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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Pectobacterium phage PhiM1 ejectosome C8 map | |||||||||
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![]() | Internal virion proteins / ejectosome / C8 map / core proteins / VIRUS | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.17 Å | |||||||||
![]() | Eruera A / Hodgkinson-Bean J | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Ejectosome of bacteriophage ΦM1. 著者: Alice-Roza Eruera / James Hodgkinson-Bean / Georgia L Rutter / Francesca R Hills / Rosheny Kumaran / Alexander J M Crowe / Nickhil Jadav / Fangfang Chang / Klemens McJarrow-Keller / Fátima ...著者: Alice-Roza Eruera / James Hodgkinson-Bean / Georgia L Rutter / Francesca R Hills / Rosheny Kumaran / Alexander J M Crowe / Nickhil Jadav / Fangfang Chang / Klemens McJarrow-Keller / Fátima Jorge / Jaekyung Hyun / Hyejin Kim / Bumhan Ryu / Mihnea Bostina / ![]() ![]() 要旨: Podophages that infect gram-negative bacteria, such as pathogen ΦM1, encode tail assemblies too short to extend across the complex gram-negative cell wall. To overcome this, podophages encode a ...Podophages that infect gram-negative bacteria, such as pathogen ΦM1, encode tail assemblies too short to extend across the complex gram-negative cell wall. To overcome this, podophages encode a large protein complex (ejectosome) packaged inside the viral capsid and correspondingly ejected during infection to form a transient channel that spans the periplasmic space. Here, we describe the ejectosome of bacteriophage ΦM1 to a resolution of 3.32 Å by single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM). The core consists of tetrameric and octameric ejection proteins which form a ∼1.5-MDa ejectosome that must transition through the ∼30 Å aperture created by the short tail nozzle assembly that acts as the conduit for the passage of DNA during infection. The ejectosome forms several grooves into which coils of genomic DNA are fit before the DNA sharply turns and goes down the tunnel and into the portal. In addition, we reconstructed the icosahedral capsid and hybrid tail apparatus to resolutions between 3.04 and 3.23 Å, and note an uncommon fold adopted by the dimerized decoration proteins which further emphasize the structural diversity of podophages. These reconstructions have allowed the generation of a complete atomic model of the ΦM1, uncovering two distinct decoration proteins and highlighting the exquisite structural diversity of tailed bacteriophages. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 203.1 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 18 KB 18 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 130 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 6.3 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 200 MB 200 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.4 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_43111_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_43111_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Pectobacterium phage PhiM1
全体 | 名称: ![]() |
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要素 |
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-超分子 #1: Pectobacterium phage PhiM1
超分子 | 名称: Pectobacterium phage PhiM1 / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / 詳細: Map refined in C8. / NCBI-ID: 1211386 / 生物種: Pectobacterium phage PhiM1 / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: OTHER / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No |
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宿主 | 生物種: ![]() |
-分子 #1: Internal virion proteins (ejectosome) of Pectobacterium phage PhiM1
分子 | 名称: Internal virion proteins (ejectosome) of Pectobacterium phage PhiM1 タイプ: other / ID: 1 / 分類: other |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MIWMFAAAAA QMIQGGLQYA QDAKNQRRQN KADQKYNEAV RSASARQITE INTQRSVSRA QTAQALDAAR RQGAGESSA RNLQAAATDT MGASVEQNLQ EVGVQLAAAE GNLMQNAELT ELSLDSSVMN TVDQARNSIR E LSNPLGTD WAATGSAVGQ IGTSMVANKL ...文字列: MIWMFAAAAA QMIQGGLQYA QDAKNQRRQN KADQKYNEAV RSASARQITE INTQRSVSRA QTAQALDAAR RQGAGESSA RNLQAAATDT MGASVEQNLQ EVGVQLAAAE GNLMQNAELT ELSLDSSVMN TVDQARNSIR E LSNPLGTD WAATGSAVGQ IGTSMVANKL GGQGWFGGNS GTQQPAPISQ AAPPTRSNNL STRLNV MPV RQPTQGGVQV PGLTGYQSAG VAQPVYRAPQ EEAQGVSQFW QNLLPASVKT AQAAQQTASA KGYLEGQ QD SQQGREKQVR NFFTKEAYEQ GYNSASVNSA LASFQLGLQN TAQQYVNSGK TPEEFNVHVQ QQTNQLLQ E AGAQGLNLND KDWQAWLGSV EHSRNTANAS YQDLNLKRAA VLQEQSWGAR GNAAIADFVT AQQSGDTEQ ALQNVNSFIS SVTHDDSITA ENKIKYTSQF VVNAFANANS TGDMQALTGY VQSLSEFKNM PTDVQTQIMG SAQQYYQQR ASDESVQLYE YNSRVNSVTD YKTLNEAYPM AQYIGTVMQA VQQKKLSPGT GYGMVDAESQ R RLKMQKAE QGQLAYTNGV TISDIAAGTG ESLDKVKGEL TKMYATIGQG YSGGGLQLMQ RGLKSGAQDI TGVGIEMMQQ DAQSLSGIDW RNLKTDADGK PLYPAAVVGS LGNLQAAYQS ALAAGNQVQA NQLLSGLPDP VVYGIRQNVD ARDLADVVGK RAQDIASGKV LALPANMPAD VSITQADVTA GIFDLGLGKD ARNRNMLGIQ SWVFTSDADE KAAQARVSQV NSAMNNEYVY NQQRGSLPAL VGDDLKSWLM GKVASRTVRV KDGTDNGALL VLPEVGDKQK VFGSTDNGII ESALTESVTN FKKQYPQATT VQMDYDPLTQ ELIFQGVNAE NQLGTTRASI PAADFRNTVR GVQNTLTQNG SGTTQGNLNV PGAGFVSFNA GNSFGIQKNV VMGAVNQLVS YEGYTPSKGF SVLGVHPTTG AKLNEDKYVK QATDTPQVAA DKFNMYLNDK VYPLVMPKME QYKNLPGYIQ NNIYNALVET TYHSGNSDVF DKYIQTALYG NVQEIPTFKD TPLFKDAGAG SRRNVDRYQL LGSLVTYRTN NPNLSKMIHL RPDSTAYARS AAVSANPAVG GYVTPDNTVL EGQNPSALVQ AMQKPVASVT DSFKATLSES IGAKALRGVE YASIPTEAGF EPSKALGDSV SQYTADELEF LSDARSSAEL AQRRSQVQDT RNNYDAMGQN MLTTVAASML DVDMVIGGGV GALSKVSRAT RLAVGLSANA ALLGTASYGG TITPLDVVGT SVGIAMSAIP GIRKVAKAEQ VQQGAVRGGV NAAEDAAGTV VPPKDVTVPP VREVPEVQPI KTVADEDYPK IDIDTYSNKE HIEVGRTGGA KTGSLKTTVQ NAVLAVTALG DDLPEGVRAL GRALGASLEA DADVPVVFRS RTGANAQARS AVITEAETGA TRAEIFNPAV GGTLSDHVRG MSTYEKTILL HEAAHAKTGR SIRAVESGAV SDGVVYEAVQ RIKEIQWYVK ANVELPPLGK GAKYNVDYGL SDTHEFISQL FNSEHFRDAL RSVKMPGSDG TLLSNLMKRV VTLFTGKAPE GNAFDATLQA FDNLLSQPTT PADVFLNAPK ATPDLQSKVL QAPNVIEMNN KVMGALNRNF SLYERLKSFG YKASTLADQL VVDATGTEAN SAAHHARAAH LASNVSIVQV DDAFRQALSA DWPLVQRLRH PVLYREAQRD LSQKVYQQLA ENHDRFLKGQ SIQPSNDPRV NSMVDAFVNS NWAKDELARV KGAGINGADA VRESPYYLPR QHSGNKLNDF MRNNRQVTKD DIVGMYTEQF SRMFQQNGIT PETARKLGAK MFDNMQDQAA HVQGYRQSIA GMSYDDIENT LEALGASDPT ITAFLDAVKG SGEQANKVRN LRGRAEFDMT AQYTTKSGDM ISPSMFVNND VMGLMEGYSR RMSGRVGLAK AGFPDLRDAV KAIDEAAAEA QDPAAALHAF DNTMNQILGY PTGEDVPDIL RSASIIGGAL NLANSGIYQL ADMSLMLQQF GITKTLKAFG STAFGRNAMD VAKSAEFGSR LQDVIEARHV LSGKYRSVLT HLEDNRDIGS LGVAHRYVQQ MGQGTRFVNG MEFIRRGQAK LVSGLIADTV DDAIAGNASA VTAMERFGLN QQLLDELRKA TAANPDMRKW PDSVRMDIEA VTHNMADSIV LENRLGEIPA WMQFSSVGKV ILPYMTFVAG AWNKILRRTA KLDGATGVAI ALAYQMPLVT LSSATSIAIS GKPVTPESVA QRALVQVPMM SWAGFAVDFW ANGASNNLAA LALVDRMHAA MSSIASGETN PESLIKAVPF LSILPGMRLM GASLADDDE |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 1.07 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 倍率(補正後): 36765 / 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.4 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 64000 |
試料ステージ | ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER / 詳細: Ab initio model |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C8 (8回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.17 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 使用した粒子像数: 17729 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC |
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: RECIPROCAL / プロトコル: AB INITIO MODEL |
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