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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the Rail RNA motif | |||||||||
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![]() | non-coding RNA / cryo-EM / structural biology / RNA | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.02 Å | |||||||||
![]() | Rudolfs B / Haack DB / Toor N | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Scaffold-enabled high-resolution cryo-EM structure determination of RNA. 著者: Daniel B Haack / Boris Rudolfs / Shouhong Jin / Kevin M Weeks / Navtej Toor / ![]() 要旨: Cryo-EM structure determination of protein-free RNAs has remained difficult with most attempts yielding low to moderate resolution and lacking nucleotide-level detail. These difficulties are ...Cryo-EM structure determination of protein-free RNAs has remained difficult with most attempts yielding low to moderate resolution and lacking nucleotide-level detail. These difficulties are compounded for small RNAs as cryo-EM is inherently more difficult for lower molecular weight macromolecules. Here we present a strategy for fusing small RNAs to a group II intron that yields high resolution structures of the appended RNA, which we demonstrate with the 86-nucleotide thiamine pyrophosphate (TPP) riboswitch, and visualizing the riboswitch ligand binding pocket at 2.5 Å resolution. We also determined the structure of the ligand-free apo state and observe that the aptamer domain of the riboswitch undergoes a large-scale conformational change upon ligand binding, illustrating how small molecule binding to an RNA can induce large effects on gene expression. This study both sets a new standard for cryo-EM riboswitch visualization and offers a versatile strategy applicable to a broad range of small to moderate-sized RNAs, which were previously intractable for high-resolution cryo-EM studies. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 108.1 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 17.8 KB 17.8 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 45.3 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 5.2 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() | 203.8 MB 200.2 MB 200.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 733.7 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 733.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 15.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 18.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.848 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: Sharpened Map
ファイル | emd_45988_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Sharpened Map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_45988_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_45988_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Bacterial RaiA RNA motif
全体 | 名称: Bacterial RaiA RNA motif |
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要素 |
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-超分子 #1: Bacterial RaiA RNA motif
超分子 | 名称: Bacterial RaiA RNA motif / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
-分子 #1: RNA (200-MER)
分子 | 名称: RNA (200-MER) / タイプ: rna / ID: 1 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 192.022938 KDa |
配列 | 文字列: GUGUGCCCGG CAUGGGUGCA GUCUAUAGGG UGAGAGUCCC GAACUGUGAA GGCAGAAGUA ACAGUUAGCC UAACGCAAGG GUGUCCGUG GCGACAUGGA AUCUGAAGGA AGCGGACGGC AAACCUUCGG UCUGAGGAAC ACGAACUUCA UAUGAGGCUA G GUAUCAAU ...文字列: GUGUGCCCGG CAUGGGUGCA GUCUAUAGGG UGAGAGUCCC GAACUGUGAA GGCAGAAGUA ACAGUUAGCC UAACGCAAGG GUGUCCGUG GCGACAUGGA AUCUGAAGGA AGCGGACGGC AAACCUUCGG UCUGAGGAAC ACGAACUUCA UAUGAGGCUA G GUAUCAAU GGAUGAGUUU GCAUAACAAA ACAAAGUCCU UUCUGCCAAA GUUGGUACAG AGUAAAUGAA GCAGAUUGAU GA AGGGAAA GACUGCAUUC UUACCCGGGG AGGUCUGAGC UUUCGAGCUC AGAAGUCAGC AGAAGUCAUA GUACCCUUAA GUU AGGUUU GUGGUUGAAA GUCGAUGCCA GUCGCAGGCA AAACGAUCCA CGUAAGUUAA ACAAAGUUUU AAUGAGCAUG GUGC GGCUU AGAAGUAAGU CCUGCCGCUU UAGGCGAGAG UAUUAGUAGU GAGAGGGUAA UUCCGGGUAG CGAAACUUCC AGCAG GCGA GUGUGGGGUC AAAGACCAGG UCAACUAACU UAAGGGGAAG GACGGAACAA GUAUGGCGUU CGCGCCAUGC UUGAAC CAC CGUAUACCGA ACGGUACGUA CGGUGGUGU |
-分子 #2: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 22 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 6.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |