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万見
- EMDB-44196: RhAAV4282 Empty Capsid -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-44196
タイトルRhAAV4282 Empty Capsid
マップデータMain Map
試料
  • ウイルス: Adeno-associated virus (アデノ随伴ウイルス)
    • タンパク質・ペプチド: Capsid protein VP1
キーワードAAV / Adeno-Associated Virus / Empty Capsid / VIRAL PROTEIN
機能・相同性Phospholipase A2-like domain / Phospholipase A2-like domain / Parvovirus coat protein VP2 / Parvovirus coat protein VP1/VP2 / Parvovirus coat protein VP1/VP2 / Capsid/spike protein, ssDNA virus / T=1 icosahedral viral capsid / structural molecule activity / Capsid protein VP1
機能・相同性情報
生物種Adeno-associated virus (アデノ随伴ウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.57 Å
データ登録者Dagotto G / Jenni S / Li Z / Barouch DH
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/Office of the DirectorOD011170 米国
引用ジャーナル: Mol Ther Methods Clin Dev / 年: 2024
タイトル: Identification of a novel neutralization epitope in rhesus AAVs.
著者: Gabriel Dagotto / Jana L Fisher / David Li / Zhenyu Li / Simon Jenni / Zongli Li / Lawrence J Tartaglia / Peter Abbink / Dan H Barouch /
要旨: Adeno-associated viruses (AAVs) are popular gene therapy delivery vectors, but their application can be limited by anti-vector immunity. Both preexisting neutralizing antibodies (NAbs) and post- ...Adeno-associated viruses (AAVs) are popular gene therapy delivery vectors, but their application can be limited by anti-vector immunity. Both preexisting neutralizing antibodies (NAbs) and post-administration NAbs can limit transgene expression and reduce the clinical utility of AAVs. The development of novel AAVs will advance our understanding of AAV immunity and may also have practical applications. In this study, we identified five novel AAV capsids from rhesus macaques. RhAAV4282 exhibited 91.4% capsid sequence similarity with AAV7 and showed similar tissue tropism with slightly diminished overall signal. Despite this sequence homology, RhAAV4282 and AAV7 showed limited cross-neutralization. We determined a cryo-EM structure of the RhAAV4282 capsid at 2.57 Å resolution and identified a small segment within the hypervariable region IV, involving seven amino acids that formed a shortened external loop in RhAAV4282 compared with AAV7. We generated RhAAV4282 and AAV7 mutants that involved swaps of this region and showed that this region partially determined neutralization phenotype. We termed this region the hypervariable region IV neutralizing epitope (HRNE). Our data suggests that modification of the HRNE can lead to AAVs with altered neutralization profiles.
履歴
登録2024年3月22日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年11月13日-
マップ公開2024年11月13日-
更新2024年11月13日-
現状2024年11月13日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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添付画像

emd_44196.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_44196.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Main Map
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.23 Å/pix.
x 384 pix.
= 472.32 Å		1.23 Å/pix.
x 384 pix.
= 472.32 Å		1.23 Å/pix.
x 384 pix.
= 472.32 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.23 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベルBy EMDB: 0.035
最小 - 最大-0.12095609 - 0.17507449
平均 (標準偏差)0.00083415664 (±0.011120617)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ384384384
Spacing384384384
セルA=B=C: 472.32 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: Unmodified map

ファイルemd_44196_additional_1.map
注釈Unmodified map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Half Map 2

ファイルemd_44196_half_map_1.map
注釈Half Map 2
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Half Map 1

ファイルemd_44196_half_map_2.map
注釈Half Map 1
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Adeno-associated virus

全体名称: Adeno-associated virus (アデノ随伴ウイルス)
要素
  • ウイルス: Adeno-associated virus (アデノ随伴ウイルス)
    • タンパク質・ペプチド: Capsid protein VP1

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超分子 #1: Adeno-associated virus

超分子名称: Adeno-associated virus / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
詳細: Recombinant viral particles were grown using standard triple transfection method.
NCBI-ID: 272636 / 生物種: Adeno-associated virus / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes
宿主生物種: Macaca mulatta (アカゲザル)

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分子 #1: Capsid protein VP1

分子名称: Capsid protein VP1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Adeno-associated virus (アデノ随伴ウイルス)
分子量理論値: 58.137156 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: DGVGNASGNW HCDSTWLGDR VITTSTRTWA LPTYNNHLYK QISSQSGATN DNHFFGYSTP WGYFDFNRFH CHFSPRDWQR LINNNWGFR PRKLRFKLFN IQVKEVTTND GVTTIANNLT STIQVFSDSE YQLPYVLGSA HQGCLPPFPA DVFMIPQYGY L TLNNGSQS ...文字列:
DGVGNASGNW HCDSTWLGDR VITTSTRTWA LPTYNNHLYK QISSQSGATN DNHFFGYSTP WGYFDFNRFH CHFSPRDWQR LINNNWGFR PRKLRFKLFN IQVKEVTTND GVTTIANNLT STIQVFSDSE YQLPYVLGSA HQGCLPPFPA DVFMIPQYGY L TLNNGSQS VGRSSFYCLE YFPSQMLRTG NNFEFSYTFE EVPFHSSYAH SQSLDRLMNP LIDQYLYYLA RTQSTTGSTR EL QFHQAGP NTMAEQSKNW LPGPCYRQQR LSKNIDSNNN SNFAWTGATK YHLNGRNSLT NPGVAMATNK DDEDQFFPIN GVL VFGKTG AANKTTLENV LMTSEEEIKT TNPVATEEYG VVSSNLQSST AGPQTQTVNS QGALPGMVWQ NRDVYLQGPI WAKI PHTDG NFHPSPLMGG FGLKHPPPQI LIKNTPVPAN PPEVFTPAKF ASFITQYSTG QVSVEIEWEL QKENSKRWNP EIQYT SNYA KSNNVEFAVN NEGVYTEPRP IGTRYLTRNL

UniProtKB: Capsid protein VP1

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI POLARA 300
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
平均電子線量: 52.5 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.2 µm
実験機器
モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: NONE
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.57 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 35328
初期 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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