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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3792 | |||||||||
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タイトル | Electron cryotomogram of Vibrio cholerae O395 N1 | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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生物種 | Vibrio cholerae (コレラ菌) | |||||||||
手法 | 電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法 | |||||||||
データ登録者 | Chang YW / Kjaer A / Ortega DR / Kovacikova G / Sutherland JA / Rettberg LA / Taylor RK / Jensen GJ | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Microbiol / 年: 2017 タイトル: Architecture of the Vibrio cholerae toxin-coregulated pilus machine revealed by electron cryotomography. 著者: Yi-Wei Chang / Andreas Kjær / Davi R Ortega / Gabriela Kovacikova / John A Sutherland / Lee A Rettberg / Ronald K Taylor / Grant J Jensen / 要旨: Type IV pili (T4P) are filamentous appendages found on many Bacteria and Archaea. They are helical fibres of pilin proteins assembled by a multi-component macromolecular machine we call the basal ...Type IV pili (T4P) are filamentous appendages found on many Bacteria and Archaea. They are helical fibres of pilin proteins assembled by a multi-component macromolecular machine we call the basal body. Based on pilin features, T4P are classified into type IVa pili (T4aP) and type IVb pili (T4bP). T4aP are more widespread and are involved in cell motility, DNA transfer, host predation and electron transfer. T4bP are less prevalent and are mainly found in enteropathogenic bacteria, where they play key roles in host colonization. Following similar work on T4aP machines, here we use electron cryotomography to reveal the three-dimensional in situ structure of a T4bP machine in its piliated and non-piliated states. The specific machine we analyse is the Vibrio cholerae toxin-coregulated pilus machine (TCPM). Although only about half of the components of the TCPM show sequence homology to components of the previously analysed Myxococcus xanthus T4aP machine (T4aPM), we find that their structures are nevertheless remarkably similar. Based on homologies with components of the M. xanthus T4aPM and additional reconstructions of TCPM mutants in which the non-homologous proteins are individually deleted, we propose locations for all eight TCPM components within the complex. Non-homologous proteins in the T4aPM and TCPM are found to form similar structures, suggesting new hypotheses for their functions and evolutionary histories. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_3792.map.gz | 4.3 GB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-3792-v30.xml emd-3792.xml | 15.3 KB 15.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_3792.png | 256.4 KB | ||
その他 | emd_3792_additional.map.gz | 4.3 GB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3792 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3792 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_3792_validation.pdf.gz | 146.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_3792_full_validation.pdf.gz | 145.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_3792_validation.xml.gz | 4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3792 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3792 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8492C 8493C 8494C 8495C 8496C 8497C 8498C 8499C 8500C 8501C 8502C 8503C C: 同じ文献を引用 (文献) |
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電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10110 (タイトル: Tilt-series for the electron cryotomogram of Vibrio cholerae O395 N1 Data size: 51.3 Data #1: Different tilt series for the Vibrio cholerae toxin-coregulated pilus machine revealed by electron cryotomography [tilt series]) |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3792.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1.3 GB / タイプ: IMAGE STORED AS SIGNED INTEGER (2 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 7.8 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: #1
ファイル | emd_3792_additional.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Vibrio Cholerae
全体 | 名称: Vibrio Cholerae (コレラ菌) |
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要素 |
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-超分子 #1: Vibrio Cholerae
超分子 | 名称: Vibrio Cholerae / タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: Bacteria which is the causative agent of the diarrhoeal disease cholera. |
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-超分子 #3: Vibrio Cholerae
超分子 | 名称: Vibrio Cholerae / タイプ: cell / ID: 3 / 親要素: 1 詳細: Bacteria which is the causative agent of the diarrhoeal disease cholera. |
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由来(天然) | 生物種: Vibrio cholerae (コレラ菌) / 株: Wild-type |
-超分子 #2: Toxin-coregulated pilus machine
超分子 | 名称: Toxin-coregulated pilus machine / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 2 / 親要素: 1 詳細: Pilus - Bacteria which is the causative agent of the diarrhoeal disease cholera. |
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由来(天然) | 生物種: Vibrio cholerae (コレラ菌) / 株: Wild-type |
組換発現 | 生物種: Vibrio cholerae (コレラ菌) / 組換株: Wild-type / 組換プラスミド: pMT5-ToxT |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 電子線トモグラフィー法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 構成要素:
詳細: V. cholerae O395 N1 strains (wild-type or TCPM component knockout mutants) harbouring the pMT5-ToxT plasmid were grown in 5 ml lysogeny broth (LB) medium. | |||||||||
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | |||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE | |||||||||
詳細 | After 24 h of growth, the tube of V. cholerae culture was placed on a bench at room temperature for 1 min to sediment visible microcolonies. After the pellet was formed, the supernatant was gently removed by pipetting and the pellet was resuspended in fresh LB. The cells were incubated for 15 min prior to mixing with 10 nm colloidal gold. | |||||||||
切片作成 | その他: NO SECTIONING | |||||||||
位置合わせマーカー | Manufacturer: Sigma-Aldrich / 直径: 10 nm |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 1856 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 1918 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 平均電子線量: 1.5 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 6.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 6.0 µm / 倍率(公称値): 27500 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: OTHER |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | ソフトウェア - 名称: TOMO3D ソフトウェア - 詳細: SIRT reconstructions were then produced 使用した粒子像数: 121 |
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CTF補正 | ソフトウェア - 名称: IMOD |