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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | ELIC5 with propylamine facing ECD outwards in liposomes with 2:1:1 POPC:POPE:POPG | |||||||||
![]() | ELIC5 with Propylamine facing ECD outwards in Liposomes with 2:1:1 POPC:POPE:POPG | |||||||||
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![]() | ELIC / ion channel / pLGIC / Structural Protein / Membrane Protein / TRANSPORT PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() extracellular ligand-gated monoatomic ion channel activity / transmembrane signaling receptor activity / identical protein binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.8 Å | |||||||||
![]() | Dalal V / Cheng WWL | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cryo-EM structures of a pentameric ligand-gated ion channel in liposomes. 著者: Vikram Dalal / Brandon K Tan / Hanrui Xu / Wayland W L Cheng / ![]() 要旨: Detergents and lipid nanodiscs affect the cryo-EM structures of pentameric ligand-gated ion channels (pLGICs) including ELIC. To determine the structure of a pLGIC in a membrane environment that ...Detergents and lipid nanodiscs affect the cryo-EM structures of pentameric ligand-gated ion channels (pLGICs) including ELIC. To determine the structure of a pLGIC in a membrane environment that supports ion channel function, we performed single particle cryo-EM of ELIC in liposomes. ELIC activation and desensitization were confirmed in liposomes with a stopped-flow thallium flux assay. Using WT ELIC and a non-desensitizing mutant (ELIC5), we captured resting, activated and desensitized structures at high resolution. In the desensitized structure, the ion conduction pore has a constriction at the 9' leucine of the pore-lining M2 helix, indicating that 9' is the desensitization gate in ELIC. The agonist-bound structures of ELIC in liposomes are distinct from those in nanodiscs. In general, the transmembrane domain is more loosely packed in liposomes compared to nanodiscs. It has been suggested that large nanodiscs are superior for supporting membrane protein function. However, ELIC localizes to the rim of large circularized nanodiscs, and structures of ELIC in large nanodiscs deviate from the liposome structures more than those in small nanodiscs. Using liposomes for cryo-EM structure determination of a pLGIC increases our confidence that the structures are snapshots of functional states. #1: ![]() タイトル: Cryo-EM structures of a pentameric ligand-gated ion channel in liposomes 著者: Dalal V / Tan BK / Xu H / Cheng WW | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 59.8 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 20.3 KB 20.3 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 8.4 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 61.1 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 6.1 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() | 31.3 MB 59.3 MB 59.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 868 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 867.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 16.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 21.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 9ngcMC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | ELIC5 with Propylamine facing ECD outwards in Liposomes with 2:1:1 POPC:POPE:POPG | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.868 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: ELIC5 with Propylamine facing ECD outwards in Liposomes...
ファイル | emd_49382_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | ELIC5 with Propylamine facing ECD outwards in Liposomes with 2:1:1 POPC:POPE:POPG | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: ELIC5 with Propylamine facing ECD outwards in Liposomes...
ファイル | emd_49382_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | ELIC5 with Propylamine facing ECD outwards in Liposomes with 2:1:1 POPC:POPE:POPG | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: ELIC5 with Propylamine facing ECD outwards in Liposomes...
ファイル | emd_49382_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | ELIC5 with Propylamine facing ECD outwards in Liposomes with 2:1:1 POPC:POPE:POPG | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : ELIC5 with propylamine facing ECD outwards in liposomes with 2:1:...
全体 | 名称: ELIC5 with propylamine facing ECD outwards in liposomes with 2:1:1 POPC:POPE:POPG |
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要素 |
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-超分子 #1: ELIC5 with propylamine facing ECD outwards in liposomes with 2:1:...
超分子 | 名称: ELIC5 with propylamine facing ECD outwards in liposomes with 2:1:1 POPC:POPE:POPG タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
-分子 #1: Erwinia chrysanthemi ligand-gated ion channel
分子 | 名称: Erwinia chrysanthemi ligand-gated ion channel / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 5 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 37.011055 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: APADNAADAR PVDVSVSIFI NKIYGVNTLE QTYKVDGYIV AQWTGKPRKT PGDKPLIVEN TQIERWINNG LWVPALEFIN VVGSPDTGN KRLMLFPDGR VIYNARFLGS FSNDMDFRLF PFDRQQFVLE LEPFSYNNQQ LRFSDIQVYT ENIDNEEIDE W WIRGKAST ...文字列: APADNAADAR PVDVSVSIFI NKIYGVNTLE QTYKVDGYIV AQWTGKPRKT PGDKPLIVEN TQIERWINNG LWVPALEFIN VVGSPDTGN KRLMLFPDGR VIYNARFLGS FSNDMDFRLF PFDRQQFVLE LEPFSYNNQQ LRFSDIQVYT ENIDNEEIDE W WIRGKAST HISDIRYDHL SSVQPNQNEF SRITVRIDAV RNPSYYLWSF ILPLGLIIAA SWSVFWLESF SERLQTSFTL ML TVVAYAF YTSNILGRLP YTTYIDQMII AGYGSIFAAI LLIIFAHHRQ ANGVEDDLLI QRSRLAFPLG FLAIGCVLVI RFF TL UniProtKB: Gamma-aminobutyric-acid receptor subunit beta-1 |
-分子 #2: 3-AMINOPROPANE
分子 | 名称: 3-AMINOPROPANE / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 5 / 式: 3CN |
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分子量 | 理論値: 59.11 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-3CN: |
-分子 #3: SODIUM ION
分子 | 名称: SODIUM ION / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 2 |
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分子量 | 理論値: 22.99 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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特殊光学系 | 球面収差補正装置: Cs Corrected System |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 平均電子線量: 56.9 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 倍率(補正後): 75000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.4 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 75000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL |
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得られたモデル | ![]() PDB-9ngc: |