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- EMDB-43137: SARS-CoV-2 Frameshift Stimulatory Element with Upstream Multibran... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-43137
タイトルSARS-CoV-2 Frameshift Stimulatory Element with Upstream Multibranch Loop
マップデータ
試料
  • ウイルス: Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS コロナウイルス)
    • RNA: Frameshift Stimulatory Element with Upstream Multi-branch Loop
キーワードRNA / Coronavirus / SARS-CoV-2 / Programmed -1 Ribosomal Frameshifting / -1 PRF / Frameshift Stimulatory Element / FSE / Attenuator Hairpin
生物種Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス) / Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS コロナウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.1 Å
データ登録者Peterson JM / Becker ST / O'Leary CA / Juneja P / Yang Y / Moss WN
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01GM133810 米国
引用ジャーナル: Biochemistry / 年: 2024
タイトル: Structure of the SARS-CoV-2 Frameshift Stimulatory Element with an Upstream Multibranch Loop.
著者: Jake M Peterson / Scott T Becker / Collin A O'Leary / Puneet Juneja / Yang Yang / Walter N Moss /
要旨: The severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) frameshift stimulatory element (FSE) is necessary for programmed -1 ribosomal frameshifting (-1 PRF) and optimized viral efficacy. The ...The severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) frameshift stimulatory element (FSE) is necessary for programmed -1 ribosomal frameshifting (-1 PRF) and optimized viral efficacy. The FSE has an abundance of context-dependent alternate conformations, but two of the structures most crucial to -1 PRF are an attenuator hairpin and a three-stem H-type pseudoknot structure. A crystal structure of the pseudoknot alone features three RNA stems in a helically stacked linear structure, whereas a 6.9 Å cryo-EM structure including the upstream heptameric slippery site resulted in a bend between two stems. Our previous research alluded to an extended upstream multibranch loop that includes both the attenuator hairpin and the slippery site-a conformation not previously modeled. We aim to provide further context to the SARS-CoV-2 FSE via computational and medium resolution cryo-EM approaches, by presenting a 6.1 Å cryo-EM structure featuring a linear pseudoknot structure and a dynamic upstream multibranch loop.
履歴
登録2023年12月14日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年1月17日-
マップ公開2024年1月17日-
更新2024年5月29日-
現状2024年5月29日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_43137.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_43137.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.133 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.02
最小 - 最大-0.11588581 - 0.1850674
平均 (標準偏差)0.00008037884 (±0.0065108426)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ200200200
Spacing200200200
セルA=B=C: 226.6 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_43137_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: #1

ファイルemd_43137_additional_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_43137_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_43137_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Severe acute respiratory syndrome coronavirus

全体名称: Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS コロナウイルス)
要素
  • ウイルス: Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS コロナウイルス)
    • RNA: Frameshift Stimulatory Element with Upstream Multi-branch Loop

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超分子 #1: Severe acute respiratory syndrome coronavirus

超分子名称: Severe acute respiratory syndrome coronavirus / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / 詳細: PCR amplified and transcribed using T7 polymerase. / NCBI-ID: 2901879 / 生物種: Severe acute respiratory syndrome coronavirus / Sci species strain: Wuhan-Hu-1 / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: Yes / ウイルス・中空状態: Yes
宿主生物種: Homo sapiens (ヒト) / 株: Wuhan-Hu-1

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分子 #1: Frameshift Stimulatory Element with Upstream Multi-branch Loop

分子名称: Frameshift Stimulatory Element with Upstream Multi-branch Loop
タイプ: rna / ID: 1 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (ウイルス)
分子量理論値: 37.90141 KDa
配列文字列:
GGGAACCCAU GCUUCAGUCA GCUGAUGCAC AAUCGUUUUU AAACGGGUUU CCGGUGUAAG UGCAGCCCGU CUUACACCGU GCGGCACAG GCACUAGUAC UGAUGUCGUA UACAGGGCU

GENBANK: GENBANK: NC_045512.2

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 8
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 40 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 4 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡TFS GLACIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 3 / 平均電子線量: 60.0 e/Å2
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 3.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.5 µm / 倍率（公称値）: 36000

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
最終 再構成使用したクラス数: 1 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 6.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.3.1) / 使用した粒子像数: 627438
初期 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
最終 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
最終 3次元分類クラス数: 3 / 平均メンバー数/クラス: 600000 / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.3.1)
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

精密化プロトコル: AB INITIO MODEL
得られたモデル

PDB-8vci:
SARS-CoV-2 Frameshift Stimulatory Element with Upstream Multibranch Loop

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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