[日本語] English
万見
- EMDB-33837: Structure of Csy-AcrIF4-dsDNA -

+
データを開く


IDまたはキーワード:

読み込み中...

-
基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-33837
タイトルStructure of Csy-AcrIF4-dsDNA
マップデータ
試料
  • 複合体: Csy-AcrIF4-dsDNA
    • 複合体: Csy-AcrIF4
      • タンパク質・ペプチド: Type I-F CRISPR-associated protein Csy1
      • タンパク質・ペプチド: CRISPR-associated protein Csy3
      • タンパク質・ペプチド: CRISPR type I-F/YPEST-associated protein Csy2
      • タンパク質・ペプチド: AcrIF4
      • タンパク質・ペプチド: Csy4
    • 複合体: RNA
      • RNA: RNA (58-MER)
    • 複合体: DNA
      • DNA: DNA (39-MER)
      • DNA: DNA (5'-D(P*AP*GP*CP*AP*GP*CP*TP*GP*CP*AP*CP*C)-3')
キーワードIMMUNE SYSTEM-RNA-DNA complex
機能・相同性CRISPR-associated protein Csy1 / CRISPR-associated protein (Cas_Csy1) / CRISPR-associated protein Csy2 / CRISPR-associated protein (Cas_Csy2) / CRISPR-associated protein Csy3 / CRISPR-associated protein (Cas_Csy3) / Uncharacterized protein / CRISPR-associated protein Csy3 / Uncharacterized protein
機能・相同性情報
生物種Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.37 Å
データ登録者Feng Y / Zhang LX
資金援助 中国, 1件
OrganizationGrant number国
National Science Foundation (NSF, China)32171274 中国
引用ジャーナル: J Biol Chem / 年: 2022
タイトル: Anti-CRISPR protein AcrIF4 inhibits the type I-F CRISPR-Cas surveillance complex by blocking nuclease recruitment and DNA cleavage.
著者: Zhengyu Gao / Laixing Zhang / Zihao Ge / Hao Wang / Yourun Yue / Zhuobing Jiang / Xin Wang / Chenying Xu / Yi Zhang / Maojun Yang / Yue Feng /
要旨: The clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-Cas system provides prokaryotes with protection against mobile genetic elements such as phages. In turn, phages deploy anti- ...The clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-Cas system provides prokaryotes with protection against mobile genetic elements such as phages. In turn, phages deploy anti-CRISPR (Acr) proteins to evade this immunity. AcrIF4, an Acr targeting the type I-F CRISPR-Cas system, has been reported to bind the crRNA-guided surveillance (Csy) complex. However, it remains controversial whether AcrIF4 inhibits target DNA binding to the Csy complex. Here, we present structural and mechanistic studies into AcrIF4, exploring its unique anti-CRISPR mechanism. While the Csy-AcrIF4 complex displays decreased affinity for target DNA, it is still able to bind the DNA. Our structural and functional analyses of the Csy-AcrIF4-dsDNA complex revealed that AcrIF4 binding prevents rotation of the helical bundle of the Cas8f subunit induced by dsDNA binding, therefore resulting in failure of nuclease Cas2/3 recruitment and DNA cleavage. Overall, our study provides an interesting example of attack on the nuclease recruitment event by an Acr, but not conventional mechanisms of blocking binding of target DNA.
履歴
登録2022年7月14日-
ヘッダ(付随情報) 公開2023年3月29日-
マップ公開2023年3月29日-
更新2024年7月3日-
現状2024年7月3日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

-
構造の表示

添付画像

emd_33837.png

ダウンロードとリンク

-
マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_33837.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 52.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.97 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.06
最小 - 最大-0.05292088 - 2.3923914
平均 (標準偏差)0.00398018 (±0.04177604)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ240240240
Spacing240240240
セルA=B=C: 232.8 Å
α=β=γ: 90.0 °

-
添付データ

-
追加マップ: #1

ファイルemd_33837_additional_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
ハーフマップ: #2

ファイルemd_33837_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
ハーフマップ: #1

ファイルemd_33837_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
試料の構成要素

+
全体 : Csy-AcrIF4-dsDNA

全体名称: Csy-AcrIF4-dsDNA
要素
  • 複合体: Csy-AcrIF4-dsDNA
    • 複合体: Csy-AcrIF4
      • タンパク質・ペプチド: Type I-F CRISPR-associated protein Csy1
      • タンパク質・ペプチド: CRISPR-associated protein Csy3
      • タンパク質・ペプチド: CRISPR type I-F/YPEST-associated protein Csy2
      • タンパク質・ペプチド: AcrIF4
      • タンパク質・ペプチド: Csy4
    • 複合体: RNA
      • RNA: RNA (58-MER)
    • 複合体: DNA
      • DNA: DNA (39-MER)
      • DNA: DNA (5'-D(P*AP*GP*CP*AP*GP*CP*TP*GP*CP*AP*CP*C)-3')

+
超分子 #1: Csy-AcrIF4-dsDNA

超分子名称: Csy-AcrIF4-dsDNA / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)

+
超分子 #2: Csy-AcrIF4

超分子名称: Csy-AcrIF4 / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#5
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)

+
超分子 #3: RNA

超分子名称: RNA / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #6
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)

+
超分子 #4: DNA

超分子名称: DNA / タイプ: complex / ID: 4 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #7-#8

+
分子 #1: Type I-F CRISPR-associated protein Csy1

分子名称: Type I-F CRISPR-associated protein Csy1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 詳細: WP_004343803.1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 49.313254 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MTSPLPTPTW QELRQFIESF IQERLQGKLD KLHPDEDDKR QTLLATHRRE AWLADAARRV GQLQLVTHTL KPIHPDARGS NLHSLPQAP GQPGLAGSHE LGDRLVSDVV GNAAALDVFK FLSLQYQGKN LLNWLTEDSA EAVQALSDNA EQAREWRQAF I GITAVKGA ...文字列:
MTSPLPTPTW QELRQFIESF IQERLQGKLD KLHPDEDDKR QTLLATHRRE AWLADAARRV GQLQLVTHTL KPIHPDARGS NLHSLPQAP GQPGLAGSHE LGDRLVSDVV GNAAALDVFK FLSLQYQGKN LLNWLTEDSA EAVQALSDNA EQAREWRQAF I GITAVKGA PASHSLAKQL YFPLPGSGYH LLAPLFPTSL VHHVHALLRE ARFGDAAKAA REARSRQESW PHGFSEYPNL AI QKFGGTK PQNISQLNSE RYGENWLLPS LPPHWQRQDQ RAPIRHSSVF EHDFGRSPEV SRLTRTLQRL LAKTRHNNFT IRR YRAQLV GQICDEALQY AARLRELEPG WSATPGCQLH DAEQLWLDPL RAQTDETFLQ RRLRGDWPAE VGNRFANWLN RAVS SDSQI LGSPEAAQWS QELSKELTMF KEILEDERD

UniProtKB: Uncharacterized protein

+
分子 #2: CRISPR-associated protein Csy3

分子名称: CRISPR-associated protein Csy3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 6 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 37.623324 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MSKPILSTAS VLAFERKLDP SDALMSAGAW AQRDASQEWP AVTVREKSVR GTISNRLKTK DRDPAKLDAS IQSPNLQTVD VANLPSDAD TLKVRFTLRV LGGAGTPSAC NDAAYRDKLL QTVATYVNEQ GFAELARRYA HNLANARFLW RNRVGAEAVE V RINHIRQG ...文字列:
MSKPILSTAS VLAFERKLDP SDALMSAGAW AQRDASQEWP AVTVREKSVR GTISNRLKTK DRDPAKLDAS IQSPNLQTVD VANLPSDAD TLKVRFTLRV LGGAGTPSAC NDAAYRDKLL QTVATYVNEQ GFAELARRYA HNLANARFLW RNRVGAEAVE V RINHIRQG EVARTWRFDA LAIGLRDFKA DAELDALAEL IASGLSGSGH VLLEVVAFAR IGDGQEVFPS QELILDKGDK KG QKSKTLY SVRDAAAIHS QKIGNALRTI DTWYPDEDGL GPIAVEPYGS VTSQGKAYRQ PKQKLDFYTL LDNWVLRDEA PAV EQQHYV IANLIRGGVF GEAEEK

UniProtKB: CRISPR-associated protein Csy3

+
分子 #3: CRISPR type I-F/YPEST-associated protein Csy2

分子名称: CRISPR type I-F/YPEST-associated protein Csy2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 36.244074 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MSVTDPEALL LLPRLSIQNA NAISSPLTWG FPSPGAFTGF VHALQRRVGI SLDIELDGVG IVCHRFEAQI SQPAGKRTKV FNLTRNPLN RDGSTAAIVE EGRAHLEVSL LLGVHGDGLD DHPAQEIARQ VQEQAGAMRL AGGSILPWCN ERFPAPNAEL L MLGGSDEQ ...文字列:
MSVTDPEALL LLPRLSIQNA NAISSPLTWG FPSPGAFTGF VHALQRRVGI SLDIELDGVG IVCHRFEAQI SQPAGKRTKV FNLTRNPLN RDGSTAAIVE EGRAHLEVSL LLGVHGDGLD DHPAQEIARQ VQEQAGAMRL AGGSILPWCN ERFPAPNAEL L MLGGSDEQ RRKNQRRLTR RLLPGFALVS REALLQQHLE TLRTTLPEAT TLDALLDLCR INFEPPATSS EEEASPPDAA WQ VRDKPGW LVPIPAGYNA LSPLYLPGEV RNARDRETPL RFVENLFGLG EWLSPHRVAA LSDLLWYHHA EPDKGLYRWS TPR FVEHAI A

UniProtKB: Uncharacterized protein

+
分子 #4: AcrIF4

分子名称: AcrIF4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / 詳細: WP_016068584.1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 11.115526 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MMTISKTDID CYLQTYVVID PVSNGWQWGI DENGVGGALH HGRVEMVEGE NGYFGLRGAT HPTEKEAMAA ALGYLWRCRQ DLVAIARND AIEAEKYRAK A

+
分子 #5: Csy4

分子名称: Csy4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / 詳細: WP_004343806.1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 21.429477 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MDHYLDIRLR PDPEFPPAQL MSVLFGKLHQ ALVAQGGDRI GVSFPDLDES RSRLGERLRI HASADDLRAL LARPWLEGLR DHLQFGEPA VVPHPTPYRQ VSRVQAKSNP ERLRRRLMRR HDLSEEEARK RIPDTVARTL DLPFVTLRSQ STGQHFRLFI R HGPLQATA EEGGFTCYGL SKGGFVPWF

+
分子 #6: RNA (58-MER)

分子名称: RNA (58-MER) / タイプ: rna / ID: 6 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 19.265404 KDa
配列文字列:
CUAAGAAAUU CACGGCGGGC UUGAUGUCCG CGUCUACCUG GUUCACUGCC GUGUAGGCAG

GENBANK: GENBANK: HQ326201.1

+
分子 #7: DNA (39-MER)

分子名称: DNA (39-MER) / タイプ: dna / ID: 7 / コピー数: 1 / 分類: DNA
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 16.708691 KDa
配列文字列: (DG)(DG)(DA)(DA)(DG)(DC)(DC)(DA)(DT)(DC) (DC)(DA)(DG)(DG)(DT)(DA)(DG)(DA)(DC)(DG) (DC)(DG)(DG)(DA)(DC)(DA)(DT)(DC)(DA) (DA)(DG)(DC)(DC)(DC)(DG)(DC)(DC)(DG)(DT) (DG) (DA)(DA)(DG)(DG)(DT) ...文字列:
(DG)(DG)(DA)(DA)(DG)(DC)(DC)(DA)(DT)(DC) (DC)(DA)(DG)(DG)(DT)(DA)(DG)(DA)(DC)(DG) (DC)(DG)(DG)(DA)(DC)(DA)(DT)(DC)(DA) (DA)(DG)(DC)(DC)(DC)(DG)(DC)(DC)(DG)(DT) (DG) (DA)(DA)(DG)(DG)(DT)(DG)(DC)(DA) (DG)(DC)(DT)(DG)(DC)(DT)

GENBANK: GENBANK: CP061850.1

+
分子 #8: DNA (5'-D(P*AP*GP*CP*AP*GP*CP*TP*GP*CP*AP*CP*C)-3')

分子名称: DNA (5'-D(P*AP*GP*CP*AP*GP*CP*TP*GP*CP*AP*CP*C)-3') / タイプ: dna / ID: 8 / コピー数: 1 / 分類: DNA
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 16.574561 KDa
配列文字列: (DA)(DG)(DC)(DA)(DG)(DC)(DT)(DG)(DC)(DA) (DC)(DC)(DT)(DT)(DC)(DA)(DC)(DG)(DG)(DC) (DG)(DG)(DG)(DC)(DT)(DT)(DG)(DA)(DT) (DG)(DT)(DC)(DC)(DG)(DC)(DG)(DT)(DC)(DT) (DA) (DC)(DC)(DT)(DG)(DG) ...文字列:
(DA)(DG)(DC)(DA)(DG)(DC)(DT)(DG)(DC)(DA) (DC)(DC)(DT)(DT)(DC)(DA)(DC)(DG)(DG)(DC) (DG)(DG)(DG)(DC)(DT)(DT)(DG)(DA)(DT) (DG)(DT)(DC)(DC)(DG)(DC)(DG)(DT)(DC)(DT) (DA) (DC)(DC)(DT)(DG)(DG)(DA)(DT)(DG) (DG)(DC)(DT)(DT)(DC)(DC)

GENBANK: GENBANK: CP061850.1

-
実験情報

-
構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

-
試料調製

緩衝液pH: 7
凍結凍結剤: ETHANE

-
電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 50.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: OTHER / 撮影モード: DARK FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.7 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

+
画像解析

初期モデルモデルのタイプ: OTHER
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.37 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 117510
初期 角度割当タイプ: OTHER
最終 角度割当タイプ: OTHER
FSC曲線 (解像度の算出)

+
万見について

-
お知らせ

-
2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

-
2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

+
2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

+
2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

+
2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

-
万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

他の情報も見る