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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Human adult muscle nAChR in resting state in detergent with alpha-bungarotoxin | |||||||||
![]() | CryoSPARC map used for final model refinement, sharpened with a b-factor of -20 | |||||||||
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![]() | Ligand-gated ion channel / nicotinic receptor / pLGIC / cys-loop receptor / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() postsynaptic membrane organization / skeletal muscle tissue growth / musculoskeletal movement / Highly sodium permeable postsynaptic acetylcholine nicotinic receptors / Highly calcium permeable nicotinic acetylcholine receptors / Highly calcium permeable postsynaptic nicotinic acetylcholine receptors / acetylcholine receptor activity / acetylcholine-gated channel complex / neuromuscular synaptic transmission / acetylcholine receptor inhibitor activity ...postsynaptic membrane organization / skeletal muscle tissue growth / musculoskeletal movement / Highly sodium permeable postsynaptic acetylcholine nicotinic receptors / Highly calcium permeable nicotinic acetylcholine receptors / Highly calcium permeable postsynaptic nicotinic acetylcholine receptors / acetylcholine receptor activity / acetylcholine-gated channel complex / neuromuscular synaptic transmission / acetylcholine receptor inhibitor activity / behavioral response to nicotine / acetylcholine-gated monoatomic cation-selective channel activity / muscle cell development / ion channel regulator activity / acetylcholine binding / nervous system process / synaptic transmission, cholinergic / monoatomic cation transmembrane transporter activity / acetylcholine receptor signaling pathway / muscle cell cellular homeostasis / postsynaptic specialization membrane / ligand-gated monoatomic ion channel activity / neuromuscular process / neuromuscular junction development / monoatomic cation transport / membrane depolarization / skeletal muscle contraction / neuronal action potential / muscle contraction / bioluminescence / regulation of membrane potential / transmitter-gated monoatomic ion channel activity involved in regulation of postsynaptic membrane potential / generation of precursor metabolites and energy / response to nicotine / neuromuscular junction / neuron cellular homeostasis / transmembrane signaling receptor activity / channel activity / toxin activity / monoatomic ion transmembrane transport / chemical synaptic transmission / postsynaptic membrane / neuron projection / synapse / cell surface / signal transduction / extracellular region / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.96 Å | |||||||||
![]() | Li A / Pike ACW / Chi G / Webster R / Maxwell S / Liu W / Beeson D / Sauer DB / Dong YY | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structures of the human adult muscle-type nicotinic receptor in resting and desensitized states. 著者: Anna Li / Ashley C W Pike / Richard Webster / Susan Maxwell / Wei-Wei Liu / Gamma Chi / Jacqueline Palace / David Beeson / David B Sauer / Yin Yao Dong / ![]() 要旨: Muscle-type nicotinic acetylcholine receptor (AChR) is the key signaling molecule in neuromuscular junctions. Here, we present the structures of full-length human adult receptors in complex with ...Muscle-type nicotinic acetylcholine receptor (AChR) is the key signaling molecule in neuromuscular junctions. Here, we present the structures of full-length human adult receptors in complex with Fab35 in α-bungarotoxin (αBuTx)-bound resting states and ACh-bound desensitized states. In addition to identifying the conformational changes during recovery from desensitization, we also used electrophysiology to probe the effects of eight previously unstudied AChR genetic variants found in patients with congenital myasthenic syndrome (CMS), revealing they cause either slow- or fast-channel CMS characterized by prolonged or abbreviated ion channel bursts. The combined kinetic and structural data offer a better understanding of both the AChR state transition and the pathogenic mechanisms of disease variants. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 158.4 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 33.3 KB 33.3 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 14.3 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 125.8 KB | ||
マスクデータ | ![]() ![]() | 307.5 MB 307.5 MB | ![]() | |
Filedesc metadata | ![]() | 9.7 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() | 154.3 MB 285.5 MB 285.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | CryoSPARC map used for final model refinement, sharpened with a b-factor of -20 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.932 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | ![]() | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-マスク #2
ファイル | ![]() | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: unsharpened map from cryoSPARC non-uniform refinement
ファイル | emd_51568_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | unsharpened map from cryoSPARC non-uniform refinement | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map B from cryoSPARC non-uniform refinement
ファイル | emd_51568_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half map B from cryoSPARC non-uniform refinement | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map A from cryoSPARC non-uniform refinement
ファイル | emd_51568_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half map A from cryoSPARC non-uniform refinement | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Human adult muscle nAChR in resting state in detergent with alpha...
全体 | 名称: Human adult muscle nAChR in resting state in detergent with alpha-bungarotoxin |
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要素 |
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-超分子 #1: Human adult muscle nAChR in resting state in detergent with alpha...
超分子 | 名称: Human adult muscle nAChR in resting state in detergent with alpha-bungarotoxin タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#7 / 詳細: nAChR in complex with alpha-bungarotoxin and Fab35 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 402 KDa |
-分子 #1: Acetylcholine receptor subunit alpha
分子 | 名称: Acetylcholine receptor subunit alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 49.747645 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: SEHETRLVAK LFKDYSSVVR PVEDHRQVVE VTVGLQLIQL INVDEVNQIV TTNVRLKQQW VDYNLKWNPD DYGGVKKIHI PSEKIWRPD LVLYNNADGD FAIVKFTKVL LQYTGHITWT PPAIFKSYCE IIVTHFPFDE QNCSMKLGTW TYDGSVVAIN P ESDQPDLS ...文字列: SEHETRLVAK LFKDYSSVVR PVEDHRQVVE VTVGLQLIQL INVDEVNQIV TTNVRLKQQW VDYNLKWNPD DYGGVKKIHI PSEKIWRPD LVLYNNADGD FAIVKFTKVL LQYTGHITWT PPAIFKSYCE IIVTHFPFDE QNCSMKLGTW TYDGSVVAIN P ESDQPDLS NFMESGEWVI KESRGWKHSV TYSCCPDTPY LDITYHFVMQ RLPLYFIVNV IIPCLLFSFL TGLVFYLPTD SG EKMTLSI SVLLSLTVFL LVIVELIPST SSAVPLIGKY MLFTMVFVIA SIIITVIVIN THHRSPSTHV MPNWVRKVFI DTI PNIMFF STMKRPSREK QDKKIFTEDI DISDISGKPG PPPMGFHSPL IKHPEVKSAI EGIKYIAETM KSDQESNNAA AEWK YVAMV MDHILLGVFM LVCIIGTLAV FAGRLIELNQ QG UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit alpha |
-分子 #2: Acetylcholine receptor subunit beta
分子 | 名称: Acetylcholine receptor subunit beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 54.596477 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: SEAEGRLREK LFSGYDSSVR PAREVGDRVR VSVGLILAQL ISLNEKDEEM STKVYLDLEW TDYRLSWDPA EHDGIDSLRI TAESVWLPD VVLLNNNDGN FDVALDISVV VSSDGSVRWQ PPGIYRSSCS IQVTYFPFDW QNCTMVFSSY SYDSSEVSLQ T GLGPDGQG ...文字列: SEAEGRLREK LFSGYDSSVR PAREVGDRVR VSVGLILAQL ISLNEKDEEM STKVYLDLEW TDYRLSWDPA EHDGIDSLRI TAESVWLPD VVLLNNNDGN FDVALDISVV VSSDGSVRWQ PPGIYRSSCS IQVTYFPFDW QNCTMVFSSY SYDSSEVSLQ T GLGPDGQG HQEIHIHEGT FIENGQWEII HKPSRLIQPP GDPRGGREGQ RQEVIFYLII RRKPLFYLVN VIAPCILITL LA IFVFYLP PDAGEKMGLS IFALLTLTVF LLLLADKVPE TSLSVPIIIK YLMFTMVLVT FSVILSVVVL NLHHRSPHTH QMP LWVRQI FIHKLPLYLR LKRPKPERDL MPEPPHCSSP GSGWGRGTDE YFIRKPPSDF LFPKPNRFQP ELSAPDLRRF IDGP NRAVA LLPELREVVS SISYIARQLQ EQEDHDALKE DWQFVAMVVD RLFLWTFIIF TSVGTLVIFL DATYHLPPPD PFP UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit beta |
-分子 #3: Fab35 light chain
分子 | 名称: Fab35 light chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 23.392982 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: DIVITQSPSL LSASVGDRVT LTCKGSQNID NYLAWYQQKL GEAPKLLIYK TNSLQTGIPS RFSGSGSGTD YTLTISSLHS EDLATYYCY QYINGYTFGT GTKLELKRAD AAPTVSIFPP STEQLATGGA SVVCLMNNFY PRDISVKWKI DGTERRDGVL D SVTDQDSK ...文字列: DIVITQSPSL LSASVGDRVT LTCKGSQNID NYLAWYQQKL GEAPKLLIYK TNSLQTGIPS RFSGSGSGTD YTLTISSLHS EDLATYYCY QYINGYTFGT GTKLELKRAD AAPTVSIFPP STEQLATGGA SVVCLMNNFY PRDISVKWKI DGTERRDGVL D SVTDQDSK DSTYSMSSTL SLTKADYESH NLYTCEVVHK TSSSPVVKSF NRNEC |
-分子 #4: Acetylcholine receptor subunit delta
分子 | 名称: Acetylcholine receptor subunit delta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 56.915359 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: LNEEERLIRH LFQEKGYNKE LRPVAHKEES VDVALALTLS NLISLKEVEE TLTTNVWIEH GWTDNRLKWN AEEFGNISVL RLPPDMVWL PEIVLENNND GSFQISYSCN VLVYHYGFVY WLPPAIFRSS CPISVTYFPF DWQNCSLKFS SLKYTAKEIT L SLKQDAKE ...文字列: LNEEERLIRH LFQEKGYNKE LRPVAHKEES VDVALALTLS NLISLKEVEE TLTTNVWIEH GWTDNRLKWN AEEFGNISVL RLPPDMVWL PEIVLENNND GSFQISYSCN VLVYHYGFVY WLPPAIFRSS CPISVTYFPF DWQNCSLKFS SLKYTAKEIT L SLKQDAKE NRTYPVEWII IDPEGFTENG EWEIVHRPAR VNVDPRAPLD SPSRQDITFY LIIRRKPLFY IINILVPCVL IS FMVNLVF YLPADSGEKT SVAISVLLAQ SVFLLLISKR LPATSMAIPL IGKFLLFGMV LVTMVVVICV IVLNIHFRTP STH VLSEGV KKLFLETLPE LLHMSRPAED GPSPGALVRR SSSLGYISKA EEYFLLKSRS DLMFEKQSER HGLARRLTTA RRPP ASSEQ AQQELFNELK PAVDGANFIV NHMRDQNNYN EEKDSWNRVA RTVDRLCLFV VTPVMVVGTA WIFLQGVYNQ PPPQP FPGD PYSYNVQDKR FI UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit delta |
-分子 #5: Acetylcholine receptor subunit epsilon,Green fluorescent protein
分子 | 名称: Acetylcholine receptor subunit epsilon,Green fluorescent protein タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 80.60375 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: KNEELRLYHH LFNNYDPGSR PVREPEDTVT ISLKVTLTNL ISLNEKEETL TTSVWIGIDW QDYRLNYSKD DFGGIETLRV PSELVWLPE IVLENNIDGQ FGVAYDANVL VYEGGSVTWL PPAIYRSVCA VEVTYFPFDW QNCSLIFRSQ TYNAEEVEFT F AVDNDGKT ...文字列: KNEELRLYHH LFNNYDPGSR PVREPEDTVT ISLKVTLTNL ISLNEKEETL TTSVWIGIDW QDYRLNYSKD DFGGIETLRV PSELVWLPE IVLENNIDGQ FGVAYDANVL VYEGGSVTWL PPAIYRSVCA VEVTYFPFDW QNCSLIFRSQ TYNAEEVEFT F AVDNDGKT INKIDIDTEA YTENGEWAID FCPGVIRRHH GGATDGPGET DVIYSLIIRR KPLFYVINII VPCVLISGLV LL AYFLPAQ AGGQKCTVSI NVLLAQTVFL FLIAQKIPET SLSVPLLGRF LIFVMVVATL IVMNCVIVLN VSQRTPTTHA MSP RLRHVL LELLPRLLGS PPPPEAPRAP PVATMVSKGE ELFTGVVPIL VELDGDVNGH KFSVSGEGEG DATYGKLTLK FICT TGKLP VPWPTLVTTL TYGVQCFSRY PDHMKQHDFF KSAMPEGYVQ ERTIFFKDDG NYKTRAEVKF EGDTLVNRIE LKGID FKED GNILGHKLEY NYNSHNVYIM ADKQKNGIKV NFKIRHNIED GSVQLADHYQ QNTPIGDGPV LLPDNHYLST QSALSK DPN EKRDHMVLLE FVTAAGITLG MDELYKAPRA ASPPRRASSV GLLLRAEELI LKKPRSELVF EGQRHRQGTW TAAFCQS LG AAAPEVRCCV DAVNFVAEST RDQEATGEEV SDWVRMGNAL DNICFWAALV LFSVGSSLIF LGAYFNRVPD LPYAPCIQ P UniProtKB: Acetylcholine receptor subunit epsilon, Green fluorescent protein, Acetylcholine receptor subunit epsilon |
-分子 #6: Fab35 heavy chain
分子 | 名称: Fab35 heavy chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 23.879758 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: EVQLQESGPG LVQPSETLSL TCTVSGFSLT SYSVSWLRQP SGKGPEWMGR MWDDGGTVYN SGLKSRLSIS RDTSKNQVFL KMNSLQTDD TGTYYCTRDE RIRAINWFAY WGQGTLVTVS SAETTAPSVY PLAPGTALKS NSMVTLGCLV KGYFPEPVTV T WNSGALSS ...文字列: EVQLQESGPG LVQPSETLSL TCTVSGFSLT SYSVSWLRQP SGKGPEWMGR MWDDGGTVYN SGLKSRLSIS RDTSKNQVFL KMNSLQTDD TGTYYCTRDE RIRAINWFAY WGQGTLVTVS SAETTAPSVY PLAPGTALKS NSMVTLGCLV KGYFPEPVTV T WNSGALSS GVHTFPAVLQ SGLYTLTSSV TVPSSTWPSQ TVTCNVAHPG QQHQRWTRKL C |
-分子 #7: Alpha-bungarotoxin
分子 | 名称: Alpha-bungarotoxin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 7 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 8.005281 KDa |
配列 | 文字列: IVCHTTATSP ISAVTCPPGE NLCYRKMWCD AFCSSRGKVV ELGCAATCPS KKPYEEVTCC STDKCNPHPK QRPG UniProtKB: Alpha-bungarotoxin |
-分子 #13: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
分子 | 名称: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / タイプ: ligand / ID: 13 / コピー数: 1 / 式: NAG |
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分子量 | 理論値: 221.208 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-NAG: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 1.68 mg/mL | |||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: 20 mM HEPES pH 7.5, 150 mM NaCl, 0.013% DDM, 0.0013% CHS | |||||||||||||||
グリッド | モデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GOLD / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.35 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blot time 2s, blot force -10. | |||||||||||||||
詳細 | This sample was monodisperse |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: TFS Selectris X / エネルギーフィルター - スリット幅: 10 eV |
詳細 | objective aperture 70 um |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: TFS FALCON 4i (4k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 18672 / 平均露光時間: 4.71 sec. / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.4 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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詳細 | Initial fitting of alphafold models using chimeraX followed by manual rebuilding in COOT and final refinement in ISOLDE and PHENIX | ||||||||||
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT | ||||||||||
得られたモデル | ![]() PDB-9gu0: |