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- EMDB-43554: In vitro reconstituted human chromatin -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-43554
タイトルIn vitro reconstituted human chromatin
マップデータTomogram of in vitro reconsituted chromatin
試料
  • 複合体: In vitro reconstituted chromatin from human histones with a 3631 bp DNA sequence derived from the human ATOH1 gene
    • 複合体: Histone Octamer
キーワードChromatin structure / Polycomb / transcriptional regulation / repressive chromatin modifier / GENE REGULATION
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法
データ登録者Uckelmann M / Taveneau C / Levina V / Trepout S / de Marco A / Davidovich C
資金援助 オーストラリア, 5件
OrganizationGrant number
Australian Research Council (ARC)DE210101669 オーストラリア
Australian Research Council (ARC)DP190103407 オーストラリア
National Health and Medical Research Council (NHMRC, Australia)APP1162921 オーストラリア
National Health and Medical Research Council (NHMRC, Australia)APP1184637 オーストラリア
National Health and Medical Research Council (NHMRC, Australia)APP2011767 オーストラリア
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / : 2025
タイトル: Dynamic PRC1-CBX8 stabilizes a porous structure of chromatin condensates.
著者: Michael Uckelmann / Vita Levina / Cyntia Taveneau / Xiao Han Ng / Varun Pandey / Jasmine Martinez / Shweta Mendiratta / Justin Houx / Marion Boudes / Hari Venugopal / Sylvain Trépout / Alex ...著者: Michael Uckelmann / Vita Levina / Cyntia Taveneau / Xiao Han Ng / Varun Pandey / Jasmine Martinez / Shweta Mendiratta / Justin Houx / Marion Boudes / Hari Venugopal / Sylvain Trépout / Alex J Fulcher / Qi Zhang / Sarena Flanigan / Minrui Li / Emma Sierecki / Yann Gambin / Partha Pratim Das / Oliver Bell / Alex de Marco / Chen Davidovich /
要旨: The compaction of chromatin is a prevalent paradigm in gene repression. Chromatin compaction is commonly thought to repress transcription by restricting chromatin accessibility. However, the spatial ...The compaction of chromatin is a prevalent paradigm in gene repression. Chromatin compaction is commonly thought to repress transcription by restricting chromatin accessibility. However, the spatial organization and dynamics of chromatin compacted by gene-repressing factors are unknown. Here, using cryo-electron tomography, we solved the three-dimensional structure of chromatin condensed by the polycomb repressive complex 1 (PRC1) in a complex with CBX8. PRC1-condensed chromatin is porous and stabilized through multivalent dynamic interactions of PRC1 with chromatin. Mechanistically, positively charged residues on the internally disordered regions of CBX8 mask negative charges on the DNA to stabilize the condensed state of chromatin. Within condensates, PRC1 remains dynamic while maintaining a static chromatin structure. In differentiated mouse embryonic stem cells, CBX8-bound chromatin remains accessible. These findings challenge the idea of rigidly compacted polycomb domains and instead provide a mechanistic framework for dynamic and accessible PRC1-chromatin condensates.
履歴
登録2024年1月30日-
ヘッダ(付随情報) 公開2025年2月19日-
マップ公開2025年2月19日-
更新2025年6月25日-
現状2025年6月25日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_43554.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 769 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Tomogram of in vitro reconsituted chromatin
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
6.52 Å/pix.
x 166 pix.
= 1082.32 Å
6.52 Å/pix.
x 1186 pix.
= 7732.72 Å
6.52 Å/pix.
x 1024 pix.
= 6676.48 Å

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

これらの図は立方格子座標系で作成されたものです

ボクセルのサイズX=Y=Z: 6.52 Å
密度
最小 - 最大-96.275925000000001 - 79.844210000000004
平均 (標準偏差)1.062511 (±4.7556915)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin-9208-91
サイズ11861024166
Spacing10241186166
セルA: 6676.48 Å / B: 7732.72 Å / C: 1082.32 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : In vitro reconstituted chromatin from human histones with a 3631 ...

全体名称: In vitro reconstituted chromatin from human histones with a 3631 bp DNA sequence derived from the human ATOH1 gene
要素
  • 複合体: In vitro reconstituted chromatin from human histones with a 3631 bp DNA sequence derived from the human ATOH1 gene
    • 複合体: Histone Octamer

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超分子 #1: In vitro reconstituted chromatin from human histones with a 3631 ...

超分子名称: In vitro reconstituted chromatin from human histones with a 3631 bp DNA sequence derived from the human ATOH1 gene
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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超分子 #2: Histone Octamer

超分子名称: Histone Octamer / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1
詳細: Histone octamer from human histones H2A, H2B, H3, H4
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析電子線トモグラフィー法
試料の集合状態3D array

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
構成要素:
濃度名称
4.17 mMC8H18N2O4SHEPES ((4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid))
8.3 mMC4H11NO3Tris
25.0 mMNaClSodium Chloride
8.3 mMKClPotassium Chloride
1.0 mMC4H10O2S2Dithiothreitol
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
切片作成その他: NO SECTIONING
位置合わせマーカー直径: 5 nm

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 実像数: 41 / 平均電子線量: 3.9 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 倍率(公称値): 53000
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成ソフトウェア - 名称: IMOD (ver. 4.11.15) / 使用した粒子像数: 41
CTF補正ソフトウェア - 名称: IMOD (ver. 4.11.15)
詳細: CTF correction was done on the final aligned stack. Defocus was estimated using emClarity and CTF correction was done in IMOD using the expected defocus from emClarity.
タイプ: PHASE FLIPPING ONLY

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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