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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3696 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of RNA polymerase-sigma54 holoenzyme with promoter DNA and transcription activator PspF intermedate complex | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | transcription initiation / transcription intermediate complex / RNA polymerase / sigma54 / transcription | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 regulation of cellular response to stress / nitrogen fixation / DNA-binding transcription activator activity / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity ...regulation of cellular response to stress / nitrogen fixation / DNA-binding transcription activator activity / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / phosphorelay signal transduction system / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / nitrate assimilation / DNA-directed RNA polymerase complex / nucleotidyltransferase activity / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / DNA-templated transcription initiation / cell motility / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat / protein-containing complex assembly / intracellular iron ion homeostasis / transcription regulator complex / sequence-specific DNA binding / protein dimerization activity / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / positive regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / zinc ion binding / ATP binding / identical protein binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) / Klebsiella pneumoniae (肺炎桿菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Glyde R | |||||||||
資金援助 | 英国, 2件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2017 タイトル: Structures of RNA Polymerase Closed and Intermediate Complexes Reveal Mechanisms of DNA Opening and Transcription Initiation. 著者: Robert Glyde / Fuzhou Ye / Vidya Chandran Darbari / Nan Zhang / Martin Buck / Xiaodong Zhang / 要旨: Gene transcription is carried out by RNA polymerases (RNAPs). For transcription to occur, the closed promoter complex (RPc), where DNA is double stranded, must isomerize into an open promoter complex ...Gene transcription is carried out by RNA polymerases (RNAPs). For transcription to occur, the closed promoter complex (RPc), where DNA is double stranded, must isomerize into an open promoter complex (RPo), where the DNA is melted out into a transcription bubble and the single-stranded template DNA is delivered to the RNAP active site. Using a bacterial RNAP containing the alternative σ factor and cryoelectron microscopy, we determined structures of RPc and the activator-bound intermediate complex en route to RPo at 3.8 and 5.8 Å. Our structures show how RNAP-σ interacts with promoter DNA to initiate the DNA distortions required for transcription bubble formation, and how the activator interacts with RPc, leading to significant conformational changes in RNAP and σ that promote RPo formation. We propose that DNA melting is an active process initiated in RPc and that the RNAP conformations of intermediates are significantly different from that of RPc and RPo. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_3696.map.gz | 7.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-3696-v30.xml emd-3696.xml | 25.8 KB 25.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_3696.png | 70.2 KB | ||
Filedesc metadata | emd-3696.cif.gz | 8.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3696 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3696 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_3696_validation.pdf.gz | 213.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_3696_full_validation.pdf.gz | 212.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_3696_validation.xml.gz | 6.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3696 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3696 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3696.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 76.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.05 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : Cryo-EM structure of RNA polymerase -sigma54 holoenzyme with prom...
+超分子 #1: Cryo-EM structure of RNA polymerase -sigma54 holoenzyme with prom...
+超分子 #2: Escherichia coli core RNA polymerase
+超分子 #3: PspF transcriptional activator
+超分子 #4: Sigma-54 transcription initiation factor
+超分子 #5: Sigma-54 promoter DNA
+分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta',DNA-directed RNA polyme...
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
+分子 #5: Psp operon transcriptional activator
+分子 #7: RNA polymerase sigma-54 factor,RNA polymerase sigma-54 factor,RNA...
+分子 #6: Non-template promoter DNA
+分子 #8: Template promoter DNA
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 1.25 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: EMDB MAP EMDB ID: |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 5.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) / 使用した粒子像数: 79355 |
初期 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE |
最終 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE |