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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-34850 | |||||||||
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タイトル | dsRNA transporter | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | dsRNA transporter / RNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA transmembrane transporter activity / dsRNA transport / RNA transport / regulatory ncRNA-mediated post-transcriptional gene silencing / double-stranded RNA binding / lysosome / membrane / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.71 Å | |||||||||
データ登録者 | Jiang DH / Zhang JT | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2024 タイトル: Structural insights into double-stranded RNA recognition and transport by SID-1. 著者: Jiangtao Zhang / Chunhua Zhan / Junping Fan / Dian Wu / Ruixue Zhang / Di Wu / Xinyao Chen / Ying Lu / Ming Li / Min Lin / Jianke Gong / Daohua Jiang / 要旨: RNA uptake by cells is critical for RNA-mediated gene interference (RNAi) and RNA-based therapeutics. In Caenorhabditis elegans, RNAi is systemic as a result of SID-1-mediated double-stranded RNA ...RNA uptake by cells is critical for RNA-mediated gene interference (RNAi) and RNA-based therapeutics. In Caenorhabditis elegans, RNAi is systemic as a result of SID-1-mediated double-stranded RNA (dsRNA) across cells. Despite the functional importance, the underlying mechanisms of dsRNA internalization by SID-1 remain elusive. Here we describe cryogenic electron microscopy structures of SID-1, SID-1-dsRNA complex and human SID-1 homologs SIDT1 and SIDT2, elucidating the structural basis of dsRNA recognition and import by SID-1. The homodimeric SID-1 homologs share conserved architecture, but only SID-1 possesses the molecular determinants within its extracellular domains for distinguishing dsRNA from single-stranded RNA and DNA. We show that the removal of the long intracellular loop between transmembrane helix 1 and 2 attenuates dsRNA uptake and systemic RNAi in vivo, suggesting a possible endocytic mechanism of SID-1-mediated dsRNA internalization. Our study provides mechanistic insights into dsRNA internalization by SID-1, which may facilitate the development of dsRNA applications based on SID-1. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_34850.map.gz | 59.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-34850-v30.xml emd-34850.xml | 15.3 KB 15.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_34850.png | 76.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-34850.cif.gz | 5.7 KB | ||
その他 | emd_34850_half_map_1.map.gz emd_34850_half_map_2.map.gz | 59.4 MB 59.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-34850 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-34850 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_34850_validation.pdf.gz | 868.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_34850_full_validation.pdf.gz | 867.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_34850_validation.xml.gz | 12.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_34850_validation.cif.gz | 14.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-34850 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-34850 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_34850.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.04 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_34850_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_34850_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : dsRNA transporter
全体 | 名称: dsRNA transporter |
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要素 |
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-超分子 #1: dsRNA transporter
超分子 | 名称: dsRNA transporter / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#3 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-分子 #1: Systemic RNA interference defective protein 1
分子 | 名称: Systemic RNA interference defective protein 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 88.02757 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MIRVYLIILM HLVIGLTQNN STTPSPIITS SNSSVLVFEI SSKMKMIEKK LEANTVHVLR LELDQSFILD LTKVAAEIVD SSKYSKEDG VILEVTVSNG RDSFLLKLPT VYPNLKLYTD GKLLNPLVEQ DFGAHRKRHR IGDPHFHQNL IVTVQSRLNA D IDYRLHVT ...文字列: MIRVYLIILM HLVIGLTQNN STTPSPIITS SNSSVLVFEI SSKMKMIEKK LEANTVHVLR LELDQSFILD LTKVAAEIVD SSKYSKEDG VILEVTVSNG RDSFLLKLPT VYPNLKLYTD GKLLNPLVEQ DFGAHRKRHR IGDPHFHQNL IVTVQSRLNA D IDYRLHVT HLDRAQYDFL KFKTGQTTKT LSNQKLTFVK PIGFFLNCSE QNISQFHVTL YSEDDICANL ITVPANESIY DR SVISDKT HNRRVLSFTK RADIFFTETE ISMFKSFRIF VFIAPDDSGC STNTSRKSFN EKKKISFEFK KLENQSYAVP TAL MMIFLT TPCLLFLPIV INIIKNSRKL APSQSNLISF SPVPSEQRDM DLSHDEQQNT SSELENNGEI PAAENQIVEE ITAE NQETS VEEGNREIQV KIPLKQDSLS LHGQMLQYPV AIILPVLMHT AIEFHKWTTS TMANRDEMCF HNHACARPLG ELRAW NNII TNIGYTLYGA IFIVLSICRR GRHEYSHVFG TYECTLLDVT IGVFMVLQSI ASATYHICPS DVAFQFDTPC IQVICG LLM VRQWFVRHES PSPAYTNILL VGVVSLNFLI SAFSKTSYVR FIIAVIHVIV VGSICLAKER SLGSEKLKTR FFIMAFS MG NFAAIVMYLT LSAFHLNQIA TYCFIINCIM YLMYYGCMKV LHSERITSKA KLCGALSLLA WAVAGFFFFQ DDTDWTRS A AASRALNKPC LLLGFFGSHD LWHIFGALAG LFTFIFVSFV DDDLINTRKT SINIF UniProtKB: Systemic RNA interference defective protein 1 |
-分子 #2: RNA (37-MER)
分子 | 名称: RNA (37-MER) / タイプ: rna / ID: 2 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 11.894137 KDa |
配列 | 文字列: GGGCAAUGUG ACUGCAUCAG CAGUCACAUU GCCCAAG |
-分子 #3: RNA (37-MER)
分子 | 名称: RNA (37-MER) / タイプ: rna / ID: 3 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 11.825017 KDa |
配列 | 文字列: CUUGGGCAAU GUGACUGCUG AUGCAGUCAC AUUGCCC |
-分子 #4: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 2 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 60.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.71 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 108090 |
初期 角度割当 | タイプ: RANDOM ASSIGNMENT |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |