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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-35652 | |||||||||
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タイトル | cryo-electron tomogram from mouse islets lift-out sample(TOMO_001) | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | islet / vesicle / insulin / EXOCYTOSIS | |||||||||
生物種 | Mus musculus (ハツカネズミ) | |||||||||
手法 | 電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法 | |||||||||
データ登録者 | Wu Y / Qin C / Du W / Chen L / Guo Q | |||||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: J Struct Biol / 年: 2023 タイトル: A practical multicellular sample preparation pipeline broadens the application of in situ cryo-electron tomography. 著者: Yichun Wu / Changdong Qin / Wenjing Du / Zhenxi Guo / Liangyi Chen / Qiang Guo / 要旨: The structural studies of macromolecules in their physiological context, particularly in tissue, is constrained by the bottleneck of sample preparation. In this study, we present a practical pipeline ...The structural studies of macromolecules in their physiological context, particularly in tissue, is constrained by the bottleneck of sample preparation. In this study, we present a practical pipeline for preparing multicellular samples for cryo-electron tomography. The pipeline comprises sample isolation, vitrification, and lift-out-based lamella preparation using commercially available instruments. We demonstrate the efficacy of our pipeline by visualizing pancreatic β cells from mouse islets at the molecular level. This pipeline enables the determination of the properties of insulin crystals in situ for the first time, using unperturbed samples. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_35652.map.gz | 940.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-35652-v30.xml emd-35652.xml | 8.3 KB 8.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_35652.png | 231.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-35652 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-35652 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_35652_validation.pdf.gz | 479.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_35652_full_validation.pdf.gz | 478.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_35652_validation.xml.gz | 4.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_35652_validation.cif.gz | 5.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-35652 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-35652 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_35652.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1019.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 15.3 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : mouse islets lift-out sample
全体 | 名称: mouse islets lift-out sample |
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要素 |
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-超分子 #1: mouse islets lift-out sample
超分子 | 名称: mouse islets lift-out sample / タイプ: tissue / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 電子線トモグラフィー法 |
試料の集合状態 | tissue |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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凍結 | 凍結剤: NITROGEN / 詳細: high pressure freezing. |
加圧凍結法 | 装置: OTHER 詳細: The value given for _em_high_pressure_freezing.instrument is Leica EM HP100. This is not in a list of allowed values {'BAL-TEC HPM 010', 'LEICA EM HPM100', 'LEICA EM PACT', 'LEICA EM PACT2', ...詳細: The value given for _em_high_pressure_freezing.instrument is Leica EM HP100. This is not in a list of allowed values {'BAL-TEC HPM 010', 'LEICA EM HPM100', 'LEICA EM PACT', 'LEICA EM PACT2', 'OTHER', 'EMS-002 RAPID IMMERSION FREEZER'} so OTHER is written into the XML file. |
切片作成 | 集束イオンビーム - 装置: OTHER / 集束イオンビーム - イオン: OTHER / 集束イオンビーム - 電圧: 30 / 集束イオンビーム - 電流: 0.03 / 集束イオンビーム - 時間: 1800 / 集束イオンビーム - 温度: 81 K / 集束イオンビーム - Initial thickness: 10000 / 集束イオンビーム - 最終 厚さ: 450 集束イオンビーム - 詳細: The value given for _em_focused_ion_beam.instrument is Aquilos. This is not in a list of allowed values {'DB235', 'OTHER'} so OTHER is written into the XML file. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 2.89 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 7.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 5.0 µm |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 使用した粒子像数: 38 |
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