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- EMDB-51930: BAM-hinge (LVPR) -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-51930
タイトルBAM-hinge (LVPR)
マップデータE. coli BAM with LVPR insertion in POTRA-barrel domain linker region.
試料
  • 複合体: BAM (beta-barrel assembly machinery) complex with BamA LVPR insertion
    • タンパク質・ペプチド: Outer membrane protein assembly factor BamA
    • タンパク質・ペプチド: Outer membrane protein assembly factor BamB
    • タンパク質・ペプチド: Outer membrane protein assembly factor BamC
    • タンパク質・ペプチド: Outer membrane protein assembly factor BamD
    • タンパク質・ペプチド: Outer membrane protein assembly factor BamE
キーワードOuter membrane / folding / OMP / MEMBRANE PROTEIN
機能・相同性
機能・相同性情報


Bam protein complex / Gram-negative-bacterium-type cell outer membrane assembly / protein insertion into membrane / cell outer membrane / protein-macromolecule adaptor activity / cell adhesion / cell surface / identical protein binding / membrane
類似検索 - 分子機能
Outer membrane protein assembly factor BamB / Outer membrane protein assembly factor BamC / NlpB/DapX lipoprotein / Outer membrane protein assembly factor BamC, C-terminal / NlpB/DapX lipoprotein / Outer membrane protein assembly factor BamB / Outer membrane protein assembly factor BamE / Lipoprotein SmpA/OmlA / Outer membrane protein assembly factor BamE domain / Outer membrane protein assembly factor BamD ...Outer membrane protein assembly factor BamB / Outer membrane protein assembly factor BamC / NlpB/DapX lipoprotein / Outer membrane protein assembly factor BamC, C-terminal / NlpB/DapX lipoprotein / Outer membrane protein assembly factor BamB / Outer membrane protein assembly factor BamE / Lipoprotein SmpA/OmlA / Outer membrane protein assembly factor BamE domain / Outer membrane protein assembly factor BamD / Outer membrane lipoprotein BamD-like / Outer membrane lipoprotein / BamE-like / Pyrrolo-quinoline quinone repeat / Outer membrane protein assembly factor BamA / POTRA domain, BamA/TamA-like / Surface antigen variable number repeat / Surface antigen D15-like / Pyrrolo-quinoline quinone beta-propeller repeat / beta-propeller repeat / POTRA domain / POTRA domain profile. / Bacterial surface antigen (D15) / Omp85 superfamily domain / Quinoprotein alcohol dehydrogenase-like superfamily / Prokaryotic membrane lipoprotein lipid attachment site profile. / Tetratricopeptide-like helical domain superfamily / WD40/YVTN repeat-like-containing domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
Outer membrane protein assembly factor BamC / Outer membrane protein assembly factor BamE / Outer membrane protein assembly factor BamA / Outer membrane protein assembly factor BamD / Outer membrane protein assembly factor BamB
類似検索 - 構成要素
生物種Escherichia coli (大腸菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.3 Å
データ登録者Machin JM / Ranson NA
資金援助 英国, 2件
OrganizationGrant number国
Wellcome Trust222373/Z/21/Z 英国
Medical Research Council (MRC, United Kingdom)MR/Y012453/1 英国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2025
タイトル: Molecular insights into how the motions of the β-barrel and POTRA domains of BamA are coupled for efficient function.
著者: Naemi Csoma / Jonathan M Machin / James M Whitehouse / Raquel Rodrìguez-Alonso / Monika Olejnik / Adam K Cahill / Seung-Hyun Cho / Till F Schäberle / Bogdan I Iorga / Neil A Ranson / Sheena ...著者: Naemi Csoma / Jonathan M Machin / James M Whitehouse / Raquel Rodrìguez-Alonso / Monika Olejnik / Adam K Cahill / Seung-Hyun Cho / Till F Schäberle / Bogdan I Iorga / Neil A Ranson / Sheena E Radford / Antonio N Calabrese / Jean-François Collet /
要旨: The β-barrel assembly machinery (BAM) inserts β-barrel proteins into the outer membrane of Gram-negative bacteria, forming an essential permeability barrier. The core BAM component, BamA, is a β- ...The β-barrel assembly machinery (BAM) inserts β-barrel proteins into the outer membrane of Gram-negative bacteria, forming an essential permeability barrier. The core BAM component, BamA, is a β-barrel protein with an N-terminal periplasmic extension comprising five polypeptide transport-associated (POTRA) domains. Whilst BamA's structure is well characterised, it remains unclear how β-barrel and POTRA domain motions are coordinated. Using BamA variants with mutations in the hinge region between these two domains, we demonstrate that hinge flexibility is required for BAM function. Cryo-electron microscopy suggests that hinge rigidity impairs function by structurally decoupling these domains. A screen for spontaneous suppressors identified a mutation at position T434 in an extracellular loop of BamA, which has been previously shown to suppress BAM defects. Studying this variant provides insights into its function as a general rescue mechanism. Our findings underscore how BamA's sequence has been evolutionarily optimised for efficient function.
履歴
登録2024年10月28日-
ヘッダ(付随情報) 公開2025年10月22日-
マップ公開2025年10月22日-
更新2025年10月22日-
現状2025年10月22日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_51930.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_51930.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈E. coli BAM with LVPR insertion in POTRA-barrel domain linker region.
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.86 Å/pix.
x 320 pix.
= 275.2 Å		0.86 Å/pix.
x 320 pix.
= 275.2 Å		0.86 Å/pix.
x 320 pix.
= 275.2 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.86 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.008
最小 - 最大-0.014709088 - 0.024121856
平均 (標準偏差)0.000099758385 (±0.00078384276)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ320320320
Spacing320320320
セルA=B=C: 275.2 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: Half map 1 for E. coli BAM with...

ファイルemd_51930_half_map_1.map
注釈Half map 1 for E. coli BAM with LVPR insertion in POTRA/barrel domain linker region.
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Half map 2 for E. coli BAM with...

ファイルemd_51930_half_map_2.map
注釈Half map 2 for E. coli BAM with LVPR insertion in POTRA/barrel domain linker region.
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : BAM (beta-barrel assembly machinery) complex with BamA LVPR insertion

全体名称: BAM (beta-barrel assembly machinery) complex with BamA LVPR insertion
要素
  • 複合体: BAM (beta-barrel assembly machinery) complex with BamA LVPR insertion
    • タンパク質・ペプチド: Outer membrane protein assembly factor BamA
    • タンパク質・ペプチド: Outer membrane protein assembly factor BamB
    • タンパク質・ペプチド: Outer membrane protein assembly factor BamC
    • タンパク質・ペプチド: Outer membrane protein assembly factor BamD
    • タンパク質・ペプチド: Outer membrane protein assembly factor BamE

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超分子 #1: BAM (beta-barrel assembly machinery) complex with BamA LVPR insertion

超分子名称: BAM (beta-barrel assembly machinery) complex with BamA LVPR insertion
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / 詳細: Purified as a complex with the insertion
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)

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分子 #1: Outer membrane protein assembly factor BamA

分子名称: Outer membrane protein assembly factor BamA / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1
詳細: Insertion of LVPR linker in the hinge region (before G410)
コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 81.203562 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列: PTIASITFSG NKSVKDDMLK QNLEASGVRV GESLDRTTIA DIEKGLEDFY YSVGKYSASV KAVVTPLPRN RVDLKLVFQE GVSAEIQQI NIVGNHAFTT DELISHFQLR DEVPWWNVVG DRKYQKQKLA GDLETLRSYY LDRGYARFNI DSTQVSLTPD K KGIYVTVN ...文字列:
PTIASITFSG NKSVKDDMLK QNLEASGVRV GESLDRTTIA DIEKGLEDFY YSVGKYSASV KAVVTPLPRN RVDLKLVFQE GVSAEIQQI NIVGNHAFTT DELISHFQLR DEVPWWNVVG DRKYQKQKLA GDLETLRSYY LDRGYARFNI DSTQVSLTPD K KGIYVTVN ITEGDQYKLS GVEVSGNLAG HSAEIEQLTK IEPGELYNGT KVTKMEDDIK KLLGRYGYAY PRVQSMPEIN DA DKTVKLR VNVDAGNRFY VRKIRFEGND TSKDAVLRRE MRQMEGAWLG SDLVDQGKER LNRLGFFETV DTDTQRVPGS PDQ VDVVYK VKERNTLVPR GSFNFGIGYG TESGVSFQAG VQQDNWLGTG YAVGINGTKN DYQTYAELSV TNPYFTVDGV SLGG RLFYN DFQADDADLS DYTNKSYGTD VTLGFPINEY NSLRAGLGYV HNSLSNMQPQ VAMWRYLYSM GEHPSTSDQD NSFKT DDFT FNYGWTYNKL DRGYFPTDGS RVNLTGKVTI PGSDNEYYKV TLDTATYVPI DDDHKWVVLG RTRWGYGDGL GGKEMP FYE NFYAGGSSTV RGFQSNTIGP KAVYFPHQAS NYDPDYDYEC ATQDGAKDLC KSDDAVGGNA MAVASLEFIT PTPFISD KY ANSVRTSFFW DMGTVWDTNW DSSQYSGYPD YSDPSNIRMS AGIALQWMSP LGPLVFSYAQ PFKKYDGDKA EQFQFNIG K TW

UniProtKB: Outer membrane protein assembly factor BamA

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分子 #2: Outer membrane protein assembly factor BamB

分子名称: Outer membrane protein assembly factor BamB / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 39.692156 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列: LFNSEEDVVK MSPLPTVENQ FTPTTAWSTS VGSGIGNFYS NLHPALADNV VYAADRAGLV KALNADDGKE IWSVSLAEKD GWFSKEPAL LSGGVTVSGG HVYIGSEKAQ VYALNTSDGT VAWQTKVAGE ALSRPVVSDG LVLIHTSNGQ LQALNEADGA V KWTVNLDM ...文字列:
LFNSEEDVVK MSPLPTVENQ FTPTTAWSTS VGSGIGNFYS NLHPALADNV VYAADRAGLV KALNADDGKE IWSVSLAEKD GWFSKEPAL LSGGVTVSGG HVYIGSEKAQ VYALNTSDGT VAWQTKVAGE ALSRPVVSDG LVLIHTSNGQ LQALNEADGA V KWTVNLDM PSLSLRGESA PTTAFGAAVV GGDNGRVSAV LMEQGQMIWQ QRISQATGST EIDRLSDVDT TPVVVNGVVF AL AYNGNLT ALDLRSGQIM WKRELGSVND FIVDGNRIYL VDQNDRVMAL TIDGGVTLWT QSDLLHRLLT SPVLYNGNLV VGD SEGYLH WINVEDGRFV AQQKVDSSGF QTEPVAADGK LLIQAKDGTV YSITR

UniProtKB: Outer membrane protein assembly factor BamB

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分子 #3: Outer membrane protein assembly factor BamC

分子名称: Outer membrane protein assembly factor BamC / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 6.884758 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列:
CSSDSRYKRQ VSGDEAYLEA APLAELHAPA GMILPVTSGD YAIPVTNGSG AVGKALDIRP PAQPLAL

UniProtKB: Outer membrane protein assembly factor BamC

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分子 #4: Outer membrane protein assembly factor BamD

分子名称: Outer membrane protein assembly factor BamD / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 25.008967 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列: EVPDNPPNEI YATAQQKLQD GNWRQAITQL EALDNRYPFG PYSQQVQLDL IYAYYKNADL PLAQAAIDRF IRLNPTHPNI DYVMYMRGL TNMALDDSAL QGFFGVDRSD RDPQHARAAF SDFSKLVRGY PNSQYTTDAT KRLVFLKDRL AKYEYSVAEY Y TERGAWVA ...文字列:
EVPDNPPNEI YATAQQKLQD GNWRQAITQL EALDNRYPFG PYSQQVQLDL IYAYYKNADL PLAQAAIDRF IRLNPTHPNI DYVMYMRGL TNMALDDSAL QGFFGVDRSD RDPQHARAAF SDFSKLVRGY PNSQYTTDAT KRLVFLKDRL AKYEYSVAEY Y TERGAWVA VVNRVEGMLR DYPDTQATRD ALPLMENAYR QMQMNAQAEK VAKIIAANSS

UniProtKB: Outer membrane protein assembly factor BamD

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分子 #5: Outer membrane protein assembly factor BamE

分子名称: Outer membrane protein assembly factor BamE / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 10.100229 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列:
LERVVYRPDI NQGNYLTAND VSKIRVGMTQ QQVAYALGTP LMSDPFGTNT WFYVFRQQPG HEGVTQQTLT LTFNSSGVLT NIDNKPALS GN

UniProtKB: Outer membrane protein assembly factor BamE

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度3.3 mg/mL
緩衝液pH: 8
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 20 sec. / 詳細: 60 mA
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡TFS KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k)
平均電子線量: 35.7 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 3.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.9 µm
試料ステージホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
初期モデルモデルのタイプ: NONE / 詳細: Generated ab initio in in RELION
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 127056
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 4.0)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 4.0)
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

詳細Fitting was done in ISOLDE and the models manually adjusted in coot, coupled with phenix real-space refine minimisation.
得られたモデル

PDB-9h84:
BAM-hinge (LVPR)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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