
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キーワード | small RNA circles / dimer / RNA crossover / RNA | |||||||||
| 生物種 | synthetic construct (人工物) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 9.3 Å | |||||||||
データ登録者 | McRae EK / Kristoffersen EL / Holliger P / Andersen ES | |||||||||
| 資金援助 | デンマーク, 1件
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引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2025タイトル: Roles of dimeric intermediates in RNA-catalyzed rolling circle synthesis. 著者: Emil L Kristoffersen / Ewan K S McRae / Niels R Sørensen / Philipp Holliger / Ebbe S Andersen / ![]() 要旨: The RNA world hypothesis is supported by the discovery of RNA polymerase ribozymes that can perform RNA-catalyzed RNA replication processes on different RNA templates. Recently, RNA-catalyzed rolling ...The RNA world hypothesis is supported by the discovery of RNA polymerase ribozymes that can perform RNA-catalyzed RNA replication processes on different RNA templates. Recently, RNA-catalyzed rolling circle synthesis (RCS) on small circular RNA (scRNA) templates has been demonstrated. However, the structural and dynamic properties of scRNA replication and its products and intermediates have not been explored. Here, we have used cryogenic electron microscopy (cryo-EM) to characterize products and intermediates relevant for RCS replication. We find that these form an unexpectedly diverse group of RNA nanostructures. The main structural motif observed is a fully hybridized dimeric complex composed of two scRNAs and their complement strands resolved to 5.3 Å. Cryo-EM also reveals higher-order dimer filaments and dimer assembly intermediates, suggesting an assembly mechanism for the observed complexes. We show that the dimer complexes are stable and inhibit RNA-catalyzed RCS but can be reactivated by addition of more scRNA templates. We propose dimer formation as a general property of RCS replication and speculate that dimers might have benefited a primordial RNA genetic system by providing a stable ''storage'' form for RNA replication products and by coordinated RNA replication on both scRNA template strands. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_51932.map.gz | 32.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-51932-v30.xml emd-51932.xml | 18.7 KB 18.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_51932_fsc.xml | 8.5 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_51932.png | 23.5 KB | ||
| マスクデータ | emd_51932_msk_1.map | 64 MB | マスクマップ | |
| Filedesc metadata | emd-51932.cif.gz | 5.4 KB | ||
| その他 | emd_51932_half_map_1.map.gz emd_51932_half_map_2.map.gz | 59.5 MB 59.5 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-51932 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-51932 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_51932_validation.pdf.gz | 688.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_51932_full_validation.pdf.gz | 687.9 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_51932_validation.xml.gz | 16 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_51932_validation.cif.gz | 21.1 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-51932 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-51932 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-
リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_51932.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | Unsharpened map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.59 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
| ファイル | emd_51932_msk_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
| ファイル | emd_51932_half_map_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
| ファイル | emd_51932_half_map_2.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Dimer intermediate class 2 composed of 2 circular RNA and 2 compl...
| 全体 | 名称: Dimer intermediate class 2 composed of 2 circular RNA and 2 complimentary RNA |
|---|---|
| 要素 |
|
-超分子 #1: Dimer intermediate class 2 composed of 2 circular RNA and 2 compl...
| 超分子 | 名称: Dimer intermediate class 2 composed of 2 circular RNA and 2 complimentary RNA タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / 詳細: Dimer prepared by annealing |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
-分子 #1: Complementary strand
| 分子 | 名称: Complementary strand / タイプ: rna / ID: 1 / コピー数: 4 |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
| 分子量 | 理論値: 11.817235 KDa |
| 配列 | 文字列: UGGAAGAAAU CGAAGAAGAU GAAGAACGCG AAGAAC |
-分子 #2: Circular RNA
| 分子 | 名称: Circular RNA / タイプ: rna / ID: 2 / 詳細: Circular RNA / コピー数: 4 |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
| 分子量 | 理論値: 11.191466 KDa |
| 配列 | 文字列: AUCUUCUUCG AUUUCUUCCA GUUCUUCGCG UUCUUC |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
| 緩衝液 | pH: 7.5 |
|---|---|
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: LEICA EM GP |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | TFS KRIOS |
|---|---|
| 特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 6820 / 平均露光時間: 1.5 sec. / 平均電子線量: 60.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.8 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 130000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
| 精密化 | 空間: REAL / プロトコル: OTHER / 温度因子: 231 |
|---|---|
| 得られたモデル | ![]() PDB-9h86: |
ムービー
コントローラー
万見について




キーワード
データ登録者
デンマーク, 1件
引用










Z (Sec.)
Y (Row.)
X (Col.)












































FIELD EMISSION GUN

