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基本情報
| 登録情報 | ![]() | |||||||||
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| タイトル | Cryo-EM structure of a bacteriophage tail- spike protein against Klebsiella pneumoniae K64,ORF41(K64-ORF41) in 5 mM EDTA | |||||||||
マップデータ | Cryo-EM structure of a bacteriophage tail- spike protein against Klebsiella pneumoniae K64,ORF41(K64-ORF41) in 5mM EDTA | |||||||||
試料 |
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キーワード | K64-ORF41 / depolymerase / cryo-EM / Klebsiella pneumoniae K64 / capsule polysaccharide / EDTA / LYASE | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報symbiont entry into host cell via disruption of host cell glycocalyx / symbiont entry into host cell via disruption of host cell envelope / virus tail / outer membrane / adhesion receptor-mediated virion attachment to host cell 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | Klebsiella phage SH-Kp 152410 (ファージ) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Xie Y / Huang T / Zhang Z / Tao X | |||||||||
| 資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Int J Biol Macromol / 年: 2024タイトル: Structural and functional basis of bacteriophage K64-ORF41 depolymerase for capsular polysaccharide degradation of Klebsiella pneumoniae K64. 著者: Tianyun Huang / Zhuoyuan Zhang / Xin Tao / Xinyu Shi / Peng Lin / Dan Liao / Chenyu Ma / Xinle Cai / Wei Lin / Xiaofan Jiang / Peng Luo / Shan Wu / Yuan Xie / ![]() 要旨: Capsule polysaccharide is an important virulence factor of Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae), which protects bacteria against the host immune response. A promising therapeutic approach is using ...Capsule polysaccharide is an important virulence factor of Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae), which protects bacteria against the host immune response. A promising therapeutic approach is using phage-derived depolymerases to degrade the capsular polysaccharide and expose and sensitize the bacteria to the host immune system. Here we determined the cryo-electron microscopy (cryo-EM) structures of a bacteriophage tail-spike protein against K. pneumoniae K64, ORF41 (K64-ORF41) and ORF41 in EDTA condition (K64-ORF41), at 2.37 Å and 2.50 Å resolution, respectively, for the first time. K64-ORF41 exists as a trimer and each protomer contains a β-helix domain including a right-handed parallel β-sheet helix fold capped at both ends, an insertion domain, and one β-sheet jellyroll domain. Moreover, our structural comparison with other depolymerases of K. pneumoniae suggests that the catalytic residues (Tyr528, His574 and Arg628) are highly conserved although the substrate of capsule polysaccharide is variable. Besides that, we figured out the important residues involved in the substrate binding pocket including Arg405, Tyr526, Trp550 and Phe669. This study establishes the structural and functional basis for the promising phage-derived broad-spectrum activity depolymerase therapeutics and effective CPS-degrading agents for the treatment of carbapenem-resistant K. pneumoniae K64 infections. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_38151.map.gz | 70.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-38151-v30.xml emd-38151.xml | 17.5 KB 17.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_38151.png | 25.3 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-38151.cif.gz | 6.3 KB | ||
| その他 | emd_38151_half_map_1.map.gz emd_38151_half_map_2.map.gz | 58.5 MB 58.5 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-38151 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-38151 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_38151_validation.pdf.gz | 934 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_38151_full_validation.pdf.gz | 933.6 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_38151_validation.xml.gz | 12.5 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_38151_validation.cif.gz | 14.9 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-38151 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-38151 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 8x8oMC ![]() 8x8mC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_38151.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 75.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | Cryo-EM structure of a bacteriophage tail- spike protein against Klebsiella pneumoniae K64,ORF41(K64-ORF41) in 5mM EDTA | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.851 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: half1 map of ORF41(K64-ORF41) in 5mM EDTA
| ファイル | emd_38151_half_map_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | half1 map of ORF41(K64-ORF41) in 5mM EDTA | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half2 map of ORF41(K64-ORF41) in 5mM EDTA
| ファイル | emd_38151_half_map_2.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | half2 map of ORF41(K64-ORF41) in 5mM EDTA | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : K64-ORF41 in 5 mM EDTA
| 全体 | 名称: K64-ORF41 in 5 mM EDTA |
|---|---|
| 要素 |
|
-超分子 #1: K64-ORF41 in 5 mM EDTA
| 超分子 | 名称: K64-ORF41 in 5 mM EDTA / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Klebsiella phage SH-Kp 152410 (ファージ) |
-分子 #1: Probable tail spike protein
| 分子 | 名称: Probable tail spike protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Klebsiella phage SH-Kp 152410 (ファージ) |
| 分子量 | 理論値: 112.2515 KDa |
| 組換発現 | 生物種: ![]() |
| 配列 | 文字列: MGSSHHHHHH SSGLVPRGSH MDQDTKTIIQ YPTSGDEYDI PFDYLSRKFV RVSLVSNTQR VLLDNITDYR YVSRTRVKLL VSTDGYSRV EIRRFTSASE MVVDFSDGSV LRATDLNVSA LQSAHIAEEA RDLFSTSLSI GQLSYFDAKG LQIKNVAAGV D NTDAVTVQ ...文字列: MGSSHHHHHH SSGLVPRGSH MDQDTKTIIQ YPTSGDEYDI PFDYLSRKFV RVSLVSNTQR VLLDNITDYR YVSRTRVKLL VSTDGYSRV EIRRFTSASE MVVDFSDGSV LRATDLNVSA LQSAHIAEEA RDLFSTSLSI GQLSYFDAKG LQIKNVAAGV D NTDAVTVQ QLNKIIADVV TTIPDSVADN IRGLWARVLG DIGITLVDGS FETGATITTR TQALWSISGR KCYTWAGALP KV VPENSTP ESTGGISETA WVDSSSKALG VLLAGPSGAE RVGLKQGGTV QDAINWLTFD SFDIVKDGSK DVTADIMAAC VVA NDLGLD IKQNDGTYLV SGNPVWPVYN SLDLNGVTLK LAAGFTGYFA LTQKDSTTVY GPTSPIVQAI NAAGGRTAGS GVLE GLVNS TELNGKFLFM EGADVLYYSR GTAKYWWTNT YLSNRGKLSD NLKYGVSAIT KITAVTPRTK IVYYRLPNLD FGNGP ANNG VIRVLNNTRF IMQGGSISNR PLKDVSKSPV IISLNYCAAF KAYDFFDPYP AFAVDSNNSL VYSYTLNFND IADAVF ENF NSQGYGWGVV GGQRSTNITY RDCNLNRVDM HNPYMGYLKV LDTRLGTWGI NASGMGDMYL ERVTVDLDDS AHGGHRE HE GIINARGDFG GFHDGGLYIK DLTIVGEASA FEATSGHPVA LVSAYSFNAS LAYIPESSPV TPWGFKEVIV EGLHCPFK R TGRRFNSIIS APSIQFTVYH PMRVKLEDCN FNSTAFEKFD LRGWRVTPYN PSKVGIANTL AFRPTNFVDV KDCSMVGLE FTRPTSAYDY SNFDVNLVNV KNVEEHSLSP FTLYTNQCGR YNLVGCGLQQ IVDKSMTSGE RANRRSTFSV TGGTWNSLSG NPTDITYGN GYDIPVVATG VMFVGPYSQT EVTGANLNVA EFVQASGCKF LSSGPTYIQP LLWSGAGGPT GASANFNVAR G NTLGLNIS AVNGETSQVI AATLVIPQGF STGPAAGTTY GFAVEKNINY QLGLNARSLK ANVGLVRCSD TITGVYLNA UniProtKB: Probable tail spike protein |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
| 緩衝液 | pH: 8 |
|---|---|
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 54.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.1 µm |
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キーワード
Klebsiella phage SH-Kp 152410 (ファージ)
データ登録者
中国, 1件
引用


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解析
FIELD EMISSION GUN