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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-4601 | |||||||||
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タイトル | In situ defocus subtomogram average of phycobilisome array from Synechocystis sp. PCC 6803 | |||||||||
マップデータ | In situ defocus subtomogram average of phycobilisome array from Synechocystis sp. PCC 6803 | |||||||||
試料 |
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生物種 | Synechocystis sp. PCC 6803 (バクテリア) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 23.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Rast A / Wan W / Pfeffer S / Engel BD | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Plants / 年: 2019 タイトル: Biogenic regions of cyanobacterial thylakoids form contact sites with the plasma membrane. 著者: Anna Rast / Miroslava Schaffer / Sahradha Albert / William Wan / Stefan Pfeffer / Florian Beck / Jürgen M Plitzko / Jörg Nickelsen / Benjamin D Engel / 要旨: Little is known about how the photosynthetic machinery is arranged in time and space during the biogenesis of thylakoid membranes. Using in situ cryo-electron tomography to image the three- ...Little is known about how the photosynthetic machinery is arranged in time and space during the biogenesis of thylakoid membranes. Using in situ cryo-electron tomography to image the three-dimensional architecture of the cyanobacterium Synechocystis, we observed that the tips of multiple thylakoids merge to form a substructure called the 'convergence membrane'. This high-curvature membrane comes into close contact with the plasma membrane at discrete sites. We generated subtomogram averages of 70S ribosomes and array-forming phycobilisomes, then mapped these structures onto the native membrane architecture as markers for protein synthesis and photosynthesis, respectively. This molecular localization identified two distinct biogenic regions in the thylakoid network: thylakoids facing the cytosolic interior of the cell that were associated with both marker complexes, and convergence membranes that were decorated by ribosomes but not phycobilisomes. We propose that the convergence membranes perform a specialized biogenic function, coupling the synthesis of thylakoid proteins with the integration of cofactors from the plasma membrane and the periplasmic space. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_4601.map.gz | 58 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-4601-v30.xml emd-4601.xml | 11 KB 11 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_4601.png | 256.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4601 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4601 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_4601_validation.pdf.gz | 251.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_4601_full_validation.pdf.gz | 250.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_4601_validation.xml.gz | 6.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4601 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4601 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_4601.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | In situ defocus subtomogram average of phycobilisome array from Synechocystis sp. PCC 6803 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 3.42 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : In situ defocus subtomogram average of phycobilisome array from S...
全体 | 名称: In situ defocus subtomogram average of phycobilisome array from Synechocystis |
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要素 |
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-超分子 #1: In situ defocus subtomogram average of phycobilisome array from S...
超分子 | 名称: In situ defocus subtomogram average of phycobilisome array from Synechocystis タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: Each unit of the array has a molecular weight of ~6 MDa. |
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由来(天然) | 生物種: Synechocystis sp. PCC 6803 (バクテリア) / 細胞中の位置: Cytosol |
分子量 | 理論値: 30 MDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 297 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: Blotting time: 10 sec Blot force: 10. |
詳細 | Vitrious Synechocystis cell milled with a Ga2+ focused ion beam. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - サイズ - 横: 3838 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3710 pixel / 平均露光時間: 1.5 sec. / 平均電子線量: 1.5 e/Å2 詳細: Images were collected in movie-mode at 12 frames per second. Higher tilts had longer exposures. |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 0.006 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.004 µm / 倍率(公称値): 42000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C2 (2回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 23.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 詳細: Averaging was performed with STOPGAP 0.3.1 / 使用したサブトモグラム数: 1710 |
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抽出 | トモグラム数: 20 / 使用した粒子像数: 3850 / ソフトウェア - 名称: PyTom (ver. 0.97) 詳細: Template matching followed by oversampling of splines along arrays. Duplicate points were removed following the alignment process. |
CTF補正 | ソフトウェア - 名称: IMOD (ver. 4.9) |
最終 角度割当 | タイプ: OTHER / 詳細: Template matching with PyTom |