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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-42977 | |||||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of singly-bound SNF2h-nucleosome complex with SNF2h at inactive SHL2 (conformation 1) | |||||||||||||||
マップデータ | Single-bound SNF2h nucleosome complex variability component 2A (cryoSPARC non-uniform refinement map) | |||||||||||||||
試料 |
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キーワード | nucleosome / chromatin remodeler / ISWI / SNF2h / DNA BINDING PROTEIN-DNA complex | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RSF complex / histone octamer slider activity / ACF complex / WICH complex / negative regulation of mitotic chromosome condensation / CHRAC / NoRC complex / NURF complex / B-WICH complex / rDNA heterochromatin formation ...RSF complex / histone octamer slider activity / ACF complex / WICH complex / negative regulation of mitotic chromosome condensation / CHRAC / NoRC complex / NURF complex / B-WICH complex / rDNA heterochromatin formation / chromatin silencing complex / DNA methylation-dependent constitutive heterochromatin formation / negative regulation of transcription by RNA polymerase I / positive regulation of transcription by RNA polymerase III / ATP-dependent chromatin remodeler activity / positive regulation of transcription by RNA polymerase I / regulation of DNA replication / nucleosome binding / ATP-dependent activity, acting on DNA / pericentric heterochromatin / condensed chromosome / antiviral innate immune response / Deposition of new CENPA-containing nucleosomes at the centromere / positive regulation of DNA replication / cellular response to leukemia inhibitory factor / DNA-templated transcription initiation / helicase activity / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / NoRC negatively regulates rRNA expression / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / heterochromatin formation / fibrillar center / structural constituent of chromatin / nucleosome / nucleosome assembly / Recruitment and ATM-mediated phosphorylation of repair and signaling proteins at DNA double strand breaks / chromatin organization / site of double-strand break / chromatin remodeling / protein heterodimerization activity / DNA repair / DNA damage response / regulation of DNA-templated transcription / regulation of transcription by RNA polymerase II / nucleolus / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / ATP hydrolysis activity / DNA binding / nucleoplasm / ATP binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) / Xenopus laevis (アフリカツメガエル) / synthetic construct (人工物) | |||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.8 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Chio US / Palovcak E / Armache JP / Narlikar GJ / Cheng Y | |||||||||||||||
資金援助 | 米国, 4件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: Functionalized graphene-oxide grids enable high-resolution cryo-EM structures of the SNF2h-nucleosome complex without crosslinking. 著者: Un Seng Chio / Eugene Palovcak / Anton A A Smith / Henriette Autzen / Elise N Muñoz / Zanlin Yu / Feng Wang / David A Agard / Jean-Paul Armache / Geeta J Narlikar / Yifan Cheng / 要旨: Single-particle cryo-EM is widely used to determine enzyme-nucleosome complex structures. However, cryo-EM sample preparation remains challenging and inconsistent due to complex denaturation at the ...Single-particle cryo-EM is widely used to determine enzyme-nucleosome complex structures. However, cryo-EM sample preparation remains challenging and inconsistent due to complex denaturation at the air-water interface (AWI). Here, to address this issue, we develop graphene-oxide-coated EM grids functionalized with either single-stranded DNA (ssDNA) or thiol-poly(acrylic acid-co-styrene) (TAASTY) co-polymer. These grids protect complexes between the chromatin remodeler SNF2h and nucleosomes from the AWI and facilitate collection of high-quality micrographs of intact SNF2h-nucleosome complexes in the absence of crosslinking. The data yields maps ranging from 2.3 to 3 Å in resolution. 3D variability analysis reveals nucleotide-state linked conformational changes in SNF2h bound to a nucleosome. In addition, the analysis provides structural evidence for asymmetric coordination between two SNF2h protomers acting on the same nucleosome. We envision these grids will enable similar detailed structural analyses for other enzyme-nucleosome complexes and possibly other protein-nucleic acid complexes in general. | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_42977.map.gz | 55.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-42977-v30.xml emd-42977.xml | 31.3 KB 31.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_42977_fsc.xml | 12.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_42977.png | 125.2 KB | ||
Filedesc metadata | emd-42977.cif.gz | 8.5 KB | ||
その他 | emd_42977_half_map_1.map.gz emd_42977_half_map_2.map.gz | 200.7 MB 200.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-42977 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-42977 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_42977_validation.pdf.gz | 937.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_42977_full_validation.pdf.gz | 937.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_42977_validation.xml.gz | 21.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_42977_validation.cif.gz | 27.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-42977 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-42977 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8v4yMC 8v6vC 8v7lC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_42977.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Single-bound SNF2h nucleosome complex variability component 2A (cryoSPARC non-uniform refinement map) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.8468 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: Half map B
ファイル | emd_42977_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half map A
ファイル | emd_42977_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : ATP-dependent chromatin remodeler SNF2h in complex with nucleosome
+超分子 #1: ATP-dependent chromatin remodeler SNF2h in complex with nucleosome
+超分子 #2: Nucleosome with Xenopus laevis histones
+超分子 #3: SNF2h
+分子 #1: Histone H3.2
+分子 #2: Histone H4
+分子 #3: Histone H2A type 1
+分子 #4: Histone H2B
+分子 #7: SWI/SNF-related matrix-associated actin-dependent regulator of ch...
+分子 #5: Widom 601 DNA (147-mer) with 60 base pairs flanking DNA (reverse ...
+分子 #6: Widom 601 DNA (147-mer) with 60 base pairs flanking DNA (forward ...
+分子 #8: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
+分子 #9: MAGNESIUM ION
+分子 #10: BERYLLIUM TRIFLUORIDE ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: 12.5 mM HEPES-KOH, pH 7.5, 60 mM KCl, 5 mM MgCl2, 2 mM ADP, 2 mM BeSO4, 10 mM NaF, 1.5% glycerol | ||||||||||||||||||||||||
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GRAPHENE OXIDE / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 1 | ||||||||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV | ||||||||||||||||||||||||
詳細 | 100 nM nucleosome with 500 nM SNF2h |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 66.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.8 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |