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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | N-VelcroVax HBcAg in complex with SUMO-gp1 (T=4 VLP) | |||||||||
![]() | Map filtered according to local resolution. | |||||||||
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![]() | velcrovax / hepatitis b virus / hepatitis b core antigen / affimer / vaccine / recombinant / vlp / antigen display / virus like particle | |||||||||
生物種 | synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | |||||||||
![]() | Fatema K / Snowden JS / Watson A / Sherry L / Ranson NA / Stonehouse NJ / Rowlands DJ | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: A VLP vaccine platform comprising the core protein of hepatitis B virus with N-terminal antigen capture. 著者: Kaniz Fatema / Joseph S Snowden / Alexander Watson / Lee Sherry / Neil A Ranson / Nicola J Stonehouse / David J Rowlands / ![]() 要旨: Nanoparticle presentation systems offer the potential to develop new vaccines rapidly in response to emerging diseases, a public health need that has become increasingly evident in the wake of the ...Nanoparticle presentation systems offer the potential to develop new vaccines rapidly in response to emerging diseases, a public health need that has become increasingly evident in the wake of the COVID-19 pandemic. Previously, we reported a nanoparticle scaffold system termed VelcroVax. This was constructed by insertion of a high affinity SUMO binding protein (Affimer), able to recognise a SUMO peptide tag, into the major immunodominant region of VLPs assembled from a tandem (fused dimer) form of hepatitis B virus (HBV) core protein (HBc). Here we describe an alternative form, termed N-VelcroVax, a VLP vaccine platform assembled from a monomeric HBc protein (N-anti-SUMO Affimer HBc 190) with the Affimer inserted at the N-terminus. In contrast to the tandem form of VelcroVax, N-VelcroVax VLPs were expressed well in E. coli. The VLPs effectively bound SUMO-tagged Junín virus glycoprotein, gp1 as assessed by structural and serological analyses. Cryo-EM characterisation of N-VelcroVax complexed with a SUMO-Junín gp1 showed continuous density attributable to the fused Affimer, in addition to evidence of target antigen capture. Collectively, these data suggest that N-VelcroVax has potential as a versatile next generation vaccine scaffold. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 298.4 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 38.6 KB 38.6 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 181.8 KB | ||
マスクデータ | ![]() ![]() | 536.4 MB 536.4 MB | ![]() | |
Filedesc metadata | ![]() | 5.3 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() | 426.1 MB 486.4 MB 264.9 MB 120.1 MB 496.4 MB 424.7 MB 424.7 MB 297.4 MB 263.2 MB 103.8 MB 426.7 MB 426.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 165.2 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 164.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 573 B | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 484 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Map filtered according to local resolution. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.065 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
+マスク #1
+マスク #2
+追加マップ: Unsharpened map from symmetrised 3D refinement.
+追加マップ: Sharpened map (without mask applied) derived from asymmetric...
+追加マップ: Local resolution values for colouring map by local resolution.
+追加マップ: Sharpened map (with mask applied).
+追加マップ: Sharpened map (without mask applied).
+追加マップ: Half map 1 from asymmetric reconstruction of subparticles...
+追加マップ: Half map 2 from asymmetric reconstruction of subparticles...
+追加マップ: Local resolution-filtered map derived from from asymmetric reconstruction...
+追加マップ: Local resolution values for local resolution-based colouring of...
+追加マップ: Sharpened map (with mask applied) derived from asymmetric...
+ハーフマップ: Half map 1.
+ハーフマップ: Half map 2.
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試料の構成要素
-全体 : T=4 virus-like particle of N-VelcroVax HBcAg in complex with SUMO...
全体 | 名称: T=4 virus-like particle of N-VelcroVax HBcAg in complex with SUMO-tagged gp1 from JUNV |
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要素 |
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-超分子 #1: T=4 virus-like particle of N-VelcroVax HBcAg in complex with SUMO...
超分子 | 名称: T=4 virus-like particle of N-VelcroVax HBcAg in complex with SUMO-tagged gp1 from JUNV タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 平均電子線量: 54.7 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.9 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: INSILICO MODEL |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 57537 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |