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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | In situ structure of polymerase complex of mammalian reovirus in the elongation state | |||||||||
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![]() | mammalian reovirus / cryo-em / RNA dependent RNA polymerase / transcription / VIRAL PROTEIN / VIRAL PROTEIN-RNA complex | |||||||||
機能・相同性 | ![]() viral inner capsid / host cytoskeleton / viral outer capsid / 7-methylguanosine mRNA capping / viral genome replication / viral capsid / mRNA guanylyltransferase activity / viral nucleocapsid / mRNA 5'-cap (guanine-N7-)-methyltransferase activity / host cell cytoplasm ...viral inner capsid / host cytoskeleton / viral outer capsid / 7-methylguanosine mRNA capping / viral genome replication / viral capsid / mRNA guanylyltransferase activity / viral nucleocapsid / mRNA 5'-cap (guanine-N7-)-methyltransferase activity / host cell cytoplasm / hydrolase activity / RNA helicase activity / RNA-directed RNA polymerase / RNA-directed RNA polymerase activity / GTP binding / structural molecule activity / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.0 Å | |||||||||
![]() | Bao KY / Zhang XL / Li DY / Zhu P | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: In situ structures of polymerase complex of mammalian reovirus illuminate RdRp activation and transcription regulation. 著者: Keyan Bao / Xueli Zhang / Dongyu Li / Wei Sun / Zhenzhao Sun / Jingfei Wang / Ping Zhu / ![]() 要旨: Mammalian reovirus (reovirus) is a multilayered, turreted member of characterized by transcription of dsRNA genome within the innermost capsid shell. Here, we present high-resolution in situ ...Mammalian reovirus (reovirus) is a multilayered, turreted member of characterized by transcription of dsRNA genome within the innermost capsid shell. Here, we present high-resolution in situ structures of reovirus transcriptase complex in an intact double-layered virion, and in the uncoated single-layered core particles in the unloaded, reloaded, pre-elongation, and elongation states, respectively, obtained by cryo-electron microscopy and sub-particle reconstructions. At the template entry of RNA-dependent RNA polymerase (RdRp), the RNA-loading region gets flexible after uncoating resulting in the unloading of terminal genomic RNA and inactivity of transcription. However, upon adding transcriptional substrates, the RNA-loading region is recovered leading the RNAs loaded again. The priming loop in RdRp was found to play a critical role in regulating transcription, which hinders the elongation of transcript in virion and triggers the rearrangement of RdRp C-terminal domain (CTD) during elongation, resulting in splitting of template-transcript hybrid and opening of transcript exit. With the integration of these structures, a transcriptional model of reovirus with five states is proposed. Our structures illuminate the RdRp activation and regulation of the multilayered turreted reovirus. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 117.9 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 25.8 KB 25.8 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 85.6 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 8.8 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 115.9 MB 115.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 14.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 16.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.36 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
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試料の構成要素
+全体 : Mammalian orthoreovirus 3
+超分子 #1: Mammalian orthoreovirus 3
+超分子 #3: RNA
+超分子 #2: Mammalian orthoreovirus 3
+分子 #1: RNA helicase
+分子 #2: Lambda-2 protein
+分子 #5: RNA-directed RNA polymerase
+分子 #7: Mu-2 protein
+分子 #3: RNA (5'-R(P*UP*UP*UP*AP*AP*AP*AP*AP*UP*UP*UP*UP*AP*AP*AP*AP*UP*AP...
+分子 #4: RNA (36-MER)
+分子 #6: RNA (36-MER)
+分子 #8: ZINC ION
+分子 #9: S-ADENOSYLMETHIONINE
+分子 #10: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #11: URIDINE 5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #12: MAGNESIUM ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 30.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.8 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 100968 |
初期 角度割当 | タイプ: RANDOM ASSIGNMENT |
最終 角度割当 | タイプ: RANDOM ASSIGNMENT |