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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Asymmetric unit of bacteriophage PhiM1 mature capsid | |||||||||
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![]() | Mature capsid / Bacteriophage / Decoration protein / alpha-claw / VIRUS | |||||||||
機能・相同性 | Putative capsid protein / Uncharacterized protein / Uncharacterized protein![]() | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.04 Å | |||||||||
![]() | Eruera A / Hodgkinson-Bean J | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Ejectosome of bacteriophage ΦM1. 著者: Alice-Roza Eruera / James Hodgkinson-Bean / Georgia L Rutter / Francesca R Hills / Rosheny Kumaran / Alexander J M Crowe / Nickhil Jadav / Fangfang Chang / Klemens McJarrow-Keller / Fátima ...著者: Alice-Roza Eruera / James Hodgkinson-Bean / Georgia L Rutter / Francesca R Hills / Rosheny Kumaran / Alexander J M Crowe / Nickhil Jadav / Fangfang Chang / Klemens McJarrow-Keller / Fátima Jorge / Jaekyung Hyun / Hyejin Kim / Bumhan Ryu / Mihnea Bostina / ![]() ![]() 要旨: Podophages that infect gram-negative bacteria, such as pathogen ΦM1, encode tail assemblies too short to extend across the complex gram-negative cell wall. To overcome this, podophages encode a ...Podophages that infect gram-negative bacteria, such as pathogen ΦM1, encode tail assemblies too short to extend across the complex gram-negative cell wall. To overcome this, podophages encode a large protein complex (ejectosome) packaged inside the viral capsid and correspondingly ejected during infection to form a transient channel that spans the periplasmic space. Here, we describe the ejectosome of bacteriophage ΦM1 to a resolution of 3.32 Å by single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM). The core consists of tetrameric and octameric ejection proteins which form a ∼1.5-MDa ejectosome that must transition through the ∼30 Å aperture created by the short tail nozzle assembly that acts as the conduit for the passage of DNA during infection. The ejectosome forms several grooves into which coils of genomic DNA are fit before the DNA sharply turns and goes down the tunnel and into the portal. In addition, we reconstructed the icosahedral capsid and hybrid tail apparatus to resolutions between 3.04 and 3.23 Å, and note an uncommon fold adopted by the dimerized decoration proteins which further emphasize the structural diversity of podophages. These reconstructions have allowed the generation of a complete atomic model of the ΦM1, uncovering two distinct decoration proteins and highlighting the exquisite structural diversity of tailed bacteriophages. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 1.2 GB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 17.2 KB 17.2 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 126 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 5.8 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 1.2 GB 1.2 GB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 22.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 27.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.4 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_43109_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_43109_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Pectobacterium phage PhiM1
全体 | 名称: ![]() |
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要素 |
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-超分子 #1: Pectobacterium phage PhiM1
超分子 | 名称: Pectobacterium phage PhiM1 / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all 詳細: Phage sample produced from natural infection of Pectobacterium atrosepticum NCBI-ID: 1211386 / 生物種: Pectobacterium phage PhiM1 / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: SPECIES / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No |
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宿主 | 生物種: ![]() |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: Capsid / 直径: 635.0 Å / T番号(三角分割数): 7 |
-分子 #1: Major capsid protein (gp38)
分子 | 名称: Major capsid protein (gp38) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 7 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 36.44877 KDa |
配列 | 文字列: MSDTPYKADL SRVHWAGSNS DVDIHLEIFE GDVDSGFMYN SFFRGNSSYV SVQDQSNQAR IDRMNTVTIK GRTPGQKLDR ESVKNDKLV ITVDTVTYAS TVMDWQDDWT SPDRWAEIGA QHGYQHARLF DTAHLIQIIK ARKWIAPADL KPAFFDGKEY T AAYNADRE ...文字列: MSDTPYKADL SRVHWAGSNS DVDIHLEIFE GDVDSGFMYN SFFRGNSSYV SVQDQSNQAR IDRMNTVTIK GRTPGQKLDR ESVKNDKLV ITVDTVTYAS TVMDWQDDWT SPDRWAEIGA QHGYQHARLF DTAHLIQIIK ARKWIAPADL KPAFFDGKEY T AAYNADRE LFAANIIDAH RQGIEEMVRR DLGGSLTEFI TVVSPYVFGL LLDSKKLVNV DYSAGNGNFA ERRVGMVNGV RI VESARFP AAAGTSPLGA AFTVDADDVA CQMVVYHPKM TLVTVEAKPL ATNKYPDNPN FSDILDSFTL YTVGQRRPDT SFA VKLTNL P UniProtKB: Putative capsid protein |
-分子 #2: Alpha-claw decoration protein (gp44)
分子 | 名称: Alpha-claw decoration protein (gp44) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 5 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 6.334274 KDa |
配列 | 文字列: MAITTGTTEA QALNMTMRDA VLKVAPGVQQ LVQNSSQLTA AEIAIIQTNI TALKAAFTAA GA UniProtKB: Uncharacterized protein |
-分子 #3: Alpha-paw decoration protein (gp43)
分子 | 名称: Alpha-paw decoration protein (gp43) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 17.263197 KDa |
配列 | 文字列: MSLVTATAAQ RIALRNTATN LSEQTQVYAQ SATAPTAAEA AIVQPYIDAA QAAITAVGAG GATVANGATV AVVNSASADS HNATATVTG TTLTNVKLAA TVAFVDNADT ITVQNSAGTA VAGTHTATVA AGVISNVKLA ATIAPVASGL ALTGVTPTGT Y TNTVTFTV AAGVITAIVL S UniProtKB: Uncharacterized protein |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgSO4, 0.01% w/v gelatine |
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 詳細: 45 mA |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 54.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.4 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER |
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最終 再構成 | 使用したクラス数: 1 / 想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.04 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 5279 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |